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1中醫藥對體外受精及胚胎發育的影響

體外受精和胚胎培養的培養液對受精和胚胎發育具有重要作用。在培養液中加入有效的中藥成分，可對受精和胚胎發育產生正面影響。曾金雄等［8］將灌服中藥還精方(由黃芪、山茱萸、女貞子等組成)的大鼠血清加入培養液中培養人精子，發現含藥血清可顯著提高卵子受精率、受精指數(均P＜0.01)，表明補腎中藥具有提高人精子受精能力的作用。陳怡等［9］分別將灌服壽胎丸(由桑寄生、川斷、杜仲、菟絲子組成)及其4個單味藥的大鼠血清分別加入培養液中，發現在8細胞后的發育率壽胎丸復方血清組高于4個單味藥組，而4個單味藥組明顯高于空白血清組(P＜0.01，P＜0.05)，提示復方藥療效優于單味藥;各組在2細胞至4細胞的發育比較，差異無統計學意義。

2中醫藥對子宮內膜容受性的影響

胚泡著床障礙是以IVF-ET為代表的ART妊娠成功率不高的一個重要原因。因此，改善子宮內膜容受性、提高胚泡著床率，在治療中十分重要。張樹成等［10］對服用補腎生血方(由山茱萸、熟地黃、龜甲膠、阿膠、當歸等組成)、補腎調經方(由當歸、熟地黃、菟絲子、枸杞子、五靈脂等組成)及女貞孕育湯(由菟絲子、女貞子、枸杞子、當歸、丹參等組成)］3種補腎助孕方藥的臨床排卵障礙性不孕者，分別于用藥前后的排卵前2天及排卵后7、10天進行子宮內膜組織活檢取材，采用自身對照方法觀察內膜組織形態學表現，血管表皮生長因子轉化生長因子白血病抑制因子堿性成纖維細胞生長因子/成纖維細胞生長因子共4種血管生成因子，以及血管表皮生長因子受體、表皮生長因子受體、轉化生長因子受體(TGFR)、內皮糖蛋白CD105、血小板源性生長因子受體α共5種血管生成因子受體的變化。結果表明，補腎助孕中藥對人子宮內膜組織的血管生成活性和作用均具有強烈的正向促進作用，組織中具有旺盛的血管生成表現;除TGF和TGFR外，其他7種因子的表達強度均明顯增強。提示補腎助孕中藥具有明確的促血管生成作用，從而可以改善子宮內膜容受性，提高胚泡著床率。黃冬梅等［11］通過掃描電鏡觀察發現，補腎益氣和血方(由桑寄生、丹參、黃芪、當歸、川芎等組成)可以促進米非司酮所致胚泡著床障礙小鼠子宮內膜表面胞飲突的表達，顯著提高妊娠率(55%vs25%，P＜0.05)及平均著床胚泡數(12.3vs7.7，P＜0.01)。表明補腎益氣和血方促進子宮內膜容受性和改善胚泡著床，可能與促進子宮內膜表面胞飲突的表達有關。吳云霞等［12－14］通過實驗研究發現，補腎益氣活血湯(由桑寄生、黃芪、當歸、丹參等組成)能明顯提高吲哚美辛致著床障礙小鼠的著床率(50%vs20%)，增加子宮重量(均P＜0.05);改善子宮內膜組織形態學，使內膜成熟蛻膜化細胞和血管數量增多，炎性細胞減少;輕度促進雌激素受體α(estrogenreceptorα，Erα)的表達。提示補腎益氣活血方可能是通過雌激素樣活性加強E2及其受體作用而有利于發動蛻膜化從而促進著床。王素霞等［15］實驗研究發現，安胎合劑(由菟絲子、苧麻根、續斷、黃芩等藥物組成)可以改善GnRHa長周期輔助超排卵小鼠子宮內膜組織形態，使子宮內膜間質疏松，血管豐富，腺體數目增多，腺腔增大，有利于胚泡種植;使子宮內膜胞飲突數量、發育同步性均優于模型組。張明敏等［16－21］實驗研究發現，補腎安胎方(由菟絲子、桑寄生、川續斷、黃芪、當歸、丹參等組成)可以顯著提高吲哚美辛所致胚泡著床障礙小鼠妊娠率和著床點數(分別為72.7%vs27.3%、10.7vs5.3，P＜0.05)，具有改善胚胎著床障礙的作用，其機制可能與該方能改善甾體激素水平，促進子宮內膜雌、孕激素受體和VEGF及其受體的表達，促進著床位點的類肝素結合樣表皮生長因子及其受體EGFR、前列環素I2(prostacyclinI2，PGI2)及其核受體過氧化物酶體增殖激活因子受體δ(PPARδ)的表達，調節著床位點的環氧化酶(cy-clooxygenase-2，COX-2)的表達，促進子宮LIF及其受體的同步表達有關。曹蕾等［22］實驗研究發現，補腎健脾中藥復方(由菟絲子、桑寄生、黨參、白術等組成)可以明顯提高羥基脲致腎虛模型大鼠動情期血清孕酮(progesterone，P)含量和內膜LIF表達(均P＜0.05)，改善腎虛模型大鼠子宮內膜腺上皮細胞功能，調節子宮內膜自然殺傷(NK)細胞亞群含量，從而改善其子宮內膜容受性。劉麗等［23］實驗研究發現，保胎液(由續斷、桑寄生、菟絲子、阿膠、杜仲、白芍組成)能顯著提高米非司酮致胚泡著床障礙模型小鼠血清雌孕激素水平(P＜0.05)，從而改善著床障礙小鼠子宮內膜容受性，促進胚泡著床。楊楨等［24］采用曲普瑞林注射制備小鼠模型，預防性給予當歸散(由當歸、芍藥、川芎、白術、黃芩組成)及其拆方，于排卵后24、48h測定子宮內膜中孕酮受體(proges-teronereceptor，PR)、整合素β3水平。實驗結果發現，48h時當歸散組和歸－芩組的PR表達明顯上調，達到正常組水平;當歸散組和當歸黃芩組整合素β3在2個時間點表達比較，差異無統計學意義，與正常組比較差異無統計學意義(P＞0.05)。說明當歸散和當歸－黃芩能抑制曲普瑞林引起的PR過早下調，抑制整合素β3的提前表達，從而改善子宮內膜容受性。

3針刺在ART中的實驗研究

電針可以影響中樞神經肽，特別是β－內啡肽(β-endorphin，β-EP)水平［25］，從而對下丘腦促性腺激素釋放激素的分泌產生調節作用，由此再對整個下丘腦－垂體－卵巢產生影響。電針可以影響病理狀態下卵巢神經生長因子(nervegrowthfactor，NGF)的表達［26］，以及卵巢、腎上腺受體α1、β2和神經營養因子p75受體的表達［27］，通過調節卵巢交感神經活動來調節其神經內分泌狀態，增加卵巢血流量［28］。劉新玉等［29］采用針刺療法，取穴足三里、三陰交及太沖，干預米非司酮致胚泡著床障礙大鼠。結果顯示，與模型組比較，針刺療法可顯著提高胚泡著床障礙大鼠妊娠率(75%vs45%，P＜0.05)，增加平均著床胚泡數(7.3vs3.5，P＜0.01)以及子宮、卵巢、單個胚泡重量(P＜0.01，P＜0.05)，改善子宮內膜狀況。

4評價與展望

目前在ART中與中醫藥聯系較緊密的環節主要是超促排卵和胚胎移植。中醫藥合理應用于ART，可以充分發揮整體協調機體生殖環境的作用，與西醫學ART微觀治療相輔相成。通過上述實驗研究結果推測，中醫藥應用于ART增加妊娠成功率，可能與促進卵泡發育及排卵、改善精子和卵細胞質量、促進受精和胚胎發育、改善子宮內膜的容受性等有關。

目前中醫藥在ART中的實驗研究仍然存在不足之處，如實驗對象較為局限，實驗研究設計欠規范，研究不夠深入，對作用的微觀機制研究甚少，主要從對卵細胞質量、體外受精、胚胎發育及子宮內膜容受性的影響著手，以動物實驗居多，間接探討中醫藥在體內對卵泡發育和卵子質量，以及胚胎發育與種植的作用機制。直接探討中醫藥在ART中作用機制的體外研究報道較少。今后應從深入實驗研究，規范實驗隨機對照設計，以及加強機理探討等方面著手，將中醫藥介入ART方面的研究深入到分子、基因水平，揭示其微觀機制，促進中醫藥在ART中的研究和應用。總之，中醫藥在ART中的實驗研究已經取得了一定的成績。盡管研究還很有限，只要在研究中找準切入點，將中醫學理論和現代科學技術有機結合起來，進行系統而深入的研究，有助于為臨床安全應用中醫藥介入ART提供依據，其前景值得期待。

作者：王春玲段恒單位：第三軍醫大學新橋醫院健康體檢中心重慶醫科大學中醫藥學院