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1、乳鐵蛋白在口腔醫學研究應用中的優勢

Lf具有多種生物功能，被認為是存在于初乳和常乳中宿主防御系統的活性成分，并被認為是一種安全物質，服用后無不良作用，可廣泛應用于食品、醫療和化妝品領域。Lf的抗菌作用、抗癌作用、對細胞增殖分化的影響、對口腔細菌附著的影響以及對骨再生作用的影響等生物活性可被應用于口腔醫學的各個領域。

2、乳鐵蛋白在口腔醫學研究中的應用進展

2.1乳鐵蛋白在牙周病中應用

1972年Bullen最早發現了Lf的抑菌性［2］，這是Lf最重要的生理功能之一。近年來，人們對Lf的大量臨床研究，已充分證實了這一點。Lf的抑菌作用主要有“鐵剝奪”、“膜滲透”和“酶抑制”3種機制［3］。菌斑細菌及其代謝產物是牙周病的主要致病因素。減少菌斑形成和抑制致病菌，有助于預防牙周病的發生。Lf對牙周代表性細菌如伴放線放線桿菌、牙齦卟啉單胞菌、中間普氏菌的抗菌活性和其他生物學效應已被廣泛研究。Lf的多態性與侵襲性牙周炎發病率的關系以及將齦溝液中乳鐵蛋白作為牙周炎嚴重程度的標記物均已被報道。Hiroyu－kiWakabayashi等［4］用≥130mg／L的人乳鐵蛋白（hLf），鐵缺乏和鐵飽和的牛乳鐵蛋白（bLf），≥6μg／mL牛乳鐵蛋白衍生抗菌肽乳鐵蛋白肽（LfcinB）培養牙齦卟啉單胞菌和中間普氏菌，結果對這兩種細菌的生長抑制作用均長達5h，可作為牙周病的輔助治療手段。HiroyukiWakabayashi［5］研究表明Lf在高濃度時對浮游形式的牙齦卟啉單胞菌和中間普氏菌展現出抗菌活性；此外，Lf能有效的抑制生物膜的形成并且在生理濃度下減少這些細菌生物膜的建立。臨床研究表明，口服bLf可以減少慢性牙周炎患者齦下菌斑中的牙齦卟啉單胞菌和中間普氏菌。在體內和體外研究中發現，Lf可能是牙周細菌的生物膜抑制劑。Atsushi［6］給患有牙周疾病的受試者口服牛乳鐵蛋白脂質體（L－bLf），觀察L－bLf能否有效的治療牙周病。L－BLf作為補充物以片劑的形式（180mgbLf／d）給予受試者4周，受試者多個位點的牙周探診深度超過3mm。在PD大于4mm的5個受試者中研究了51個位點的PD、BOP、GCF量以及GCF中TNF、IL－1、IL－6、MCP－1的水平。通過服用L－BLf，PD明顯減小，但BOP和GCF的量則無明顯改變。GCF中MCP－1的水平明顯降低，而其他細胞因子的水平則沒有改變。這些結果表明，L－BLf補充劑能有效的治療牙周炎疾病，但仍需要大量的前瞻性對照研究。

2.2乳鐵蛋白在齲病治療中的作用

Lf含量的增加又可與其他蛋白協同抑制細菌的致齲作用，符合機體的生理應激機制。郝高峰等［8］以高齲（齲、失、補牙數≥5，高齲組）和無齲（齲、失、補牙數＝0，無齲組）兒童各40名為研究對象，雙金雞納酸法測定唾液總蛋白含量，十二烷基硫酸鈉．聚丙烯酰氨凝膠電泳分析唾液蛋白條帶，免疫印跡法檢測唾液乳鐵蛋白和溶菌酶含量。結果發現高齲組總蛋白含量［（852．02±206．14）mg／L］低于無齲組［（1032．44±221．99）mg／L］，差異有統計學意義（P＜0．001），相對分子質量為77000蛋白的百分含量［（12．50±7．73）IA／μg］顯著高于無齲組［（8．71±4．28）IA／μg，P＝0．009］，相對分子質量為14500蛋白的百分含量兩組間差異無統計學意義（P＝0．137）。高齲組乳鐵蛋白百分含量［（229．04±197．14）IA／μg］顯著高于無齲組［（144．07±99．91）IA／μg，P＝0．018］，溶菌酶含量兩組差異無統計學意義（P＝0．091）。可得出結論唾液蛋白與乳牙患齲密切相關，乳鐵蛋白可能是其中一種重要的成分。

2.3乳鐵蛋白在口腔外科中修復骨缺損的作用

骨缺損是臨床上常見的疾病，目前多采用自體骨或異體骨移植進行修復，但由于骨移植效果不盡如人意，利用組織工程學原理治療骨損傷已成為此領域的研究熱點。增強頜骨再生，提高其穩定性，對于改善種植體的骨結合性和穩定性也有著重要的作用。Lf具有很強的成骨能力，已經被成骨細胞的體外培養實驗和小鼠體內實驗所證實［9］。關于Lf的細胞促進作用很早以前就已有人報道，Naot等［10］用Lf連續5d注射成年雄鼠大腦右半球，發現其顱骨片段組表面間隙明顯增加，礦物疊積率和骨形成率明顯增加，推測Lf可能增強成骨作用而抑制破骨細胞作用。Takayama［11］等經低密度脂蛋白受體相關蛋白基因證實Lf能夠強化膠原酶沉積，從而增強骨密度。Cornish［12］研究發現，Lf能刺激成骨細胞形成周期，是成骨細胞的一種潛在生存因子。Lf亦可降低破骨細胞數目，從而抑制破骨細胞引起的骨吸收。TakaokaR等［13］在小鼠背部皮下植入明膠凝膠結合Lf，明膠凝膠結合Lf在植入部位表現出比單獨Lf注射液更長的Lf釋放期。與沒有經過Lf處理或低濃度Lf處理的大鼠顱骨骨缺損處相比，將合并Lf的明膠凝膠植入大鼠顱骨骨缺損處后能形成明顯增強的骨再生。可以得出，明膠凝膠的緩釋功能能夠增強Lf促進骨再生的活性。

2.4乳鐵蛋白在口腔腫瘤治療中的應用

近年來，一些研究認為，Lf具有化學預防和抗腫瘤作用。Lf能明顯抑制腫瘤的生長和轉移，已被國內外許多科學家證實。Lf對多種器官包括食道、口腔、肺、肝、結腸和膀胱等的腫瘤發生、生長和轉移都表現出抑制作用［14，15］。Lf的抗腫瘤機制是由多種機制介導的。1）Lf蛋白阻止細胞周期G1期向S期的過渡，使細胞進入生長停滯期［16］，調節細胞增殖。Damiens［17］等研究證明Lf可以調節細胞的增殖，在人的乳腺細胞系中加入Lf會導致癌細胞的生長抑制，抑制細胞周期G1期向S期的轉換，并使周期素依賴性蛋白激酶（CKD）的抑制劑P21cip1蛋白水平增加。2）調節機體免疫，增高血液中NK細胞、T細胞數量，并刺激IL－18的大量生成［18］；研究證明Lf可以活化自然殺傷細胞和中性白細胞，誘導集落刺激因子的活性，并且可以增強巨噬細胞的毒性［19～21］。3）激活癌細胞內FAS信號途徑，誘導癌細胞程序性死亡［22，23］；BLf可以通過產生活性氧簇引起體外非白血性白血病細胞系的程序性細胞死亡。最近發現，在結腸黏膜癌細胞系和頭頸部癌細胞系中，Lf改變程序性細胞死亡相關基因的表達［24，25］。4）抑制腫瘤血管發生，這與IL－18阻止血管發生的特性密切相關［26］。Norrby［27］等的研究也認為，Lf可以抑制腫瘤的血管發生，Lf在體外具有抗上皮細胞增殖的活性并且可以強烈抑制血管內皮生長因子介導的血管發生。關于Lf與口腔腫瘤關系的研究比較少，近幾年的研究發現，HBf可以抑制頭頸部鱗狀細胞癌，并且是通過直接的細胞毒作用以及系統性的免疫調節作用來實現的［28］。Xiao［29］等的研究也證明Lf在體外可以抑制3種不同的頭頸部細胞的增殖。目前研究者已經通過12次不同的實驗給211人口服Lf，包括110名健康的志愿者或無癥狀的患者，57名化療患者，44名未作化療的腫瘤患者。Lf有很好的相容性并且沒有藥物相關性死亡，也沒有其他的嚴重的有害的事件報道。實驗結果表明，口服Lf可以有效地延緩腫瘤的發展。

2.5乳鐵蛋白在口腔其他領域的應用

Lf和乳過氧化物酶組成的混合物能夠影響口腔異味。有關學者進行了隨機，雙盲，交叉，安慰劑對照的臨床試驗，十五列受試者口服Lf和乳過氧化物酶混合物片劑，并檢測他們的口腔氣體中揮發性硫化物的含量。結果表明Lf和乳過氧化物酶的混合物對口腔異味有抑制作用。此外，有研究發現牛奶中的蛋白質，如酪蛋白和乳鐵蛋白，能抑制致齲性的變形鏈球菌對羥基磷灰石的初始附著。

3、乳鐵蛋白應用前景展望

目前社會高齡化以及生活習慣變化造成的疾病已成為矚目的社會問題。根據“醫食同源”理論，人們希望通過飲食就可達到一定程度的預防疾病，于是功能性食品的開發成為目前食品行業的熱點。Lf作為一種自然存在的復合物，具有多種生物學功能，且具有安全性，良好的耐受性等特性，因此，Lf的開發和利用具有重要意義和廣闊的開發前景。

作者：劉學敏金明光張莉馬寧單位：吉林大學口腔醫學院牙周黏膜科