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【摘要】目的用HPLC測定鹿鞭補酒中淫羊藿苷的含量。方法色譜柱填料為十八烷基硅烷鍵合硅膠,流動相為乙腈-水。結果淫羊藿苷在0.1654~1.654μg之間呈良好的線性關系;淫羊藿苷的平均回收率為90.78%(n=5),RSD為2.20%(n=5)。結論該方法簡便、準確、分離效果好,無干擾,可用于鹿鞭補酒的質量評價。
【關鍵詞】鹿鞭補酒淫羊藿苷
【Abstract】ObjectiveToestablishthequantitativemethodofPiperineinpeniscervireinforceliquorbyHPLC.MethodsThecolumnwaspackedwith5μmDiamonsilC18stationaryphase.Themobilephaseconsistedofacetonitrile-water.ResultThelinearrangeswere0.1654~1.654μg;Theaveragerecoverieswere90.78%(n=5),rsdwere2.20%.ConclusionoughttoMethodconvenientaccurateseparationeffectfine;non-interference,toapproveuseforpeniscervireinforceliquorqualityevaluation.
【Keywords】peniscervireinforceliquor;icariin
鹿鞭補酒系鹿鞭、淫羊藿等18味藥材經生產工藝生產后制成。具有補腎壯陽,益氣補虛,填精益髓,健步輕身的功能。用于腎陽虛衰,腰膝冷痛,陽痿早泄,夢遺滑精,神疲氣怯,四肢無力。為有效控制鹿鞭補酒的質量,用高效液相色譜法對鹿鞭補酒中的淫羊藿苷進行了含量測定研究。
1儀器、試劑與對照品
儀器:日本島津高效液相色譜儀;檢測器:Agilent-1100紫外檢測器;乙腈:色譜純,迪馬公司生產;水:娃哈哈超純水;對照品:淫羊藿苷(批號110737-200312)為中國藥品生物制品檢定所提供。樣品:哈藥集團世一堂制藥廠、哈爾濱蒲公英藥業。
2方法與結果
2.1檢測波長的確定取淫羊藿苷對照品溶液和供試品溶液在200~400nm紫外波長掃描,結果在270nm處有最大吸收,故選擇270nm為檢測波長。
2.2色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;Z0RBAX-SB-C18(5μm,250mm×4.6mm)。流動相:乙腈-水(25:75)
2.3對照品溶液的制備精密稱取淫羊藿苷對照品適量,加甲醇制成每1ml含0.15mg的溶液,即得。
2.4供試品溶液的制備精密量取鹿鞭補酒20ml,蒸干,加水30ml使溶解,用乙酸乙酯振搖提取4次,每次15ml,合并乙酸乙酯液,蒸干,殘渣加甲醇使溶解,轉移至10ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,濾過,取續濾液,即得。分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀,色譜分離圖見圖1。
2.5空白試驗取廠家提供藥材,除去淫羊藿后,其他按處方量投料,并按生產工藝生產,按供試品溶液方法制備,結果證明空白試驗無干擾,此方法可行。
2.6精密度取淫羊藿苷對照品溶液,連續進樣5次,結果峰面積值的RSD=0.91%,說明本方法的精密度良好。
2.7線性精密量取淫羊藿苷對照品16.54mg,置100ml容量瓶中,加甲醇使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,備用。分別精密吸取上述溶液適量,加甲醇分別配成濃度依次為0.1654、0.3308、0.827、1.3232、1.654mg/10ml的溶液。取上述對照品溶液各10μl,注入液相色譜儀中,以進樣量(μg)為橫坐標,峰面積積分值為縱坐標,繪制標準曲線,得回歸方程Y=2208.4X+21.367,r=0.99995,證明淫羊藿苷在0.1654~1.654μg濃度范圍內呈良好的線性關系。
2.8穩定性試驗取上述供試品溶液,室溫放置,分別在0、2.5、5、18、21、24、27h進樣測定,峰面積積分值的RSD為0.71%,結果表明樣品溶液中的淫羊藿苷在27h內基本穩定。
2.9重復性試驗取批號20052251鹿鞭補酒6份各20.00ml,按供試品溶液制備項下的方法制備,按正文方法進行測定,計算含量,結果含量平均值的RSD=1.61%(n=6)。
2.10回收率試驗取批號20052251鹿鞭補酒5份,每份10.00ml,精密稱定,分別精密加入一定量的淫羊藿苷對照品,按供試品溶液的制備進行測定,結果見表1。平均回收率為90.78%(n=5),RSD為2.20%(n=5),表明回收率良好。
2.11樣品測定結果取七批樣品,按含量測定方法進行試驗,結果見表2。表2樣品測定結果注:以上樣品(4、5、6、7)來源于哈藥集團世一堂制藥廠,(1、2、3)來源于哈爾濱蒲公英藥業。
3討論
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p;由于鹿鞭補酒的質量標準無相應含量測定,而其中淫羊藿苷為成方中的主藥。因此,選擇淫羊藿苷為指標成分。《中國藥典》2005年版一部淫羊藿[1]品種項下采用外標法控制了淫羊藿苷的含量,故本次研究將淫羊藿苷的含量測定方法確定為外標法。
【參考文獻】
1國家藥典委員會.中國藥典(一部),2005年版.北京:化學工業出版社,2005,168.新晨