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1實驗材料

1.1藥物與試劑

奇丹顆粒，規(guī)格：10g生藥/g，上海醫(yī)藥工業(yè)研究院提供，批號:20070510；己烯雌酚（1mg/mL）：廣州白云山明興制藥有限公司，批號：061101；羅通定片：30mg/片，廣州康和藥業(yè)有限公司，批號：041001；吲哚美辛：25mg/片，廣州華南藥業(yè)有限公司，批號：060301；縮宮素注射液：規(guī)格：10U/mL,批號：061201，廣州白云山明星制藥有限公司；乙酸潑尼松片：5mg/片，天津太平洋制藥有限公司，批號：070406；角叉菜膠：為Sigma公司產(chǎn)品，批號：127H1227。

1.2儀器

智能熱板儀，型號：YLS??6A，山東省醫(yī)學科學院設(shè)備站；PV??200型足腫容積測量儀，成都泰盟科技有限公司生產(chǎn)。

1.3動物

SD大鼠（合格證：2007A003）；NIH小鼠（合格證號2007A004）；廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供，符合SPF級標準。

1.4統(tǒng)計學處理

數(shù)據(jù)以(±s）表示，采用SPSS12.0軟件進行單因素方差分析，以P<0.05為差異有顯著性。

2方法與結(jié)果

2.1鎮(zhèn)痛試驗［2］

2.1.1奇丹顆粒對熱刺激引起的小鼠疼痛反應的影響取雌性NIH小鼠，體質(zhì)量18～22g，將小鼠置于（55±0.5）℃熱板上測小鼠基礎(chǔ)痛閾值，選取基礎(chǔ)痛閾在5～30s的小鼠75只，隨機分成5組，即生理鹽水組、羅通定片陽性藥物組、奇丹顆粒高、中、低劑量組。各組每天灌胃給藥1次，連續(xù)5d，末次給藥后1h、2h測各小鼠痛閾值。計算痛閾提高百分率，比較各組間差異。結(jié)果見表1。

表1奇丹顆粒對小鼠熱板致痛反應的影響（略）

br1TheeffectsofQidanGranulesonpainexperimentsinducedbyhotplateinmice

與生理鹽水組比較:*P<0.05，**P<0.01

表1結(jié)果表明：奇丹顆粒中、高劑量可非常顯著提高藥后1～2h小鼠痛閾提高百分率（P<0.05或P<0.01），提示奇丹顆粒具有鎮(zhèn)痛作用。

2.1.2奇丹顆粒對乙酸引起的小鼠扭體反應的影響取NIH小鼠75只，體質(zhì)量18～22g，雌雄各半，隨機分為5組，即生理鹽水對照組、吲哚美辛陽性藥物組、奇丹顆粒高、中、低劑量組。各組每天灌胃給藥1次，連續(xù)5d，末次給藥后1h各鼠腹腔注射0.6％乙酸生理鹽水溶液（0.2mL/只），觀察15min內(nèi)出現(xiàn)扭體反應的次數(shù)，比較各組差異，結(jié)果見表2。

表2結(jié)果表明，與生理鹽水組比較，吲哚美辛、奇丹顆粒高、中、低劑量組能顯著減少由乙酸引起的小鼠扭體次數(shù)(P<0.05～0.01)，提示奇丹顆粒具有鎮(zhèn)痛作用。

表2奇丹顆粒對乙酸引起的小鼠扭體反應的影響（略）

br2TheeffectsofQidanGranulesonaceticacid??inducedwrithingreactioninmice

與生理鹽水組比較：*P<0.05，**P<0.01

2.1.3奇丹顆粒對縮宮素所致小鼠痛經(jīng)模型的影響［2］

取雌性NIH小鼠90只，體質(zhì)量18～22g，隨機分為6組，即正常對照組、模型組、吲哚美辛陽性藥物組、奇丹顆粒高、中、低劑量組，除正常對照組外，其余各組每只小鼠皮下注射己烯雌酚注射液0.2mg，以后每天注射0.1mg，共注射10d。于試驗開始第6天，各組每天灌胃給藥1次，連續(xù)5d，末次給藥后1h各鼠腹腔注射縮宮素0.05mL/只,記錄扭體次數(shù)。結(jié)果見表3。

表3奇丹顆粒對縮宮素所致小鼠痛經(jīng)模型的影響（略）

br3EffectsofQidanGranulesonoxytocin??induceddysmenorrheainmice

與正常對照組比較:##P<0.01;與模型組比較：*P<0.05，**P<0.01

表3結(jié)果表明:與正常對照組比較,模型組小鼠有明顯扭體反應(P<0.01)，說明小鼠痛經(jīng)造模成功;吲哚美辛,奇丹顆粒高、中、低劑量組與模型組比較,可以顯著減少小鼠扭體次數(shù)(P<0.05～0.01)，提示奇丹顆粒對實驗性痛經(jīng)小鼠具有良好的鎮(zhèn)痛作用,可抑制小鼠痛經(jīng)的發(fā)生。

2.2抗炎實驗［3］

2.2.1奇丹顆粒對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響取NIH小鼠75只，雄性，體質(zhì)量18～22g，分組及給藥同2.1.2項。末次給藥后1h，于小鼠右耳兩面涂二甲苯50μL，左耳不涂為正常耳對照，致炎30min后，脫頸椎處死，用直徑9mm的打孔器分別在左、右耳同一部位打下圓耳片，電子天平稱重，求左、右耳片重量差值為腫脹度，比較組間差異，并計算抑制率。結(jié)果見表4。

結(jié)果表明：奇丹顆粒中、高劑量能顯著減輕二甲苯致炎小鼠的耳廓腫脹度（P<0.05～0.01），提示奇丹顆粒具有抗炎消腫作用。

2.2.2奇丹顆粒對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響取NIH小鼠75只，雌雄各半，體質(zhì)量18～22g，分組及給藥同2.1.2項。末次給藥后1h，于各小鼠尾靜脈注射0.5%伊文思藍生理鹽水溶液0.1mL/10g體質(zhì)量，立即腹腔注射0.6%乙酸0.2mL/只，20min后脫頸椎處死小鼠，剖開腹腔，用5mL生理鹽水沖洗數(shù)次，收集洗液定容為10mL，離心1000r/min×5min，取上清液在分光光度計590nm處測吸收（A）值，比較各組間差異。

抑制率（%)=空白組耳腫脹度-給藥組耳腫脹度空白組耳腫脹度×100%

表4奇丹顆粒對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響（略）

br4EffectsofQidanGranulesondimethylbenzene??inducedacuteearswellinginmice

與生理鹽水組比較：*P<0.05,**P<0.01

表5奇丹顆粒對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響（略）

br5EffectsofQidanGranulesonabdominalcapillarypermeabilityinmice

與生理鹽水組比較：*P<0.05,**P<0.01

表5結(jié)果表明：奇丹顆粒高、中劑量能顯著抑制乙酸所致小鼠毛細血管通透性增高，提示奇丹顆粒有抑制炎癥滲出作用。

2.2.3奇丹顆粒對角叉菜膠致大鼠足腫脹的影響取SD大鼠50只，體質(zhì)量180～220g，雄性，隨機分為5組，即生理鹽水組、吲哚美辛陽性對照組、奇丹顆粒低、中、高劑量組。各組每天灌胃給藥1次，連續(xù)5d，末次給藥1h后，先用足跖容積測量儀測定大鼠右足跖容積，然后在大鼠右后跖部皮下注射1％角叉菜膠0.1mL／只致炎，分別于致炎后1h、2h、3h、4h、5h測量足跖容積，計算足腫脹度，比較各組的差異。結(jié)果見表6。

足腫脹度（mL）＝腫脹后各時間點足容積（mL）－腫脹前足容積（mL）

表6奇丹顆粒對角叉菜膠致大鼠足腫脹的影響（略）

br6EffectsofQidanGranulesoncarrageen??inducedtoeswellinginrats

與生理鹽水組比較:*P<0.05,**P<0.01

表6結(jié)果表明:奇丹顆粒高劑量組在第1～5h對大鼠足腫脹有非常顯著的抑制作用（P<0.05～0.01）；中劑量組可明顯抑制2～5h大鼠足腫脹（P<0.05）。提示奇丹顆粒具有抗炎消腫作用。

2.2.4奇丹顆粒對大鼠棉球肉芽腫的影響取雄性SD大鼠50只，體質(zhì)量160～180g，0.4%戊巴比妥鈉，10mL/kg腹腔注射麻醉，于每只大鼠兩腋下各置1個50mg的滅菌棉球后縫合。隨機分為5組，即生理鹽水組、乙酸潑尼松陽性藥物對照組、奇丹顆粒低、中、高劑量組。手術(shù)當天開始灌胃給藥,1次／d，連續(xù)給藥7d，第8天脫頸椎處死大鼠，剝離棉球肉芽組織，置60℃烘箱中烘6h，稱重，計算肉芽腫重量（按mg/100g體質(zhì)量），結(jié)果見表7。

表7奇丹顆粒對大鼠棉球肉芽腫的影響（略）

br7EffectsofQidanGranulesoncottonpellet-inducedgranulomaformationinrats

與生理鹽水組比較：*P<0.05,**P<0.01

表7結(jié)果表明:與生理鹽水組比較，奇丹顆粒低、中、高劑量對大鼠肉芽腫增生有顯著的抑制作用（P<0.05～0.01）。提示奇丹顆粒可抑制慢性組織炎癥反應。

3討論

子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis，EMs)是育齡婦女的常見疾病,它是一種良性的婦科疾病，但有類似于惡性腫瘤的遠處轉(zhuǎn)移和種植生長的能力，其病灶部位常伴有炎癥的發(fā)生，出現(xiàn)反復出血，形成大小不等的囊腫并使局部粘連與疤痕，臨床主要表現(xiàn)有痛經(jīng)、盆腔包塊或觸痛的結(jié)節(jié)、不孕、月經(jīng)不調(diào)等。文獻報道［4］：子宮內(nèi)膜異位癥患者體內(nèi)異位的內(nèi)膜細胞及腹腔液中較多的巨噬細胞可使腹腔液中前列腺素水平增高，一方面引起強烈的子宮平滑肌收縮;另一方面使局部產(chǎn)生炎性反應而激活緩激肽，導致機體痛覺敏感，這二者是引起疼痛出現(xiàn)的重要原因。本實驗結(jié)果表明：奇丹顆粒對冰乙酸、熱刺激以及縮宮素所致的疼痛反應具有抑制作用，可明顯抑制二甲苯致小鼠耳腫脹、角叉菜膠致大鼠足腫脹及乙酸致小鼠腹腔毛細血管通透性的增高，對大鼠棉球肉芽腫形成有明顯的抑制作用，可對抗子宮內(nèi)膜異位癥的炎癥和疼痛反應，這些作用為其臨床治療子宮內(nèi)膜異位癥提供了實驗依據(jù)。新晨

【參考文獻】

［1］徐叔云，卞如濂，陳修．藥理實驗方法學［M］．3版．北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：882-885.

［2］李晨,方坤泉,陳水英，等．抗痛經(jīng)沖劑藥效學實驗研究［J］．西北藥學雜志，2002，17(1)；17-19．

［3］陳奇.中藥藥理研究方法學［M］．2版．北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：346-347.

［4］牛建昭.現(xiàn)代中西醫(yī)婦科學.中國科學技術(shù)出版社［M］.1996:173.