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《食品科技雜志》2014年第八期

1方法

1.1動物分組和衰老小鼠造模將小鼠分為5組，每組16只(雌雄各半)。各組小鼠頸背部皮下注射10%D-半乳糖，1次/d，連續28d，建立亞急性衰老模型小鼠，并每天稱重。

1.2動物給藥各組小鼠在注射D-半乳糖7d后開始灌胃給藥。按下列分組給藥：NS組生理鹽水、Sang組西洋參注射液(50mg/mL)、Gln組谷氨酰胺(200mg/mL)、Ⅰ組豆丹高濃度水提液(200mg/mL)、Ⅱ組豆丹低濃度水提液(100mg/mL)。自由攝食和飲水，連續灌胃21d。

1.3負重游泳實驗及力竭游泳時間的測定[7]末次給藥1h后，所有組均進行負重游泳運動，將小鼠放入恒溫水缸中(水深>30cm)、水溫(25±1)℃，當鼠頭沉入水中5s不能抬起并不能完成翻正反射計時停止，為力竭游泳時間。在整個實驗過程中使每只小鼠四肢不停運動，如果小鼠漂浮在水面停止活動，可用木棒在其附近輕輕攪動是指繼續活動。在每只小鼠尾部系上相當于自身體重10%的鐵片。

1.4爬繩耐力實驗及爬繩耐力時間的測定[8]末次給藥后30min后，將小鼠放在兩端固定在高度1m架子的繩子中央處，使繩子中央低垂，呈V型，避免小鼠輕松爬至繩的兩端。使小鼠肌肉處于靜力緊張狀態。將繩子中央低垂出下方放置一水溫15℃、水深10cm的水盆，第3次落水時終止實驗，累計記錄3次小鼠因肌肉疲勞而從繩子上跌落的時間。

1.5LD和BUN含量測定[9]小鼠連續灌胃21d，末次灌胃30min后，將其置于游泳池中不負重游泳30min，水溫(30±1)℃。泳后休息30min眼球取血，室溫靜置2h，3000r/min、10min離心取上清液，并按試劑盒說明書所述的方式測定LD和BUN含量。

1.6OD含量測定同上述過程。眼球取血后，脫頸椎死，立即取出肝臟，用生理鹽水漂洗，濾紙吸干稱重，用0.9%的生理鹽水制備10%組織勻漿。10000r/min、10min離心取上清液，并按試劑盒說明書所述的方式測定OD含量。

2結果與分析

從實驗開始至結束，各實驗組與對照組體重無顯著性差異(P>0.05)，說明豆丹對小鼠體重無顯著影響。連續灌胃生理鹽水(陰性對照組)、西洋參(陽性對照組)、谷氨酰胺(陽性對照組)、豆丹高濃度水提液(200mg/mL)、豆丹低濃度水提液(100mg/mL)21d后，各實驗組的小鼠負重力竭游泳時間均明顯長于NS組，也明顯高于Sang組和Gln組。其中Ⅰ組差異極顯著(P<0.01)，游泳時間最長，與NS組相比，延長率高達212.56%；Ⅱ組差異顯著(P<0.05)，與NS組相比，延長率高達129.15%。可見豆丹水提液能延長小鼠負重游泳時間，提高小鼠的體能。連續灌胃21d后，各實驗組的小鼠力竭爬繩時間均明顯長于NS組，差異顯著(P<0.05)。Ⅱ組爬繩時間最長，與NS組相比，延長率達291.41%。可見豆丹水提液能延長小鼠爬繩時間，提高小鼠的耐力。實驗結果顯示，各實驗組小鼠肝糖原含量均明顯高于對照組，差異顯著(P<0.05)，Ⅱ組效果最佳，說明豆丹水提液可提高小鼠運動后肝糖原的含量。各實驗組小鼠尿素氮的含量均低于對照組，其中Ⅰ組差異極顯著(P<0.01)，Ⅱ組差異顯著(P<0.05)，說明豆丹水提液能明顯減少小鼠運動后體內尿素氮的含量。各實驗組小鼠血乳酸的含量均明顯低于對照組，其中Ⅰ組差異極顯著(P<0.01)，Ⅱ組差異顯著(P<0.05)，說明豆丹水提液能減少小鼠運動后體內血乳酸的含量，從而延緩疲勞。

3結論

本實驗采用衰老模型，探究豆丹水提液對老年小鼠抗疲勞的影響。體力疲勞的評估方法主要有兩個方面：運動耐力實驗和生化指標的檢測。運動耐力實驗從整體上反映受試物對動物耐力的影響，是對各個系統的綜合作用[10]。力竭游泳實驗和爬繩實驗表明，豆丹高、低濃度水提液劑量組均能延長游泳時間和爬繩時間，從而提高小鼠的運動耐力，具有顯著的抗疲勞作用。生化指標如肝糖原、血乳酸、血尿素氮等的改變具有代表性，也是檢測疲勞最常用的指標。在持續劇烈運動過程中，由于肌糖原的分解供能無法滿足機體對于能量的需求，從而促使肝糖原分解供能。隨著運動時間的進一步延長，蛋白質也參與到代謝供能過程中，蛋白質通過分解產生尿素氮，從而導致生物體內的尿素氮大量富集[11-12]。因此，在機體運動過后，血乳酸、尿素氮、肝糖原的含量以及負重游泳時間能客觀系統地評價機體的抗疲勞能力的強弱，血乳酸含量越低，肝糖原含量越高，尿素氮的清除率越高，負重游泳時間越長表明抗疲勞能力越強。本實驗結果顯示，豆丹水提液能夠降低運動后小鼠的乳酸和尿素氮的含量，提高肝糖原的儲備，并有顯著效果。可以從數據上證明豆丹水提液具有抗疲勞作用。抗疲勞作用的有效劑量為豆丹高濃度水提液(200mg/mL)、低濃度水提液(100mg/mL)劑量組。豆丹作為一種地方廣受歡迎的食品，含有豐富的蛋白質、氨基酸、脂肪類物質，且來源廣泛，天然無毒，作為昆蟲源蛋白質具有巨大的開發潛力。本研究結果表明豆丹具有較好的抗疲勞作用，為開發成強身健體及抗疲勞保健食品提供依據，有良好的開發前景。

作者：徐樂孔德瑛李一婧李麗陳鳳凌王晶單位：武漢大學藥學院