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《中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志》2015年第二十四期

摘要:

目的探究影響痰標(biāo)本涂陽(yáng)培陰結(jié)果的因素。方法對(duì)1191份涂陽(yáng)痰標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)，從痰檢陽(yáng)性級(jí)別、患者就診服藥情況、標(biāo)本保存時(shí)間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1191份涂陽(yáng)痰標(biāo)本的涂陽(yáng)培陰率為20．07%，鏡檢報(bào)告級(jí)別≤8條、1+、2+、3+、4+痰標(biāo)本的涂陽(yáng)培陰率分別為37．50%、26．06%、22．06%、14．81%、8．08%，鏡檢級(jí)別越低涂陽(yáng)培陰率越高，4+痰標(biāo)本涂陽(yáng)培陰率與≤8條、1+、2+、3+相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05)。痰標(biāo)本保存時(shí)間≤3d、3d～7d、＞7d的涂陽(yáng)培陰率分別為14．75%、39．93%、45．95%，≤3d與3d～7d及＞7d的痰標(biāo)本的涂陽(yáng)培陰率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05)。結(jié)論痰培養(yǎng)標(biāo)本的選擇、患者就診治療史、標(biāo)本保存時(shí)間都直接影響到痰培養(yǎng)結(jié)果。

關(guān)鍵詞:

結(jié)核病;痰標(biāo)本;涂陽(yáng)培陰;影響因素

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的傳染性疾病，控制傳染源是預(yù)防肺結(jié)核病的重要途徑，傳染源主要是排菌的肺結(jié)核病患者，尤其是痰涂片和培養(yǎng)陽(yáng)性者［1］。結(jié)核分枝桿菌痰檢查對(duì)于發(fā)現(xiàn)傳染源、確定診斷和化療方案、考核療效、評(píng)價(jià)防治效果具有重要意義［2］，是實(shí)施全面監(jiān)督化療策略(DOTS)的重要要素之一，對(duì)結(jié)核病防控工作起著重要的作用。其中痰培養(yǎng)檢測(cè)具有靈敏度高的特點(diǎn)［3］，極大地增加患者發(fā)現(xiàn)率，分離菌株可進(jìn)行后續(xù)的藥敏檢測(cè)、菌種鑒定和分子流行病學(xué)分析等。探討影響痰培養(yǎng)結(jié)果的因素，保證痰培養(yǎng)質(zhì)量就顯得尤為重要［4］。本文主要從痰標(biāo)本鏡檢報(bào)告陽(yáng)性級(jí)別、患者就診治療史、標(biāo)本保存時(shí)間方面進(jìn)行比對(duì)分析，為提高結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室工作質(zhì)量提供數(shù)據(jù)參考。

1資料與方法

1．1資料信息來(lái)源于結(jié)核病信息管理系統(tǒng)(專報(bào)網(wǎng))、肺結(jié)核患者登記本、肺結(jié)核患者隨訪登記本、結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室痰檢登記本、結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室痰培養(yǎng)登記本等。標(biāo)本來(lái)自全市9所耐藥監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)及淄博市第一醫(yī)院結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室2014年1月－12月收集的1191份涂陽(yáng)痰標(biāo)本，保存于4℃冰箱。萋－尼染色試劑(批號(hào):BA415031)、酸性改良羅氏培養(yǎng)基由山東省結(jié)核病防治中心統(tǒng)一制備。

1．2方法

1．2．1痰涂片鏡檢方法實(shí)驗(yàn)室采用萋－尼染色法，鏡檢結(jié)果參照《中國(guó)結(jié)核病防治規(guī)劃•痰涂片鏡檢標(biāo)準(zhǔn)化操作及質(zhì)量保證手冊(cè)》進(jìn)行。

1．2．2痰培養(yǎng)方法視痰標(biāo)本性狀做標(biāo)本前處理，加1倍～2倍體積的4%NaOH消化液于痰瓶中，擰緊螺旋蓋，渦旋振蕩器上振蕩，使痰液充分勻化，室溫放置15min。用無(wú)菌吸管取去污染處理后的標(biāo)本0．1ml，均勻接種在酸性改良羅氏培養(yǎng)基斜面上，每份標(biāo)本接種2支酸性羅氏培養(yǎng)基。接種后斜面向上，于37℃環(huán)境中平放，24h后檢查培養(yǎng)基有無(wú)污染，如無(wú)污染，擰緊瓶蓋，直立放置，37℃繼續(xù)培養(yǎng)。

1．2．3結(jié)果報(bào)告方法接種后第3d、第7d各觀察一次菌落生長(zhǎng)情況。發(fā)現(xiàn)菌落生長(zhǎng)者，經(jīng)抗酸染色涂片鏡檢證實(shí)后，可報(bào)告快速生長(zhǎng)分枝桿菌陽(yáng)性。如未發(fā)現(xiàn)快速生長(zhǎng)分枝桿菌菌落生長(zhǎng)，此后每周觀察一次，記錄菌落生長(zhǎng)及污染情況。陽(yáng)性生長(zhǎng)物經(jīng)抗酸染色涂片鏡檢證實(shí)后，可報(bào)告分枝桿菌生長(zhǎng)。培養(yǎng)滿8周后未見菌落生長(zhǎng)者方可報(bào)告培養(yǎng)陰性。觀察發(fā)現(xiàn)非抗酸桿菌生長(zhǎng)時(shí)報(bào)告污染。

1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理將數(shù)據(jù)錄入MicrosoftOffice2003建立數(shù)據(jù)庫(kù)，采用SPSS17．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理分析，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0．05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2．1痰標(biāo)本選擇與涂陽(yáng)培陰結(jié)果對(duì)1191份涂陽(yáng)痰標(biāo)本按照鏡檢陽(yáng)性級(jí)別進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)≤8條、1+、2+、3+、4+的涂陽(yáng)培陰率分別為37．50%、26．06%、22．06%、14．81%、8．08%，總涂陽(yáng)培陰率為20．07%。鏡檢級(jí)別越低涂陽(yáng)培陰率越高(表1)。同時(shí)選擇4+痰標(biāo)本的涂陽(yáng)培陰率作為基準(zhǔn)，其他鏡檢級(jí)別痰標(biāo)本的涂陽(yáng)培陰率與其比對(duì)，≤8條、1+、2+、3+涂陽(yáng)培陰率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2值分別為28．073、26．027、17．502、4．757，P＜0．05)。

2．2患者就診治療史對(duì)涂陽(yáng)培陰率的影響從結(jié)核病信息管理系統(tǒng)(專報(bào)網(wǎng))、肺結(jié)核患者登記本、肺結(jié)核患者隨訪登記本等獲取初診患者與復(fù)治患者的信息，進(jìn)行匯總分析顯示，1191份標(biāo)本中初診患者與復(fù)治患者的涂陽(yáng)培陰率分別為16．07%和30．53%，復(fù)治患者涂陽(yáng)培陰率高于初診患者涂陽(yáng)培陰率，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=35．094，P=0．000)。

2．3痰標(biāo)本保存時(shí)間對(duì)涂陽(yáng)培陰率的影響≤3d、3d～7d、＞7d的痰標(biāo)本對(duì)應(yīng)的涂陽(yáng)培陰率分別為14．75%、39．93%、45．95%。3d～7d、＞7d的痰標(biāo)本的涂陽(yáng)培陰率高于≤3d的痰標(biāo)本，差異有統(tǒng)計(jì)意義(P＜0．05)(表3)。

3討論

涂陽(yáng)培陰率是考核痰標(biāo)本培養(yǎng)質(zhì)量的重要指標(biāo)，影響痰標(biāo)本培養(yǎng)結(jié)果的因素較多，通過對(duì)1191份標(biāo)本進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，在選擇培養(yǎng)對(duì)象方面，應(yīng)盡量選取鏡檢報(bào)告級(jí)別高的痰標(biāo)本作為培養(yǎng)對(duì)象，越是陽(yáng)性級(jí)別高的痰標(biāo)本說(shuō)明結(jié)核分枝桿菌檢出越多，也反映了痰標(biāo)本留取質(zhì)量符合要求，是合格的痰標(biāo)本，在培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)較高的陽(yáng)性率，充分表明了痰標(biāo)本的質(zhì)量對(duì)于培養(yǎng)具有重要影響［5］。在實(shí)際工作中做好正確引導(dǎo)患者留取肺部咳出的合格痰標(biāo)本;提高實(shí)驗(yàn)室人員涂片與鏡檢能力，避免定性錯(cuò)誤與誤差出現(xiàn)，準(zhǔn)確的讀取鏡檢結(jié)果;按照3涂2培的要求，在選擇痰標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)必須考慮陽(yáng)性級(jí)別高的納入培養(yǎng)對(duì)象，提高檢出率。

本研究發(fā)現(xiàn)復(fù)治患者標(biāo)本的涂陽(yáng)培陰率顯著高于初治患者，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能與患者服用抗結(jié)核藥物有關(guān)，復(fù)治患者經(jīng)過一段時(shí)間的抗結(jié)核藥物治療后，藥效發(fā)揮作用殺死體內(nèi)結(jié)核桿菌，患者病情有所好轉(zhuǎn)，排菌減少及菌株活力低所致，也反映出其治療效果較好［6］。而初診患者沒有服用抗結(jié)核藥物治療史，活菌比例較高，因此標(biāo)本的涂陽(yáng)培陰率顯著高于復(fù)治患者。痰標(biāo)本留取后保存時(shí)間較長(zhǎng)，使得標(biāo)本中的活菌數(shù)目以及結(jié)核桿菌的活力下降，進(jìn)而使痰培養(yǎng)的涂陽(yáng)培陰率降低，該結(jié)果與Paramasivan等報(bào)道的結(jié)果類似。綜合考慮痰培養(yǎng)標(biāo)本的選擇、患者就診治療史、標(biāo)本保存時(shí)間都直接影響到痰培養(yǎng)結(jié)果。建議結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室在開展痰培養(yǎng)時(shí)應(yīng)注重選擇合格痰標(biāo)本，在留取痰標(biāo)本后的3d內(nèi)盡早培養(yǎng)，對(duì)鏡檢報(bào)告級(jí)別低及復(fù)治患者的痰標(biāo)本需要改進(jìn)培養(yǎng)方法，確保培養(yǎng)質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)

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［6］全國(guó)第五次結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查技術(shù)指導(dǎo)組/辦公室．2010年全國(guó)第五次結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查報(bào)告［J］．中國(guó)防癆雜志，2012，34(8):485－507．

作者：李源 高風(fēng)華 單位：淄博市疾病預(yù)防控制中心