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1質譜法(MS)

1.1液相色譜－質譜法(LC－MS)液相色譜－質譜聯用儀是聯合了液相色譜與質譜的儀器，它以色譜為分離系統，質譜為檢測系統。樣品經分離后離子化，離子碎片通過質量分析器按質荷比分開得到質譜圖。液質聯用結合了色譜和質譜優勢，色譜分離能力強，質譜選擇性高、靈敏度高并且能夠提供樣品分子量與結構信息，二者結合起來，在藥物殘留等分析領域有廣泛的應用。曲斌等利用高氯酸酸化尿液，過固相萃取柱凈化的方法，經LC－MS測定豬尿中的苯乙醇胺A，定量限達到了0.2μg/L。盧艷芬采取LC－MS法測定豬肉中殘留的苯乙醇胺A，在前處理過程中經酶解、酸化和調節樣品溶液pH以提高萃取效率。試驗發現，在52℃水浴酶解2h，酶解濃度達到峰值，檢測限和定量限分別為0.2μg/kg和0.5μg/kg，回收率大于79.0%。目前，因分析時間短、檢測限低以及定性分析結果可靠等優點，LC－MS法已經作為檢測苯乙醇胺A殘留的確證方法。其缺點是儀器價格昂貴、檢測成本高、檢測技術難以掌握、應用還不夠普遍。

1.2氣相色譜－質譜法(GC－MS)GC－MS與LC－MS主要的區別在于色譜，LC－MS的流動相為液體，而GC－MS的流動相是惰性氣體，另外在前處理方面1個主要的區別是GC－MS需要對樣品中目標化合物分子的氨基、羥基等極性基團衍生化，相比LC－MS前處理過程更加繁瑣。所以目前國內關于GC－MS檢測苯乙醇胺A的報道很少。楊正彗以pH值3.6的乙酸鈉緩沖液為提取液，通過MCX小柱凈化，運用GC－MS法檢測飼料樣品中的苯乙醇胺A。試驗發現，樣品加入80μL衍生化試劑在60℃下反應，運用SIM采集模式，檢測結果有較好的靈敏度和重現性，檢出限達到了3.8μg/L。

2酶聯免疫吸附法(ELISA)

酶聯免疫吸附法是通過抗原與抗體的特異性反應，將酶與待測物連接，而后酶與底物產生顏色反應，多用于篩選和定量。酶聯免疫吸附法包括雙抗體夾心法、雙位點一步法、檢測法測抗體、競爭法、捕獲法測IgM抗體、應用親和素和生物素的ELISA法。目前，ELISA法在實驗室有著廣泛的應用，操作簡單、快速是其主要特點，適合于大量樣品的快速篩選檢測，尤其是基層獸藥殘留監管部門普遍采用的方法。曹碧云建立了檢測飼料和動物組織中苯乙醇胺A間接競爭的ELISA法，該方法靈敏度高，特異性高，回收率為92.2%～113.7%，檢出限達到了0.003μg/L[9]。但ELISA法也有著致命的缺點，那就是假陽性率還比較高，對于篩選出來的陽性樣品還需要通過液相色譜－質譜聯用方法確證。

3電化學發光免疫分析法

電化學發光是1種集合了電化學與發光分析的痕量分析技術，具有高靈敏度和可控性好的優點。免疫傳感器是把特異性的免疫反應與高靈敏度的傳感技術結合，用來監測抗原－抗體反應的一種生物傳感器。將電化學發光與免疫傳感技術相結合，則在新型瘦肉精檢測領域有著廣泛的應用前景。湯慶會等建立的基于量子點和酶放大電化學發光免疫法檢測苯乙醇胺A過程中，與電化學發光強度成線性關系的苯乙醇胺A濃度被拓寬到0.05～1000μg/L，檢出限達到了0.015μg/L[8]。閆盼盼分別以巰基乙酸和檸檬酸三鈉作為穩定劑和還原劑，利用合成的CdSe量子點和膠體金組建成了一種電化學發光免疫傳感器，并實際用于豬肝、豬肉和尿液樣品中苯乙醇胺A的檢測，回收率為82%～124%，重現性、穩定性和選擇性良好[13]。

4小結

綜上所述，在現有的苯乙醇胺A殘留檢測方法中，高效液相色譜法、氣相色譜－質譜法、液相色譜－質譜法具有較高的靈敏度，其中液相色譜－質譜法被農業部1486號公告用作飼料中苯乙醇胺A的確證方法，但對儀器設備和人員素質要求比較高；酶聯免疫檢測法快速、簡單，主要用于篩選檢測，電化學發光免疫傳感技術靈敏、快速，能夠對苯乙醇胺A進行現場監測，是今后新型瘦肉精殘留檢測的重要研究方向。只有不斷完善新型瘦肉精的監測手段，提高檢測水平，才能夠保證動物性食品的質量安全。

作者：朱英才 彭強 單位：重慶市獸藥飼料檢測所