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《畜牧與獸醫雜志》2014年第九期
1原精液質量的控制
1.1提高原精液的品質原精液品質包括采精量、精子活力、精子密度、精子畸形率等。在生產過程中,應科學飼養認真選留優秀種公豬,并根據公豬精液檢驗結果,選留精液量大、精子密度高、精子活力強的公豬,及時淘汰30月齡以上各項生理機能開始退化,精液質量下降的公豬,可以有效提高原精液的質量。需要特別注意夏季熱應激對種公豬原精液的影響,應及時調整日糧配方,添加維生素C、維生素E或清熱消暑中草藥等緩解種豬的熱應激;采用濕簾降溫或修建恒溫豬舍;供給種豬充足的清潔涼水或井水;調整飼喂、運動時間;采精室安裝空調等措施可以明顯提高夏季種公豬精液的品質。另外在種公豬的防疫、治療上應避免對精液品質造成影響,疫苗注射應分批、合理安排注射時間;一些藥物如磺胺類藥、伊維菌素等對精液品質都有影響,應盡量避免使用,盡量采用中草藥來代替。
1.2注意采精環節的管理在實際生產過程中采精環節處理不當,將對原精液的質量造成嚴重的影響,很多種公豬站都存在一些問題,應該注意以下幾點:①采精室應干凈、無塵、地面平整,便于沖洗和消毒,并鋪設防滑墊,安裝空調控制室內溫度。②采精室應安裝紫外線燈。③公豬采精前應清潔體表,腹部和包皮必須進行清洗、消毒,最后擦干。④手握法采精過程中應一只手帶雙層消毒手套,按摩公豬包皮后要脫去外層手套再緊握龜頭采精。⑤公豬最初射出的少量精液約(5mL)要棄之不用。⑥集精杯在開采前要預熱到37℃,杯口用過濾紙或四層消毒紗布進行精液過濾。⑦采精人員要樹立無菌概念,采精前更衣換鞋,一切與精液接觸的物品要嚴格消毒并與精液等溫,盡量減少人為因素對原精液品質造成的影響。
2精液處理過程中的質量控制
2.1注重實驗室衛生和環境實驗室要專人負責,保持地面、操作臺面、儀器設備的清潔,設置更衣輔助區,進出必須更衣換鞋;實驗室要安裝空調控制室內溫度在18℃~25℃,并安裝紫外線燈消毒,安裝窗簾防太陽光直射;精液傳遞窗口在精液傳遞后應及時關閉,有條件的應設置雙層推拉門;根據生產實際需要將儀器設備依次擺放在精液檢查、稀釋、分裝和洗滌區,以減少實驗室衛生和環境對精液品質造成的影響。
2.2加強精液品質的鑒定種公豬精液采集后要及時進行精液品質的檢查、稀釋和分裝。精液品質的檢查,主要包括外觀氣味、采精量、精子活力、精子密度、精子畸形率和細菌菌落數的檢查。生產中要嚴格進行每一項的檢查,任何一項不合格則判定為不合格,應棄之不用。
2.2.1外觀、氣味的判定用目測和鼻嗅的方法,正常的種公豬精液成均勻一致的乳白色并略帶腥味。如果精液呈黃色、紅色、帶有膿性物、有異物或帶有腥臭味都應廢棄。
2.2.2采精量的判定由于豬的精液量大,采用有刻度的量杯或量筒測量會產生較大的誤差。實際生產中應用稱量法計算采精量相對比較準確,將豬的精液的比重按照1g/cm3計算,則1g精液相當于1mL,采精量低于100mL時棄之不用。要求電子秤的精確度越高越好,每次使用電子秤時都應調整歸零,以保證稱量的準確性。
2.2.3精子活力的判定取中層精液在200~400倍的顯微鏡下觀察3個視野,每份精液應做2次檢查,取平均值,精子活力低于70%的棄之不用。檢查時顯微鏡載物臺的載玻片和蓋玻片要預熱至37℃,以減少溫度對精子活力判定的影響。與精液接觸的移液器槍頭使用前要用75%酒精棉球消毒晾干。
2.2.4精子密度的判定采用精子密度儀或可見光分光光度計法測定,密度低于1億/mL的棄之不用。在測定中應取精液中層進行檢查,儀器應定期用血細胞計數板法進行校正,以保證精子密度判定的準確性。
2.2.5精子畸形率的判定一般采用姬姆薩染色法進行染色,在400~600倍顯微鏡下觀察每個抹片中精子不少于200個,并記錄畸形精子數,記算精子畸形率,取兩個抹片的平均值,超過20%的棄之不用。精子畸形率的檢查每2個月抽檢一次。在環境溫度變化巨大、疾病治療后或防疫后要加強檢查,才能保證精液的品質。
2.2.6細菌菌落數的判定精液中微生物的含量對精液的品質、保存及受胎效果有重要的影響,雖然《種豬常溫精液》中沒有對其進行規定,但在實際生產中應該按照《豬常溫精液生產與保存技術規范》的要求進行檢查。因此對精液細菌菌落數的檢查非常必要,一般采用營養瓊脂培養基進行培養,48h后觀察培養平皿中的菌落數,超過1×103/mL時棄之不用。菌落數的檢查每2個月抽檢一次。通過定期測定精液中的細菌菌落,可以掌握種公豬的健康狀況及采精過程中的每個環節的操作,只有減少細菌對精液的污染,才能有效地提高精液品質。
2.3做好精液的稀釋和分裝
2.3.1稀釋液的配制豬精液稀釋液的配制一般種公豬站都使用商品稀釋劑,但在實際生產中往往出現很多問題,如不用雙重蒸餾水、稱量不準確、隔天還用等。稀釋液的配制應嚴格按照以下要求進行:①所用器皿干燥箱加熱至160℃后恒溫1h,自然冷卻后待用。②要用新鮮的雙重蒸餾水。③現用現配,一般使用前1h配置,配制后標明配置日期和時間。④稀釋粉使用后應立即密封,以免灰塵、雜菌等污染,防止分解和潮解。⑤稀釋粉和雙重蒸餾水稱量必須精確。⑥剩余稀釋液密封后置于冰箱中冷藏時間不超過24h。
2.3.2精液的稀釋操作首先要準確計算應添加稀釋液的量。應添加稀釋液量=采精量×精子密度×每份劑量/41.7-采精量。(41.7的解釋:《種豬常溫精液》要求精子活力≥60%,每劑量中直線前精子數≥25億,則每劑量總精子數≥41.7億)同時要嚴格進行以下操作:①精液采集后應盡快稀釋,放置時間不宜超過15min。②稀釋液要先在35℃~37℃水浴鍋中預熱,根據精液溫度調節,采用等溫稀釋,不得反向操作。③稀釋時將稀釋液沿杯壁緩慢加入到精液中,輕輕搖動或一個方向攪拌,混合均勻,防止機械性損傷精子。高倍稀釋時,先低倍稀釋(1∶1)~(1∶2),30s后再加入余下的稀釋液。④精液稀釋后應靜置5min再做精子活力檢查,活力不低于60%進行分裝。
2.3.3精液的分裝應選用對精子無毒害作用且滅菌的一次性塑料袋或瓶;每份80~100mL,分裝后應密封;精液包裝應標明產品名稱、劑量、生產單位、生產日期、批號、品種或類型、耳號、有效期和貯存溫度。
3精液產品保存過程中的質量控制
豬精子對低溫很敏感,因此保存溫度至關重要[3]。精液分裝后置于室溫22℃~25℃下1~2h緩慢降溫后,平放入17℃恒溫箱內避光保存;也可用紗布(或干毛巾)包裹后直接放在17℃恒溫箱內;稀釋后的精液應能保存72h以上,在保存中每天搖動,防止精子因為沉淀而死亡;對于儲存的常溫精液產品應盡快用完,超過保質期的精液不應使用。
4及時進行精液產品的質量檢驗
豬常溫精液產品的質量檢驗分為常規檢驗和型式檢驗。常規檢驗是型式檢驗的一部分,即單項目檢驗,主要檢驗項目是外觀和精子活力,在生產批入庫前和銷售前的檢驗。型式檢驗是評定產品質量是否符合標準的檢驗,即全部項目檢驗,為保證精液產品質量每兩周為一抽檢周期。無論常規檢驗還是型式檢驗,任何一項檢驗未達標,都判定為不合格。在實際生產中,銷售前要由質檢人員對精子活力再進行一次檢驗,活力低于60%的不能出售。除此之外,應每2周對精液產品的六項質量指標進行隨機抽檢。由于豬常溫精液產品保存時間短、每頭豬每天產量少,因此生產廠家只有及時進行產品質量檢驗,發現問題及時查找原因解決,才能保證生產出優質的精液產品。總之,豬常溫精液產品從生產到出售涉及許多環節,為生產出優質的精液產品,必須加強種公豬的飼養管理、實驗室管理和質量檢測等各個環節的質量控制,才能充分發揮種公豬的種用價值,保證豬品種改良工作的順利進行。
作者:倪俊娟單位:河南省許昌市畜牧技術推廣站