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【摘要】目的應用hplc法對感冒清熱顆粒中葛根素進行含量測定。方法選用HypersilC18色譜柱（5μm，100mm×4.6mm），甲醇-水（22：78）為流動相，檢測波長為250nm，流速為1.0ml/min。結果線性范圍為0.1384～1.384μg（r=0.9997），平均回收率為99.84%，RSD=1.65%。結論本法簡便、靈敏、準確。
【關鍵詞】HPLC感冒清熱顆粒葛根素
【Abstract】ObjectiveTodeterminecontentofpuerarininGanmaoqingregranulebyHPLC.MethodsHypersilC18（5μm,100×4.6mm）wasused,andtheMeoh-eater（22:78）wasservedasmobilephase,andit′sflowratewas1.0ml/min,wavelengthofdeterminingwas250nm.ResultsThelinearityrangewaswithin0.1384～1.384μg（r=0.9997）.Theaveragerecoverywas99.84%,RSD=1.65%.ConclusionThismethodissimple,sensitive,andaccurative.
【Keywords】HPLC;GanmaoqingreGranule;Puerarin
感冒清熱顆粒由荊芥穗、苦地丁、葛根等11味中藥制成，具有疏風散寒、解表清熱的功效，用于風寒感冒，頭痛發熱，惡寒身痛，鼻流清涕，咳嗽咽干。為更好地控制產品質量，本試驗選用HPLC法對其臣藥葛根的有效成分葛根素進行含量測定，結果滿意。
1儀器與試藥
Agilent1100高效液相色譜儀：四元梯度泵，二極管陣列檢測器，Agilent1100工作站；TP-150型超聲波清洗器，AG135電子分析天平；葛根素對照品（110752-200108，供含測用）由中國藥品生物制品檢定所提供；感冒清熱顆粒由湘中制藥有限公司提供；甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。
2實驗方法與結果
2.1色譜條件HypersilC18色譜柱（5μm，100mm×4.6mm）；流動相：甲醇-水（22：78）；檢測波長：250nm；柱溫：30℃；流速：1.0ml/min。
2.2溶液的配制精密稱取在五氧化二磷中干燥18h的葛根素對照品0.0692g，置50ml量瓶中，加30%乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液（0.1384mg/ml）。
取本品適量研細，取約1.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加30%乙醇20ml,稱定重量，超聲處理30min，取出，放冷，再稱定重量，用30%乙醇補足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，取濾液作為供試品溶液。
按處方比例及生產制備方法，制備不含葛根素的陰性樣品，照上述供試品溶液的制備方法制備陰性對照溶液。
2.3選擇性試驗按上述色譜條件，分別精密吸取供試品溶液、對照品溶液、陰性對照溶液各5μl，注入色譜儀，結果見圖1。樣品中葛根素峰與雜質峰完全分離，陰性對照無干擾。
2.4線性關系的考察精密吸取對照品溶液（0.1384mg/ml）1、2、4、6、8、10μl進樣測定，以葛根素的進樣量（μg）為橫坐標，峰面積積分值為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程為A=3876.9859C-53.9350,r=0.9997。說明葛根素在0.1384～1.384μg。
2.5精密度試驗精密吸取同一對照品溶液5μl，重復進樣5次，測定其峰面積積分值，結果得RSD=0.78%。
2.6穩定性試驗分別精密吸取同一供試品溶液10μl，于0、1、2、4、8、24h進樣，測定其葛根素峰面積積分值。結果表明，供試品溶液在24h內峰面積積分值基本穩定，RSD=2.12%。
2.7重復性試驗取同一批號樣品5份，分別按上述條件，測定其葛根素含量。結果平均含量為1.346mg/g,RSD=0.83%。
2.8加樣回收率試驗精密稱取已知含量的樣品（1.346mg/g）約0.5g，共6份，分別精密加入葛根素對照品溶液（0.712mg/ml）0.8、0.8、1.0、1.0、1.2、1.2ml，然后按上述方法制備供試品溶液，并測定其含量，結果平均回收率為99.84%，RSD=1.65%，見表1。表1回收率試驗結果
2.9樣品測定結果取不同批號的樣品1.0g，按2.2項下方法制得供試品溶液，以上述色譜條件測定，以外標法計算樣品中葛根素的含量，結果見表2。表2樣品中葛根素含量測定結果
3討論
曾試驗考察分別用30%乙醇、乙醇和甲醇提取對葛根素含量的影響，結果以30%乙醇為提取溶劑效果最好，其葛根素含量最高。
曾試驗考察超聲提取時間（10、30、60min）對葛根素含量的影響，結果分別為：1.21、1.28、1.28mg/g。表明樣品在超聲提取30min后葛根素含量已基本提取完全。
文中葛根素的含量測定，樣品處理簡單，色譜分離效果良好，精密度高，準確可靠，可用于該制劑的質量控制。
【參考文獻】
1國家藥典編委會.中國藥典，2005年版，北京：化學工業出版社，2005，一部.
2梁軍，郭衛東，高睿.冠脈寧軟膠囊中葛根素含量測定.遼寧中醫雜志，2006，（12）：1619-1620.新晨