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《包裝與食品機械雜志》2015年第一期

1試驗材料與方法

1．1材料與儀器

1．1．1試驗材料與試劑無花果葉采自青島農(nóng)業(yè)大學(xué)翰林苑，經(jīng)40℃干燥后粉碎過80目篩備用;平菇購自城陽春陽店大潤發(fā)，挑選八九成熟的，正常色澤的，菇體完整的，沒有機械損傷，朵型一致的，沒有蟲害的新鮮菇體;低密度聚乙烯(LDPE)保鮮袋市售;無水乙醇(分析純)(青島化學(xué)試劑廠);補骨脂素標(biāo)準(zhǔn)品(上海一基生物科技有限公司)，純度＞98%。

1．1．2試驗儀器恒溫電熱干燥鼓風(fēng)箱(上海精宏試驗設(shè)備有限公司);電子分析天平(賽多利斯儀器系統(tǒng)北京有限公司);萬能高速粉碎機(天津泰斯特儀器有限公司);超聲清洗器(功率:500W，昆山市超聲儀器有限公司);尤尼柯UV－2000型紫外分光光度計(上海尤尼柯儀器有限公司);DDS－11C型電導(dǎo)率儀(上海精密儀表有限公司);DR－A1型阿貝折光儀(上海恒奇儀器儀表有限公司)。

1．2試驗方法

1．2．1無花果葉提取液制備準(zhǔn)確稱取2．0g無花果葉粉，以20∶1的液料比加入到25%乙醇溶液中浸泡，500W40℃超聲處理20min，抽濾，收集濾液得到無花果葉提取液，取1mL稀釋100倍后，于245nm處測吸光度值，并計算無花果葉補骨脂素的含量。

1．2．2補骨脂素含量計算精密配制濃度為10μg/mL的補骨脂素標(biāo)準(zhǔn)品溶液，分別取上述溶液0、1、2、3、4、5mL放置于10mL容量瓶中，靜置5min，于245nm紫外光分光光度計測吸光度［14］。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖1，建立回歸方程為。

1．2．3影響無花果葉補骨脂素提取的因素(1)單因素試驗設(shè)計。通過改變乙醇濃度(15%、25%、35%、45%、55%)、液料比(10∶1、15∶1、20∶1、25∶1、30∶1)、超聲時間(10min、20min、30min、40min、50min)、超聲溫度(20℃、30℃、40℃、50℃、60℃)，確定無花果葉補骨脂素提取工藝參數(shù)。(2)正交優(yōu)化試驗設(shè)計。對影響提取效果的主要因素:料液比、超聲時間、超聲溫度、乙醇濃度進行L9(34)正交試驗，以補骨脂素提取率為指標(biāo)表示，正交試驗表如表1。

1．2．4平菇保鮮試驗設(shè)計將優(yōu)化得到的提取工藝參數(shù)對無花果葉進行提取，得到無花果葉提取液。選取無病蟲，大小均勻、無開傘、無機械傷的平菇，將平菇放入提取液中浸泡3min，以25%乙醇做空白對照，晾干，分別將平菇裝入保鮮袋置于常溫下(20±2℃)，每天隨機取樣測定保鮮指標(biāo)，其中呼吸強度及質(zhì)量損失率每次測定均用各處理的全部樣品，其余指標(biāo)則是從每個處理中隨機取100g樣品進行測定。

1．2．5平菇生理指標(biāo)呼吸強度:在室溫下采用靜置法測定，參考曹健康等的方法［15］;(3)可溶性固形物含量:采用阿貝折光儀測定;(4)可溶性蛋白質(zhì)含量:采用考馬斯亮藍(lán)法;(5)細(xì)胞膜滲透率:本試驗根據(jù)電導(dǎo)率法進行測定，參照肖功年等的方法［16］，并稍做修改，將平菇的菇柄中心部位切成4mm×4mm×4mm方塊，稱取2g，用20mL去離子水浸泡、然后震蕩10min，用濾紙吸干后，然后再加20mL去離子水，在室溫下震蕩一小時，測定其電導(dǎo)率。最后沸水浴煮沸騰15min，待冷卻后測定電導(dǎo)率，細(xì)胞膜滲透率用相對電導(dǎo)率表示。相對電導(dǎo)率為平菇浸提液煮沸前和煮沸后電導(dǎo)率的比值;(6)丙二醛含量:采用硫代巴比妥氨比色法進行測定。

1．2．6數(shù)據(jù)分析采用SPSS17．0進行數(shù)據(jù)顯著性分析。

2試驗結(jié)果與分析

2．1單因素結(jié)果與分析

2．1．1不同濃度乙醇對無花果葉補骨脂素提取效果的影響由圖2可以看出，隨著乙醇濃度的增大，補骨脂素提取率先增大后減小。當(dāng)乙醇的濃度小于25%，補骨脂素的含量隨乙醇濃度的升高而逐漸升高;當(dāng)乙醇濃度大于25%，補骨脂素含量隨乙醇濃度的升高而降低。這可能是因為當(dāng)乙醇濃度增大，無花果葉中的其他有機物質(zhì)溶出增多，檢測吸光度時干擾物質(zhì)較多。因此，選取最佳提取濃度為25%。

2．1．2不同液料比對無花果葉補骨脂素提取效果的影響由圖3可以看出，隨著液料比的增大，補骨脂素提取率先增大后減小。當(dāng)液料比小于20∶1，補骨脂素的含量隨液料比的變大而升高;當(dāng)液料比大于20∶1時，補骨脂素含量隨液料比的變大而減小。這是由于液料比為20∶1時，無花果葉中補骨脂素與溶液之間傳質(zhì)過程趨于平衡，繼續(xù)增加液料比則會出現(xiàn)稀釋效應(yīng)，測得吸光度值較小，所以計算得到的提取率較小。實際上補骨脂素已經(jīng)提取完全。因此，液料比20∶1最為合適。

2．1．3不同超聲處理時間對無花果葉中補骨脂素提取效果的影響由圖4可以看出，隨著超聲處理時間的增加，補骨脂素提取率呈先增加后減小的趨勢，當(dāng)超聲處理時間為20min時，補骨脂素提取率最大值;當(dāng)提取時間大于20min時，提取液中補骨脂素含量逐漸下降，這可能是因為提取液中的補骨脂素超聲處理時間過長而變性，導(dǎo)致含量下降。因此，選取最佳提取時間為20min。

2．1．4不同超聲處理溫度對無花果葉中補骨脂素提取效果的影響由圖5可以看出，隨著超聲處理溫度的增加，補骨脂素提取率呈先增加后減小的趨勢，當(dāng)提取溫度達(dá)到50℃時，補骨脂素提取率達(dá)到最大值;當(dāng)處理溫度超過50℃后，提取液中補骨脂素含量下降，這可能是補骨脂素化合物因為處理溫度過高而變性，導(dǎo)致含量下降。因此，選擇最佳提取溫度為50℃。

2．2正交試驗結(jié)果與分析由表2中極差結(jié)果分析可知:影響超聲波輔助提取無花果葉補骨脂素的提取率因素的的順序為乙醇濃度A＞提取時間C＞提取溫度D＞液料比B，超聲波輔助提取無花果葉補骨脂素最佳組合為A2B2C3D1，即乙醇濃度25%、液料比20∶1、提取時間30min、提取溫度40℃。

2．3無花果葉提取物對平菇保鮮的影響

2．3．1平菇失重率的變化由圖6可以看出，隨著貯藏時間的延長，平菇的失重率逐漸呈上升趨勢，開始階段失重率變化較大，而后變化逐漸緩慢。在整個貯藏期內(nèi)，對照組總是高于試驗組，且有顯著差異(P＜0．05)。貯藏第3天，對照組平菇肉質(zhì)變得疏松，氣生菌絲都出現(xiàn)于菇柄和菇蓋，基本失去商品價值;而試驗組第4天才失去商品價值。貯藏第四天時，試驗組和對照組平菇失重率分別為3．11%和3．32%。

2．3．2平菇細(xì)胞呼吸強度的變化衡量平菇采后自身新陳代謝的重要指標(biāo)是呼吸強度。由圖7可以看出，隨著貯藏時間的延長，平菇的呼吸強度都是呈現(xiàn)上升而后下降的趨勢。試驗組與對照組在第一天均出現(xiàn)呼吸高峰，但試驗組呼吸強度顯著低于對照組(P＜0．05)，分別為21．21mg/kg•h和25．47mg/kg•h。之后試驗組與對照組差距逐漸縮小，至第4天時兩組均已失去商品價值，但無花果葉提取液能降低平菇的呼吸強度。

2．3．3平菇可溶性蛋白質(zhì)量的變化可溶性蛋白質(zhì)含量是構(gòu)成平菇內(nèi)酶的重要組成部分，參與許多生理生化代謝過程的調(diào)控，是評價平菇采后代謝水平和貯藏品質(zhì)的指標(biāo)之一。由圖8可以看出隨著貯藏時間的延長，平菇可溶性蛋白質(zhì)的含量呈下降的趨勢，即表明隨著平菇采后機體的衰老和代謝強度的降低，可溶性蛋白也隨之降解。但是在貯藏過程中，試驗組的可溶性固形物的含量顯著高于對照組(P＜0．05)，即無花果葉提取液能延緩可溶性蛋白的降解。

2．3．4平菇可溶性固形物的變化可溶性固形物是平菇貯藏品質(zhì)的另一個重要指標(biāo)，可溶性固形物與平菇的呼吸作用有緊密的關(guān)系［17］。由圖9可以看出隨著貯藏時間的延長，試驗組和對照組平菇的可溶性固形物的含量均先升高后下降的趨勢，這和呼吸強度的變化趨勢是相同的。這是由于在平菇的呼吸作用過程中，平菇所含的碳水化合物是主要底物［18］。在貯藏第1天時呼吸強度最大，大量的大分子碳水化合物被水解成小分子的可溶性糖，因此可溶性固形物會在第1天出現(xiàn)升高的趨勢。在貯藏過程的前3天，試驗組的可溶性固形物的含量均顯著高于對照組(P＜0．05)，表明無花果葉提取液能抑制可溶性固形物含量的下降。

2．3．5平菇細(xì)胞膜滲透率的變化平菇采后的衰老過程中會發(fā)生細(xì)胞膜氧化降解，因此細(xì)胞膜透性會隨之增加，同時伴隨著膜內(nèi)外離子的泄漏［19］，細(xì)胞膜相對電導(dǎo)率就可以反映出膜透性的變化。由圖10可以看出，隨著貯藏天數(shù)的增加，平菇細(xì)胞膜的相對電導(dǎo)率均呈逐漸上升的變化趨勢。在貯藏過程中，貯藏前期上升速度較快，之后趨勢緩慢，試驗組的細(xì)胞膜相對電導(dǎo)率顯著高于對照組(P＜0．05)，表明無花果提取液能夠降低細(xì)胞膜相對電導(dǎo)率，延緩平菇細(xì)胞膜的降解。

2．3．6平菇丙二醛含量的變化細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化的重要產(chǎn)物之一是丙二醛［20］，脂質(zhì)過氧化通常以測定它的含量作為指標(biāo)的，以反映細(xì)胞膜脂過氧化的程度，其含量越高即標(biāo)志著膜系統(tǒng)受傷害程度越高。由圖11可以看出，平菇丙二醛含量均隨著貯藏天數(shù)的增加而增加。在整個貯藏過程中，試驗組平菇丙二醛含量始終低于對照組(P＜0．05)，表明無花果葉提取物能減少平菇內(nèi)丙二醛的積累。

3結(jié)論

在單因素試驗的基礎(chǔ)上，采用正交試驗優(yōu)化得到無花果葉補骨脂素的最佳提取工藝:乙醇濃度25%、液料比20∶1mL/g、提取時間為30min、提取溫度40℃;在無花果葉提取物對平菇的保鮮試驗中，生理指標(biāo)結(jié)果表明:在貯藏期間，試驗組的失重率、呼吸強度、細(xì)胞膜相對電導(dǎo)率、丙二醛含量均顯著低于對照組，可溶性固形物和可溶性蛋白均顯著高于對照組。綜合以上結(jié)果，無花果葉提取物能較好地保持平菇的營養(yǎng)價值，改善其貯藏品質(zhì)，因此無花果葉源食用菌保鮮劑具有一定的開發(fā)價值。

作者：樊銘聰張鑫李文香胡欣蕾孫亞男何如單位：青島農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院