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《中國衛生檢驗雜志》2015年第二十四期

摘要:

目的探討間接免疫熒光法抗核抗體(ANA)陰性而印跡法抗干燥綜合征A抗體(SS－A)陽性的臨床意義。方法分析本院5471例患者中54例抗SS－A抗體陽性而ANA陰性的患者，并分析總結其與臨床診斷的關系。結果在5471例患者中，出現ANA陰性而抗SS－A抗體陽性共54例，陽性率為0．99%(54/5471)。其中類風濕性關節炎占42．59%(23/54);特發性血小板減少性紫癜占16．67%(9/54);系統性紅斑狼瘡占9．26%(5/54);腎炎和干燥綜合征各占5．56%(3/54);肝炎、肺炎和眩暈各占3．70%(2/54);肺癌、胃炎、濕疹、外傷和高血壓各占1．85%(1/54)。結論單獨抗SS－A抗體陽性而熒光法ANA陰性結果可見于RA、SS、肺癌和高血壓等多種疾病，并非SS及其他自身免疫病特異性抗體。

關鍵詞:

抗核抗體;抗干燥綜合征A抗體;自身免疫性疾病

抗核抗體(ANA)是抗細胞內所有抗原成分的自身抗體的總稱，主要存在于血清中，也可存在關節滑膜液、胸腔積液和尿液中，可以在多種自身免疫性疾病中檢測到，無種屬和器官特異性，是自身免疫性疾病的篩查項目，間接免疫熒光法(IIF)是檢測ANA的經典方法。抗干燥綜合征A抗體(抗SS－A)作為抗核抗體譜(ANAs)中的抗體之一，對特異性診斷自身免疫性疾病具有重要的臨床價值［1］。

1資料與方法

1．1資料選取2013年1月－2014年12月本院門診與住院患者共5471例，檢測發現ANA陰性而抗SS－A抗體陽性結果的患者有54例，其中男性13例，女性41例;年齡為13歲～79歲，平均年齡為(43．11±2．34)歲;門診患者20例，住院患者34例。

1．2儀器與試劑德國LEICADM5500B熒光顯微鏡。間接免疫熒光法和免疫印跡法試劑盒(批號:F141216UH、D140924AG)均購自德國歐蒙(杭州)醫學實驗診斷有限公司。

1．3方法

1．3．1標本采集患者正常飲食，空腹8h～12h，清晨抽取靜脈血2ml～3ml，靜置0．5h后，離心分離血清(3000r/min離心10min)。當日不能及時檢測的血清標本置于－20℃冰箱保存。

1．3．2檢測方法采用間接免疫熒光法(IIF)，檢測ANA熒光顯微鏡觀察結果，抗體滴度≥1∶100為陽性，為盡量消除主觀因素，每個標本均由本實驗室經驗豐富的兩名工作人員分別報告結果。采用免疫印跡法檢測ANAs，共檢測抗nRNP/Sm抗體、抗Smith抗體、抗SS－A抗體、抗Ro－52抗體、抗干燥綜合征B抗體、抗DNA拓撲異構酶－1抗體、抗阻氨酰tRNA合成酶抗體、抗著絲點B抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體和抗核糖體P蛋白抗體12種不同抗原IgG類抗體，每次試驗均設陰性、陽性對照，操作嚴格按照試劑盒提供的說明書進行。

2結果

在5471份標本中，出現ANA陰性而抗SS－A抗體陽性的共54例，陽性率為0．99%(54/5471)。其中類風濕性關節炎23例，占42．59%(23/54);特發性血小板減少性紫癜9例，占16．67%(9/54);系統性紅斑狼瘡5例，占9．26%(5/54);腎炎和干燥綜合征各3例，均占5．56%(3/54);肝炎、肺炎和眩暈各2例，均占3．70%(2/54);肺癌、胃炎、濕疹、外傷和高血壓各1例，均占1．85%(1/54)(圖1)。

3討論

抗SS－A抗體是目前已知的ANAs中分布最廣且最常見的一種抗體［2］，是臨床診斷SS的標準之一［3］，但其特異性欠佳［4］，常和ANA、抗SS－B抗體一起診斷SS，以提高診斷特異性。抗SS－A抗體在臨床最常見的熒光染色模型為核顆粒型，分裂間期HEP－2細胞核漿呈細顆粒型熒光染色，細胞漿熒光染色陰性或弱的熒光染色。但SS－A抗原在細胞核中含量遠高于在細胞漿中的含量，當患者體內的自身抗體為胞漿型的抗SS－A抗體時，在熒光法檢測ANA時會表現為HEP－2細胞核漿呈熒光染色陰性、細胞漿弱的熒光染色。這時往往會導致熒光法檢測ANA為陰性結果。

ANA是自身免疫性疾病(AID)的重要血清學標志，而IIF是檢測ANA的金標準［5］，是檢測自身抗體的主要方法［6］，也是目前應用最廣泛的自身抗體篩查試驗。IIF檢測ANA采用的是HEP－2細胞，其包含的核抗原種類豐富，因此具有其他檢測方法不可替代的優勢。但是HEP－2細胞中某些抗原的含量較低，所以個別情況下會導致檢測靈敏性不夠，出現ANA熒光法陰性，特異性靶抗原檢測結果陽性。ANA陰性而抗SS－A抗體陽性的情況在抗核抗體譜檢測結果中較為少見。一項調查結果顯示，ANA陰性而ANAs中特異性抗體陽性的檢測率為10．17%［7］根據本院檢測結果回顧性分析，ANA陰性而抗SS－A抗體陽性的檢測率為0．99%。出現率不高，且該模式主要出現在RA、血小板減少、SLE等自身免疫性疾病中。因此，在臨床工作中如遇到ANA陰性而抗SS－A抗體陽性時，首先在排除操作錯誤的前提下該情況是可以出現的，且主要出現在類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡、特發性血小板減少性紫癜等自身免疫性疾病。

參考文獻

［1］AframianDJ，KonttinenYT，CarrozzoM，etal．Urbanlegends-series:Sjgren’ssyndrome［J］．OralDis，2013，19(1):46－58．

［2］TanEM．Antinuclearantibodies:diagnosticmarkersforautoimmunediseasesandprobesforcellbiology［J］．AdvImmunol，1989，44(1):93－151．

［3］KobakS，OkselF，AksuK，etal．Thefrequencyofsiccasymp-tomsandSjgren’ssyndromeinpatientswithsystemicsclerosis［J］．IntJRheumDis，2013，16(1):88－92．

［4］蔡逸婷，劉慶中，趙超，等．聯合檢測抗α－胞襯蛋白、抗SSA和抗SSB抗體在干燥綜合征診斷中的應用［J］．現代免疫學，2012，32(2):152－155．

［5］MeroniPL，SchurPH．ANAscreening:anoldtestwithnewrecom-mations［J］．AnnRhrumDis，2010，69(8):1420－1422．

［6］郭大文，張英輝，單娜，等．抗核抗體核型與條帶免疫抗體譜相關性分析［J］．中華實用診斷與治療雜志，2012，26(6):560－562．

［7］胡朝軍，李俊，張道強，等．間接免疫熒光法篩查抗核抗體與特異性抗體檢測的相互關系［J］．中華臨床免疫和變態反應雜志，2011，5(3):179－185．

作者：曹新春 何志強 李永偉 單位：河南省中醫院檢驗科