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摘要：

我國牛群中普遍存在牛副流感病毒3型（BPIV3）的感染，嚴(yán)重危害著我國養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展。本文簡(jiǎn)要介紹了BPIV3的臨床表現(xiàn)、流行病學(xué)、病原學(xué)、致病性、診斷技術(shù)和疫苗研發(fā)以及防控技術(shù)7個(gè)方面的內(nèi)容。研究表明，開發(fā)出有效疫苗是控制BPIV3的理想手段，對(duì)預(yù)防由BPIV3引起的牛呼吸道疾病具有重要意義。

關(guān)鍵詞：

牛副流感病毒3型；呼吸道疾病；研究進(jìn)展

牛副流感病毒3型（Bovine.parainfluenza.virus.3,.BPIV3）屬于單分子負(fù)鏈RNA病毒目（Mononegavirles）副黏病毒科（Paramyxoviridae）副黏病毒亞科（Paramyxovirinae）呼吸道病毒屬（Respirovirus）的成員，是引起犢牛呼吸道疾病的主要病原之一。1959年Reisinger等[1]和Hoerlein[2]等在美國的牛體中首次分離到BPIV3，同時(shí)在這些動(dòng)物中查出了該病毒的抗體。目前，BPIV3廣泛流行于世界各國，在美洲、歐洲、亞洲各國均不斷發(fā)生或流行。研究表明牛傳染性鼻氣管炎病毒（IBRV）、BPIV3、牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）和牛呼吸道合胞體病毒（BRSV）是目前已知的引發(fā)牛呼吸道傳染病的主要病毒性病原[3,4]。近年來，我國山東、黑龍江、遼寧和內(nèi)蒙古等多個(gè)省份發(fā)生了嚴(yán)重的犢牛呼吸道疾病綜合征，造成很大的經(jīng)濟(jì)損失。經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查和病原學(xué)檢測(cè)，表明BPIV3在犢牛呼吸道疾病綜合征中起重要作用。2008年，我國首次從病牛鼻拭子中分離出BPIV3，并進(jìn)行了全基因組序列測(cè)定，進(jìn)化樹分析表明該分離株為一新的基因型，定義為BPIV3基因C型，此為世界首次報(bào)道[5]。隨后南美的阿根廷及亞洲的韓國亦報(bào)道了BPIV3基因C型的存在[6,7]。血清流行病學(xué)調(diào)查顯示，我國部分地區(qū)BPIV3的血清陽性率高達(dá)77.6%(1936/2489)[8]，應(yīng)引起行業(yè)的高度重視，否則將危害我國養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展。本文就我國BPIV3的研究進(jìn)展做一介紹。

1臨床表現(xiàn)

牛體感染BPIV3后的潛伏期一般為2~5d。病牛出現(xiàn)體溫升高、食欲不振、精神萎靡等癥狀，體溫最高可達(dá).41℃以上，流淚、流鼻液、咳嗽，嚴(yán)重病例表現(xiàn)為呼吸困難。隨著病情的加重而繼發(fā)細(xì)菌或支原體感染，如多殺性巴氏桿菌、溶血性曼氏桿菌、牛支原體感染等，從而引起嚴(yán)重的肺炎，導(dǎo)致呼吸道疾病綜合征，致使死亡率大大增加[9]。

2流行病學(xué)

據(jù)王海軍等[8]報(bào)道，從黑龍江、遼寧、新疆、云南、貴州、廣西、河北、山東、河南、江西、湖南和福建12個(gè)省（區(qū)）采集牛血清樣品2.489份，用血清中和試驗(yàn)進(jìn)行BPIV抗體檢測(cè)，顯示BPIV3抗體陽性率為77.6%(1936/2489)。其中江西省牛血清抗體陽性率為27.8%，其他省份陽性率均高于50%，2/3的省份樣品陽性率超過80%，福建省樣品陽性率高達(dá)100%。朱遠(yuǎn)茂于2014年用中和試驗(yàn)檢測(cè)黑龍江省BPIV3血清抗體陽性率為97.06%（463/477）（未發(fā)表）。

3病原學(xué)

2008年，朱遠(yuǎn)茂等[5]從山東采集的病牛鼻拭子中分離出4株BPIV3，對(duì)其中的一株BPIV3.SD0835進(jìn)行了全基因組序列測(cè)定，進(jìn)化樹分析表明與國內(nèi)2008年黑龍江分離的DQ1株（屬于基因A型）和2009年內(nèi)蒙古分離株NM09株（屬于基因A型）差異較大[10,11]，與國外已經(jīng)公開發(fā)表的BPIV3基因A型和基因B型序列亦有較大差異，表明我國分離株為一新的基因型，定義為BPIV3基因C型，屬于世界上首次報(bào)道基因C型。隨后在黑龍江省、遼寧省和江蘇省亦分離或檢測(cè)到了BPIV3基因C型。近兩年，朱遠(yuǎn)茂等[12]從發(fā)病現(xiàn)場(chǎng)送檢樣品中多次檢測(cè)到BPIV3，主要為基因A型和C型，未檢測(cè)到基因B型，基因B型在我國是否存在還有待進(jìn)一步研究。

4致病性

將BPIV3接毒Balb/c.小鼠，24h后即可從小鼠肺及氣管中檢出病原。肺組織中病毒RNA的拷貝數(shù)明顯高于氣管組織。組織病理學(xué)變化主要以肺泡間隔增寬、局灶性纖維素性肺炎為主。豚鼠接毒BPIV3后表現(xiàn)出呼吸道相關(guān)的臨床癥狀，解剖學(xué)可見肺臟暗紅、實(shí)變。組織病理學(xué)變化包括肺泡間隔增寬和纖維素性肺炎。利用病毒分離滴定、實(shí)時(shí)RT-PCR.和免疫組化在接毒24h呼吸道組織中檢測(cè)到了病毒復(fù)制。IHC染色揭示了肺臟和氣管是BPIV3主要復(fù)制的組織部位[13]。奶牛經(jīng)BPIV3攻毒后表現(xiàn)精神沉郁、流鼻液、眼有分泌物、咳嗽、呼吸困難等臨床癥狀，有的表現(xiàn)體溫升高并且可從鼻腔排毒。病理變化表現(xiàn)為肺泡壁毛細(xì)血管擴(kuò)張、淤血，肺泡腔內(nèi)有少量紅細(xì)胞散在，伴有少量漿液析出；氣管黏膜層消失；淋巴小結(jié)內(nèi)淋巴細(xì)胞有輕微減少，部分淋巴細(xì)胞出現(xiàn)凋亡；肝臟、脾臟、腎臟和心臟無明顯病理變化[12]。

5診斷技術(shù)

病原學(xué)診斷：董秀梅等[14]基于BPIV3.M基因建立了TaqMan實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR，用于快速定量檢測(cè)BPIV3。該方法特異性強(qiáng)、敏感性高、重復(fù)性好，可用于人工感染樣本的檢測(cè)。牛呼吸道疾病大多呈現(xiàn)多病原感染，一般先由病毒感染，引起機(jī)體免疫抑制，再繼發(fā)細(xì)菌感染，最終導(dǎo)致牛呼吸道疾病綜合征，引起牛嚴(yán)重呼吸道疾病，使養(yǎng)牛業(yè)蒙受重大的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重危害養(yǎng)牛業(yè)的健康發(fā)展。所以，很有必要建立同時(shí)檢測(cè)牛呼吸道病多病原的診斷方法。目前已建立了同時(shí)檢測(cè)牛病毒性腹瀉病毒、牛副流感病毒3型和牛呼吸道合胞體病毒3種病毒的多重RT-PCR診斷方法，該方法具有特異、快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)，可用于對(duì)這3種病毒的同時(shí)檢測(cè)和鑒別診斷[15]。血清學(xué)診斷：中和試驗(yàn)是該病常用的血清學(xué)診斷方法，同時(shí)是該病血清學(xué)診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，具有很高的可信度。血凝試驗(yàn)和血凝抑制試驗(yàn)因?yàn)槌杀镜汀⒉僮鞣奖恪⒛茉诙虝r(shí)間內(nèi)獲得結(jié)果等優(yōu)點(diǎn)也是該病常用的檢測(cè)方法，所用紅細(xì)胞多為豚鼠或雞紅細(xì)胞[16]。

6疫苗研發(fā)

BPIV3經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)并滅活后與油佐劑乳化可制成BPIV3滅活疫苗。實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)證實(shí)了BPIV3滅活疫苗對(duì)牛是安全的，可誘導(dǎo)接種牛產(chǎn)生較高滴度的中和抗體。牛經(jīng)BPIV3滅活疫苗免疫后，可抵抗強(qiáng)毒株的攻擊[2]。但該疫苗目前尚未上市。

7防控技術(shù)

由于有關(guān)疫苗尚未上市，目前尚無BPIV3特異性防控手段。據(jù)報(bào)道，沙冬青總生物堿具有較強(qiáng)的體外抗牛副流感病毒3型的作用。采用綜合作用方式給藥時(shí)，其對(duì)BPIV3感染的治療指數(shù)高達(dá)25.76，表明沙冬青總生物堿的作用效果與其毒性之間的相對(duì)距離較大，說明沙冬青總生物堿對(duì)BPIV3有寬廣的安全質(zhì)量濃度范圍[17]。

8結(jié)束語

調(diào)查表明，我國牛群中已經(jīng)普遍存在BPIV3的感染，嚴(yán)重危害著我國養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展。現(xiàn)階段我國對(duì)該病的研究還處于對(duì)病原的分離、檢測(cè)等初級(jí)階段，在臨床預(yù)防和治療中還沒有安全、高效的疫苗。隨著我國養(yǎng)牛業(yè)的集約化發(fā)展，不少牛舍養(yǎng)殖密度大、空氣質(zhì)量差，這些因素的存在為該病的傳播和流行提供了可能，所以深入開展BPIV3的研究，盡快開發(fā)出有效疫苗是控制BPIV3的理想手段。BPIV3的控制對(duì)預(yù)防牛呼吸道疾病的發(fā)生具有重要意義。

作者：徐子晟 朱遠(yuǎn)茂 單位：農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)機(jī)械試驗(yàn)鑒定總站 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所牛羊傳染病創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)