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摘要：研究以羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯（hydroxypropylmethylcellulosephthalate，HPMCP）為壁材，金花茶多酚原液為芯材，采用噴霧干燥法制備金花茶多酚微膠囊，并對其制備工藝和特性進行研究。結果表明，制備金花茶多酚微膠囊的最佳工藝條件為進風溫度100℃，進料速度6.4mL/min，芯壁材質量比為2∶1，總固形物含量為2%。在此條件下制得的金花茶多酚微膠囊顆粒完整、分散性好、穩定性強，在胃腸道中具有良好的緩釋功效，抗氧化性維持在一個較高水平。

關鍵詞：金花茶多酚；微膠囊；噴霧干燥；特性

金花茶（CamelliaChrysantha（Hu）Tuyama）是山茶科、山茶屬、金花茶組植物，世界上著名的觀賞植物之一，因其珍貴性和稀有性，被譽為“茶族皇后”和“植物界的大熊貓”[1]。近年來，隨著研究技術的發展和人們保健意識的提升，金花茶的價值正被逐漸開發并廣泛應用，它不僅能調節血糖血脂、提高機體免疫力，而且在抗癌、抗氧化以及抗衰老方面也表現出極高的藥用價值，是一種優良的保健食品原材料[2]。金花茶多酚是使金花茶具有營養和藥用價值的重要活性成分[3]。目前對金花茶多酚的研究主要集中在含量測定和提取工藝方面。王坤等[4]在采用福林-酚法測定茶多酚時發現，金花茶的品種不同所含的茶多酚的量就會具有明顯差異，其中越南厚葉金花茶的茶多酚含量最多，高達11.71%。牛廣俊等[5]采用乙醇提取法從金花茶花中提取茶多酚等活性物質并進行工藝優化，總多酚提取率到達6.25%。然而，茶多酚自身存在的一些缺陷大大限制了其應用范圍，如脂溶性較差[6]、易受光和溫度的氧化破壞[7]、在腸胃中結構很不穩定[8]等等。為解決這類問題，通常采用微膠囊技術來提高茶多酚的穩定性[9]，如噴霧干燥法、復相乳化法、超臨界流體法等微膠囊技術。其中噴霧干燥法是一種工藝簡單、操作靈活、生產過程符合環保要求的方法。且目前關于金花茶多酚微膠囊的研究較少，尚未見對其特性的研究報道。本研究以羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯（hy－droxypropylmethylcellulosephthalate，HPMCP）為壁材，金花茶多酚原液為芯材，優化噴霧干燥法制備金花茶多酚微膠囊工藝條件，同時對產品的緩釋特性、穩定性和抗氧化性進行研究，以期獲得較好的微膠囊產品，對推廣金花茶的規?；N植，促進金花茶產品的開發利用以及金花茶產業價值的提升都有極為深遠的意義。

1材料與方法

1.1材料與試劑羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯：麻城市天安納米化工材料有限公司；十二烷基硫酸鈉（化學純）：東明俱進化有限公司；胃蛋白酶、胰酶（胃蛋白酶比活≥3000U/g、胰酶比活≥250NFU/mg）：北京索萊寶科技有限公司；綠茶多酚（純度95%）：上海寶曼生物科技有限公司；金花茶多酚原樣干粉、金花茶多酚提取液（純度30%）：廣西桂人堂金花茶有限公司；DPPH：FLNKA公司；鄰苯三酚：國藥集團化學試劑有限公司；鄰二氮菲：廣州化學試劑廠；以上藥品均為分析純。

1.2儀器與設備HH-4數顯恒溫水浴鍋：國華電器有限公司；GZ-L25噴霧干燥器：無錫市陽光干燥設備廠；SK-2200超聲波清洗儀：上?？茖С晝x器有限公司；UV-2802H紫外可見分光光度計：上海儀器有限公司；S-3400N掃描電子顯微鏡：日本日立公司；RE-D2AA旋轉蒸發器：上海亞榮生化儀器廠；722分光光度計：天津普瑞斯儀器有限公司。

1.3方法

1.3.1金花茶多酚微膠囊的制備工藝稱取一定量的壁材（HPMCP）溶于80%的乙醇水溶液中（按照3∶100的質量比溶解）→加入金花茶多酚提取液混勻→按芯材和壁材總重的4%加入乳化劑十二烷基硫酸鈉，混勻→高壓均質→噴霧干燥→冷卻→微膠囊產品

1.3.2酒石酸亞鐵比色法測定金花茶多酚的含量準確量取1.00mg/mL的茶多酚標準溶液0.4、0.8、1.2、1.6、2.0mL分別置于25mL容量瓶中，加入5mL酒石酸亞鐵溶液，用pH7.5的磷酸鹽緩沖溶液稀釋至刻度。用10mm比色杯在540nm處測定茶多酚標準溶液的吸光度。

1.3.3金花茶多酚微膠囊包埋率的測定[10]

1.3.3.1產品表面茶多酚含量的測定準確稱取金花茶多酚微膠囊1.00g溶于一定量的水中，定容至100mL后以3000r/min的速度高速離心15min，然后吸取上清液1mL，定容至25mL容量瓶中，10min后測其吸光度，再由標準曲線計算出濃度，即可得到金花茶多酚微膠囊表面的茶多酚含量。

1.3.3.2產品中總茶多酚含量的測定準確稱取金花茶多酚微膠囊1.00g，先用30mL的無水乙醇充分攪拌溶解壁材，再用蒸餾水定容至100mL容量瓶中，超聲處理30min后吸取上清液1mL，定容至25mL容量瓶中，10min后測其吸光度，再由標準曲線計算出濃度，即可得到金花茶多酚微膠囊中總茶多酚含量。

1.3.3.3計算包埋率包埋率/%=（1-產品表面茶多酚含量/產品總茶多酚含量）×1001.3.4金花茶多酚微膠囊的表面顯微形態觀測取一定量的金花茶多酚微膠囊用雙面膠固定在樣品臺上，經鍍金處理后，置于掃描電子顯微鏡樣品室中，并進行抽真空處理。用掃描電鏡觀察微膠囊結構。

1.3.5金花茶多酚微膠囊在模擬胃、腸液中釋放的測定

1.3.5.1模擬腸液的配制取6.8gKH2PO4溶于500mL水中，加入4%NaOH溶液調節pH值至6.8，再加入10g胰酶，混勻后定容至1000mL。

1.3.5.2模擬胃液的配制將16.4mL稀鹽酸和10g胃蛋白酶加到800mL水中，攪勻后定容至1000mL。1.3.5.3模擬胃腸環境的釋放取0.5g金花茶多酚微膠囊置于100mL人工腸液中，（37±0.5）℃恒溫水浴，以300r/min的速度攪拌，在10、20、30、60、120、180、240、300min時間段取樣，于544nm處測定吸光度，計算多酚含量，分析微膠囊在人工腸液中的溶出情況。通過計算累積釋放度觀察微膠囊在胃腸道中的緩釋效果。累積釋放度按下式計算：累積釋放度/%=（最大釋放時的多酚濃度/多酚總濃度）×1001.3.6金花茶多酚微膠囊穩定性測定各取3g金花茶多酚微膠囊和金花茶多酚原樣干粉置于敞口培養皿中，攤成厚度≤5mm的薄層，室溫保存，每隔5天各取0.5g樣品測定茶多酚含量，計算出其茶多酚保留率。

1.3.7金花茶多酚微膠囊抗氧化性的測定以綠茶多酚作為對照，研究對比金花茶多酚微膠囊（試樣A）和金花茶多酚原樣干粉（試樣B）的體外抗氧化活性，測定對羥基自由基（•OH）、超氧陰離子（O2-）和二苯基苦基苯肼自由基（DPPH•）的清除作用。

1.3.7.1清除羥基自由基（•OH）能力的測定在試管中加入2mLpH=7.4的磷酸緩沖溶液、1mL1.5mmol/L鄰二氮菲和1mL1.5mmol/LFeSO4溶液混勻后，加入1mL樣液混勻，再加入1mL0.02%H2O2，最后補充體積至8mL，在536nm處測吸光度A加樣；對照組以1mL蒸餾水代替樣品溶液，其余處理同上，測定吸光度A對照，空白組則以1mL蒸餾水代替H2O2，相同處理后測其吸光度A空白。

1.3.7.2清除二苯基苦基苯肼自由基（DPPH•）能力的測定取2mL試樣于試管中，再加入2mL0.2mmol/LDPPH•的乙醇溶液，混合均勻，0.5h后在517nm處測定吸光度A加樣；同時測2mLDPPH•溶液和2mL乙醇混合后的吸光度A對照，以及2mL樣液和2mL乙醇混合后的吸光度A空白。1.3.7.3清除超氧陰離子（O2-）能力的測定取4.5mLpH=8.2Tris-HCl緩沖溶液，分別加入1mL樣液，25℃保溫20min后加入0.3mL1mmol鄰苯三酚啟動反應，5min后測定325nm處的吸光度A加樣，同時設置對照（加入4.2mL的蒸餾水代替樣液）和空白（用蒸餾水代替鄰苯三酚溶液）。

2結果分析

2.1金花茶多酚微膠囊制備的工藝優化在噴霧干燥法制備金花茶多酚微膠囊的過程中，存在很多影響產品質量的因素。經預試驗，選擇進風溫度（A）、進料速度（B）、芯材壁材質量比（C）以及總固形物含量（D）為考察因素，以包埋率作為評價指標進行L9（34）正交試驗，對金花茶多酚微膠囊的制備進行工藝優化。

2.2金花茶多酚微膠囊的表面顯微形態用掃描電子顯微鏡在放大200倍的條件下可以較好的觀察到金花茶多酚微膠囊的表面結構。

2.3金花茶多酚微膠囊在模擬胃、腸液中的釋放金花茶多酚微膠囊在人工胃、腸液中的溶出情況。

2.4金花茶多酚微膠囊穩定性測定金花茶多酚微膠囊和金花茶多酚原樣干粉在貯藏期間的茶多酚保留率變化情況。

2.5金花茶多酚微膠囊抗氧化性測定2.5.1對•OH的清除以綠茶多酚作為陽性對照，按照1.3.7.1測定試樣A和試樣B對•OH的清除能力。

2.5.2對DPPH•的清除以綠茶多酚作為陽性對照，按照1.3.7.2測定試樣A和試樣B對DPPH•的清除能力。

2.5.3對O2-的清除以綠茶多酚作為陽性對照，按照1.3.7.3測定試樣A和試樣B對O2-的清除能力。

3結論

以HPMCP為壁材、金花茶多酚原液為芯材制備金花茶多酚微膠囊，并通過正交試驗對工藝進行優化，得到噴霧干燥法制備金花茶多酚微膠囊的最佳工藝條件為：進風溫度100℃，進料速度6.4mL/min，芯壁材質量比2∶1，總固形物含量2%。在此條件下包埋率可達到80.35%。通過掃描電鏡觀察，發現金花茶多酚微膠囊分布均勻，顆粒圓整，分散性較好。通過模擬胃腸液環境可知，金花茶多酚微膠囊具有較好的緩釋效果，最大累積釋放度達到88.42%。以金花茶多酚原樣干粉為對照，放置一段時間后發現HPMCP微膠囊化對內部芯材的保護效果比較理想，所含茶多酚的保留率可達到81.23%。以綠茶多酚作為陽性對照，利用3種不同的體系探討金花茶多酚微膠囊的抗氧化活性，結果表明金花茶多酚微膠囊清除•OH、O2-、DPPH•的能力與綠茶多酚以及金花茶多酚原樣干粉相當，具有較強的抗氧化活性。

作者：寧恩創，居詩瑤，熊燕，黃金梅 單位：廣西大學輕工與食品工程學院