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《畜牧獸醫科技信息雜志》2014年第六期

1診斷與檢測

目前國際尚尼帕病上主要檢測方法包括電鏡診斷、病毒分離、免疫組織化學法、血清學試驗和分子生物學技術。

1.1電鏡診斷用薄層電鏡觀察負染樣品，如發現胞質和正在出芽的已整合的病毒粒子中有絲狀的核衣殼，感染細胞有典型的鯡魚骨樣核衣殼，均為副粘病毒的特征，可據此對病毒作初步判定；另外尼帕病毒在適宜的細胞系中培養可以達到較高的濃度，用負反差電鏡對感染細胞培養液中的病毒行造影和用免疫電鏡檢測病毒抗體的相互作用能快速提供有關病毒結構、抗原反應能力等很有價值的信息，甚至能在病毒最初分離階段獲得。

1.2病毒分離尼帕病毒可以在Vero、BHK、PS等細胞系上生長良好，并且能觀察到明顯的細胞病變效應(CPE)，可以利用這一特性進行病毒分離。首先在喉、鼻腔、肺、脾、腦脊液等組織器官中提取病樣，在無菌條件下提取染病組織，在培養基中制備10%懸液，離心取上清液，然后接種細胞，觀察CPE反應。

1.3免疫組織化學法尼帕病毒傳染性強，對實驗室操作人員的健康具有很大威脅；實踐證明以福爾馬林溶液固定染病組織可以保證人員安全，并且在適宜條件下可長期保存。尼帕病感染組織范圍廣，取樣簡單，因此該法也是目前比較簡單易行的方法。

1.4血清學試驗血清學檢測是檢測尼帕病毒最主要的方法之一，主要有病毒中和試驗和ELISA兩種，該方法靈敏度較高，但由于鑒于其生物危害性，在操作前必須對樣品進行嚴格的安全化處理，并且其操作必須在生物安全防護最高級別的實驗室（P4）操作，我國目前尚不具備該條件。

1.5分子生物學技術分子生物學鑒定尼帕病有2種常規PCR方法：①澳大利亞AAHI的RT-PCR，采用巢引物擴增編碼病毒基質蛋白的M基因測固定組織、新鮮組織、腦脊液中的病毒序列。②美國CDC的PCR法，擴增的是編碼核蛋白的N基因，但首先要對基因進行PCR擴增和鑒定。目前國家外來動物疫病診斷中心(青島)已建立了檢測尼帕病毒的國際標準RT-PCR診斷技術，可檢測到最低170拷貝的RNA模版，陽性檢出率的重復性和穩定性均達100%。

2治療手段

目前為止，尚無有效的應對尼帕病毒的特效藥物、疫苗。國外的研究成果表明，利巴韋林（Ribavirin）可能具有一定的治療作用。另外利巴韋林的某些衍生物如6-氮尿苷在體外試驗中對尼帕病毒具有較強的抑制作用；干擾素誘生劑poly(I)-poly(C12U)在動物模型中具有抵抗尼帕病毒致死性攻擊的作用，而利巴韋林和6-氮尿苷都沒有這種作用。

3防控措施

2013年11月28日，國家質檢總局會同農業部根據《中華人民共和國進出境動植物檢疫法》相關規定，了《中華人民共和國進境動物檢疫疫病名錄》，其中的亮點之一就是將尼帕病列入了“一類傳染病”，這一舉措體現了國家動物檢疫部門對于尼帕病防治的高度重視。隨著我國對外貿易的蓬勃發展和人民生活水平的提高，進出國境的人流、物流量也迅猛增加，客觀上為尼帕病借機傳入我國創造了“便利條件”，這無疑是對現有動物疫情防控體系的巨大挑戰。因此，筆者經過搜集相關資料、深入思考，提出以下措施：

3.1加大實驗室建設力度盡快建立我國自有的P4實驗室，并培養一批具備相關從業資質和素養的實驗室技術人員，此舉措應當上升到國家戰略的層面加以重視；同時還應依托現有高校、科研院所的實驗室資源，加大力度建設一批具備OIE參考實驗室水平的區域性實驗室和檢測中心，在重點口岸建設一大批骨干實驗室，構建大范圍、全覆蓋的實驗室體系，這對于提高我國整體疫情防控和突發公共衛生事件處置具有重要意義。

3.2加大防治手段研發力度依托國內各大科研院所的技術力量，整合相關成果、資源，加大投入，通過國際合作等途徑，爭取克服缺乏相關生物材料和生物安全實驗室等因素的影響和制約，爭取在檢測技術、防治藥物、疫苗等方面取得突破，為防控尼帕病提供更可靠的技術支撐。

3.3加大疫情監測防控力度密切關注、及時跟蹤分析境外尼帕病疫情動態，并研判風險、積極應對；對境外發生疫情國家的相關人員、運輸工具、郵寄物，采取加強檢疫、從嚴監管、限制或禁止進口等防控措施，嚴密防范疫情傳入；建立和完善進境動物疫情監控制度，有針對性的調整和修訂疫情防控和應急處置預案；加大對口岸查驗場所、設施和人員檢測、檢疫處理和信息化手段等的投入力度。

3.4加大進境動物檢疫監管力度進出境檢驗檢疫部門做好認真做好進境動物及其產品檢疫審批、境外預檢工作，有必要的應與相關國家進行檢疫證書確認和議定書磋商；嚴格進境動物專門口岸、隔離檢疫場、動物產品加工存放場所指定工作；一旦發生或疑似發生尼帕病，應立即按照《進出境重大動物疫情處置預案》進行處置，防止疫情傳入國境。

3.5加大對尼帕病防控知識的宣傳力度采取靈活多樣的有效方式，充分利用廣播、電視、網絡媒體、微博、微信、手冊圖片和知識競賽等方式方法，大力宣傳、普及尼帕病防控知識，宣傳其主要流行病學和傳播特性，增強全民風險意識，培育檢疫意識，為全國尼帕病防控工作創造更加良好的社會及輿論環境。

3.6加大國際交流合作力度在疫情防控方面加強國際合作，與周邊國家以及尼帕病疫區國家建立疫情聯防聯控、資源共享、定期通報制度；積極主動參加國際尼帕病專項研究、學術交流、實地考察等活動，虛心向具備尼帕病診療、防治相關經驗的國家學習，逐步建立完善我國的尼帕病防控體系，保障國門安全，國民健康。

作者：柳之光范光輝李瑞法楚偉靳帥單位：河北出入境檢驗檢疫局京唐港辦事處