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作者：王文娟宋春英白曉琴楊建一單位：山西醫科大學細胞生物與遺傳學教研室山西太原山西省人口計生委科研所

硒與雄性生殖系統的關系非常密切，睪丸中硒的含量明顯高于其他組織，硒缺乏可降低睪酮水平，延緩生殖系統發育。該研究觀察缺硒對小鼠生殖細胞的影響及補硒后生殖細胞的損傷能否得到恢復，旨在為今后硒的補充和臨床應用提供理論和實驗依據。

1材料與方法

1.1試劑蘇木色精(上海潤捷化學試劑有限公司進口分裝);酚紅(北京化學試劑廠);伊紅(北京化工廠);硒標準液(國家標準物質中心);鹽酸;高氯酸;硝酸(北京化工廠)。

1.2動物分組與處理健康昆明種雄性小鼠，3周齡，體重10～20g，由山醫科大學動物中心提供，動物合格證號為SCXK2009-001。將雄性小鼠隨機分為4組，即對照組、缺硒組、低劑量補硒組，高劑量補硒組。對照組給予普通飼料;缺硒組，給予缺硒飼料(0.024mg/kg);低劑量組，給缺硒飼料喂養，第6周開始補喂低劑量硒(0.224mg/kg);高劑量組，給硒缺乏飼料喂養，第6周開始補喂高劑量硒(1.024mg/kg)。于第11周處死。

1.3觀察指標

1.3.1早期精細胞微核試驗:頸椎脫臼法處死小鼠，摘取一側睪丸，參照本實驗室的方法進行。每只動物計數1000個早期精細胞，計算含微核細胞率(一個細胞多個微核時仍計算一個細胞)。

1.3.2精子畸形試驗:參照改良的小鼠精子畸形實驗方法進行，取制備好的精子懸液1滴，置清潔載玻片上，推片，晾干后甲醇固定，1%伊紅溶液染色1h，在高倍鏡下檢查精子形態，每只動物觀察300個精子，記數畸形精子數。

1.4統計學方法數據采用SPSS13.0統計軟件，采用方差分析，組間比較采用多重比較，最小顯著差法(Least-significantdifference，LSD)。

2結果

2.1早期精細胞微核試驗如表1所示，缺硒組的微核發生率顯著高于對照組(P＜0.05)。補充硒飼料后，與缺硒組相比較，低劑量補硒組和高劑量補硒組微核發生率發生率略有降低(P＞0.05)，與對照組比較，到11周時降至對照組水平。

2.2精子畸形試驗如表2所示，缺硒組小鼠的精子畸形出現率顯著高于對照組。補充硒飼料后，第11周低劑量補硒組和高劑量補硒組精子畸形率顯著低于硒缺乏組。

3討論

硒是一種人體必需的微量元素，與雄性生殖系統的關系非常密切，可保護細胞膜和內部結構免受過氧化物的損害與干擾，因缺硒而導致的睪丸組織的過氧化狀態是男性不育的一個主要誘發因素。本實驗觀察了缺硒對小鼠精子發生造成的遺傳學損傷，以及補充硒后精子形態的恢復情況。結果顯示，缺硒組早期精細胞微核出現率顯著高于對照組，而且隨硒缺乏時間的延長，這種損傷有逐漸加重的趨勢，這與國外文獻報道的實驗結果一致，其機制可能是由于硒缺乏可降低精原細胞或精母細胞中含硒酶(GPx4)的活力，使小鼠睪丸細胞處于過氧化狀態，從而引起小鼠染色體斷裂和DNA損傷。本實驗結果顯示，缺硒組小鼠的早期精細胞微核率和精子畸形出現率顯著高于對照組，補充硒飼料后，各劑量補硒組與缺硒組比較，損傷均有明顯的恢復，第11周小鼠早期精細胞微核率和精子畸形率明顯下降，其中早期精細胞微核率基本恢復到正常水平，但在補充高劑量硒后，畸形率又有所回升，說明補硒可降低體內過氧化水平，對抗氧化應激和脂質過氧化損傷，減少精原細胞和精母細胞微核率的發生。但是大劑量、長時間高硒飲食反而可造成精子畸形率的升高，對硒缺乏的修復是不利的。而關于補硒對于人體的可靠性和安全性仍需要進一步的研究。