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豬偽狂犬病(Pseudorabies,PR)是由豬偽狂犬病病毒(pseudorabiesvirus,PRV)引起的一種以妊娠母豬繁殖障礙和哺乳仔豬神經癥狀及高死亡率為主要特征的急性傳染病,是危害養豬業健康發展的重要疫病之一,目前國內外普遍采用PRVgE基因缺失疫苗對PR進行免疫預防,通過檢測gE抗體鑒別區分疫苗免疫抗體和野毒感染抗體,從而能有效監測豬群中PRV野毒感染情況,逐步淘汰PRV野毒感染豬。由于gE基因缺失疫苗的廣泛應用,我國有效控制了PRV的發生與流行,但自2011年以來我國PRV的感染有日益升高的趨勢。為進一步掌握青海省海東市互助縣PRV野毒感染現狀,2013~2014年,我們對該地區使用PRVgE基因缺失疫苗免疫的54個不同養殖規模的豬場開展了野毒感染抗體的調查,為科學制定PR防控措施提供重要的理論依據。
1材料與方法
1.1試劑盒PRVgE抗體ELISA檢測試劑盒為法國LSI公司產品。
1.2檢測樣品來源與分離方法血清樣品來源于青海省海東市互助縣丹麻鎮、五十鎮、東和鄉、塘川鎮、五峰鎮、南門峽鎮、東溝鄉、西山鄉8個鄉鎮均免疫過PRVgE基因缺失疫苗的54個不同養殖規模的養殖場。血清采集時間為2013年2月~2014年11月,豬只耳緣靜脈采集血液2.0mL,室溫放置2~4h,4℃放置4~6h后,經5000r/min離心10min,吸取上清即為待檢血清樣品,置-20℃保存備用。共采集血清樣品1143份。
1.3檢測方法按照PRVgE抗體ELISA檢測試劑盒說明書進行。
2結果與分析
2.1不同地區PRV-gE抗體檢測結果2013~2014年期間,青海省海東市互助縣8個鄉鎮54個豬場共采集豬血清樣品1143份,經gE-ELISA方法檢測出陽性豬場22個,陽性率為40.74%,陽性血清樣品205份,陽性率為17.94%。從地區分布上看,不同地區均存在PRV野毒不同程度的感染,其中以塘川鎮的感染率最高,達32.64%,南門峽鎮和五峰鎮次之,分別為23.70%和20.82%,西山鄉感染率較低,僅為8.26%。
2.2不同年份PRV-gE抗體檢測結果通過對2013~2014年送檢血清的PRV-gE抗體檢測結果進行分析,2013年PRV-gE抗體陽性率為16.45%(89/541),2014年為19.27%(116/602),2014年較2013年升高了2.82個百分點,表明PRV野毒感染存在日益嚴重的趨勢。
2.3不同季節PRV-gE抗體檢測結果統計不同季度的PRV-gE抗體陽性率,冬季PRV野毒感染陽性率最高,為24.92%(77/309),夏季次為19.67%(81/412),秋、春季節PRV野毒感染陽性率相對較低,分別為12.29%(29/236)和9.68%(18/186)。
2.4不同生長階段豬PRV-gE抗體檢測結果統計不同生長階段豬的PRV-gE抗體陽性率,育肥豬PRV野毒感染陽性率最高,為24.82%(141/568),種豬和仔豬次之,分別為13.46%(21/156)和10.51%(33/314),后備母豬野毒感染陽性率相對較低,為9.52%(10/105)。
3討論
本次調查范圍包括青海省海東市互助縣8個鄉鎮的54個豬場,共采集血清樣品1143份,結果顯示PRV野毒感染豬場陽性率達40.74%,血清樣品陽性率達17.94%,相比于張顯浩等(2015)報道的豬場陽性率38.1%,血清樣品陽性率14.96%,張倩等(2013)報道的血清樣品陽性率15.42%,豬場陽性率和血清樣品陽性率均有一定水平的提高;相比于占松鶴等(2015)報道的豬場陽性率66.67%,血清樣品陽性率18.96%,王有木等(2013)報道的豬場陽性率70.0%,血清樣品陽性率18.03%,豬場陽性率和血清樣品陽性率又具有一定水平的降低。說明近年來我國不同地區豬場中PRV野毒感染現象仍普遍存在,并保持在一個相對較穩定的感染狀態,呈地方性流行,均沒有大規模的暴發。但本次調查中發現,青海省海東市互助縣2014年PRV野毒感染抗體陽性率較2013年升高了2.82個百分點,初步表明PRV野毒感染存在日益嚴重的趨勢,應引起重視。
對不同生長階段豬PRV-gE抗體檢測結果顯示,種豬、仔豬、育肥豬、后備種豬均存在PRV野毒感染抗體,表明不同生長階段的豬群對PRV均易感。其中,育肥豬PRV野毒感染陽性率最高,種豬和仔豬次之,后背母豬最低,表明育肥階段豬群的免疫有可能受到母源抗體干擾等因素造成免疫失敗,成為易感豬群。同時,母豬群中PRV較高的感染率所引起的持續性感染有可能是整個豬場持續陽性的根本原因。故應制定合理的免疫程序,確保疫苗的免疫效果,逐步淘汰母豬群中野毒感染豬,同時結合高水平的生物安全措施,包括嚴格的消毒與隔離,控制豬場PRV攜帶者(貓及嚙齒類動物),引進后備豬群應檢測為PRV野毒陰性,逐步實現豬場中PRV的凈化。
作者:徐春芳 葉培麟 晁永亮 單位: 青海省海東市畜牧獸醫工作站