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摘要:

脊柱動物附韌帶骨骼標本在教學(xué)、科研、科普方面具有重要意義，制作過程與其它骨骼標本的區(qū)別關(guān)鍵在于骨骼韌帶的有效保留，利用韌帶使骨骼標本有機連接，保持自然的完整性。保留好完整的骨骼韌帶的技術(shù)要點貫穿于標本制作的整個過程，包括選材、剔肉、腐蝕、脫脂、固定、漂白等，而且動物種類不同其技術(shù)要求也有不同之處。對脊椎動物附韌帶骨骼標本制作流程進行了較為全面、系統(tǒng)的總結(jié)。

關(guān)鍵詞:

脊椎動物;附韌帶骨骼標本;制作

動物骨骼標本能直觀有效地促進教學(xué)質(zhì)量提高，同時也有助于對脊椎動物系統(tǒng)演化的研究。脊椎動物骨骼標本可分為四種類型:分散骨骼標本、附韌帶骨骼標本和透明骨骼標本等。附韌帶骨骼標本是指在制作過程中保留骨骼韌帶，借助骨與骨之間關(guān)節(jié)韌帶自然連接，制作而成的骨骼標本。附韌帶骨骼標本對教學(xué)效果的提升主要體現(xiàn)在以下三方面:一是整體性:按原來位置和狀態(tài)利用韌帶將骨骼有機連為一體，在教學(xué)、科研、科普活動中，能夠充分呈現(xiàn)動物骨骼系統(tǒng)的整體性。二是自然性:附韌帶骨骼標本由于在制作過程中保留韌帶，關(guān)節(jié)間的連接幾乎接近動物骨骼的原來狀態(tài)，在教學(xué)活動中其直觀性，科研過程中其原生態(tài)性，科普展示活動中其自然性均得于充分體現(xiàn)。三是觀賞性:較之分散的，或是借助材料人工串聯(lián)的骨骼標本，附韌帶骨骼標本的展示具有視覺上的可觀賞性。當然，脊椎動物附韌帶骨骼標本制作過程較為復(fù)雜，技術(shù)要求較為嚴格精細。結(jié)合上述特點全面系統(tǒng)地闡述脊椎動物附韌帶骨骼標本制作的技術(shù)要點。

1脊椎動物附韌帶骨骼標本的制作

1．1用具與試劑

主要工具包括:解剖刀、解剖剪、解剖盤、鑷子、水槽等。常用試劑有:乙醚、脫脂劑(氫氧化鈉、氫氧化鉀、汽油、二甲苯)、漂白劑(過氧化氫、漂白粉、過氧化鈉)等。

1．2制作過程、方法及步驟

脊椎動物附韌帶骨骼標本制作過程較為復(fù)雜，主要包括以下系列步驟:

(1)選材

把好選材關(guān)是保證附韌帶整體骨骼標本特性的基礎(chǔ)。要求:①動物年齡適當偏大，保證骨骼硬化好、關(guān)節(jié)韌帶發(fā)育充分。②動物體要新鮮無腐爛，各部位無損傷，保證骨骼完整、關(guān)節(jié)韌帶完好。③體態(tài)較好，體型適中，保證骨骼標本的整體美觀性。

(2)處死

動物種類不同，采取不同的處死方法，如表1所述。

(3)剝皮、去內(nèi)臟

處死動物后，即可對動物體進行剝皮處理。魚只需去除魚鱗即可，青蛙、家鴿、家兔則需去除皮膚及附屬物。然后將動物體剖開去除內(nèi)臟，并清洗干凈。

(4)剔肉

將實驗動物剝皮并除去內(nèi)臟之后，接下來進行肌肉剔除。過程可包括粗剔除和細剔除。粗剔除:利用解剖刀、解剖剪等工具將附著在動物骨骼上的大塊肌肉剔除，主要包括附著于頭骨、脊柱、胸腹部、四肢骨等較為集中大塊的肌肉群。細剔除:在粗剔除大塊肌肉的基礎(chǔ)上，進一步剔除細小肌肉。主要包括附著于頭部、脊柱椎骨間、膝關(guān)節(jié)、腕(踝)關(guān)節(jié)、掌骨、跗骨等部分較為分散細小的肌肉群。家兔頭骨上的肌肉不易剔除，可在枕孔與寰椎之間把它割離，并將頭骨放在鍋內(nèi)燒煮進行熱處理，但燒煮的時間不宜過長，以免骨頭分散。細剔除過程中為了充分清除分散的肌肉可以采用浸腐法和熱處理法。浸腐法:就是將粗剔除肌肉的動物浸沒于水中，讓其自行腐爛分解，待肌肉糜爛后，用鋼絲刷刷去肌肉。熱處理法:將待細剔除肌肉的動物放入水中加熱水燒煮，或者將動物體放入解剖盤中然后用熱水淋澆，剔除附在骨骼上的殘余細小肌肉。剔除肌肉時一定要耐心細致，不能損其韌帶，避免關(guān)節(jié)分離。剔除脊柱上的肌肉時，應(yīng)避免將位于椎弓背面的棘突和椎弓兩側(cè)的橫突剪壞;剔除胸、腹腔肌肉時，應(yīng)避免把肋軟骨和劍狀軟骨剪斷或損壞;至于韌帶發(fā)達的關(guān)節(jié)，如膝關(guān)節(jié)等，可適當剪除部分韌帶，但要確保關(guān)節(jié)不致分離。

(5)去除腦、脊髓、骨髓

動物腦、脊髓、骨髓，從骨骼間隙中滲出，使骨骼由黃變黑，且易沾染灰塵，從而影響標本的潔凈和美觀，因此必須將其清除。腦和脊髓的清除:用適當長度和粗細的鉛絲的一端敲扁，彎成小匙狀或栓上脫脂棉并插入腦腔和椎孔中，將腦和脊髓搗碎后挖出來，并放入盛有水的盆中，邊挖邊沖洗。骨髓的清除:用電鉆或手搖鉆在各長骨的兩端正中央分別鉆一個孔，直達骨髓腔中，并用注射器吸滿水，套上針頭，分別插入肱骨、尺骨和橈骨、股骨、脛骨上的鉆孔內(nèi)，并將水注入骨髓腔中，使骨髓排出，直到骨髓排盡。

(6)腐蝕與固定

腐蝕:將經(jīng)過上述處理的動物骨骼，在清水中沖洗干凈(冬天用溫水)，放入合適的玻璃缸中，配置適當濃度的腐蝕劑進行浸泡，這時殘留在骨骼上的肌肉，因受腐蝕劑的作用而膨脹成半透明狀態(tài)，接著把骨骼取出，放在清水中沖洗，待洗凈腐蝕劑后，再用刀、剪把殘留在骨骼上的肌肉耐心細致地剔除，并多次重復(fù)處理，直至完全剔除干凈。不同脊椎動物骨骼的腐蝕方法如表2。表2固定:將腐蝕液浸漬的骨骼標本，放在70%－95%的酒精中固定(1－3天)，對軟骨和韌帶進行固定和硬化。

(7)脫脂

脫脂是為了去除標本上的脂類物質(zhì)，使標本保存的時間更長。骨骼經(jīng)過腐蝕劑的浸漬后，已有許多脂肪被脫除，但對脂肪多的個體，靠腐蝕劑脫脂是無法脫除干凈的。當標本放置一段時間后，殘留在骨路中的脂肪，會逐漸由骨骼間隙中滲透出來，使骨骼發(fā)黃，并容易沾染上灰塵。所以，需將骨骼標本用脫脂劑進行脫脂處理。將腐蝕后的骨骼晾干后，置于密閉的容器中，然后加入適量的汽油，利用汽油溶解骨骼中的脂肪，達到脫脂的目的。不同脊椎動物骨骼的脫脂如表3所述。

(8)漂白

把經(jīng)充分脫脂的動物骨骼用清水漂洗干凈，浸于漂白劑中進行漂白處理，目的是除去雜質(zhì)、保持骨骼的潔白度、保證骨骼標本的質(zhì)量和美觀性。常用漂白劑有:過氧化氫、過氧化氫鈉、漂白粉、亞硫酸等。不同脊椎動物骨骼的漂白如表4所述。

(9)整形、串聯(lián)、裝架

整形:將漂白的動物骨骼，用清水洗凈，整理其形態(tài)為動物的自然姿態(tài)，并放在陽光下曬干(或自然晾干)。整形應(yīng)在其韌帶未完全干燥時邊曬邊整理。為了防止干燥過程中變形，可用白紙團等墊在胸腔和肋骨等處，或者用細紗繩吊掛在木制的框架中。串聯(lián):將缺少關(guān)節(jié)韌帶或韌帶被損壞而散落的骨骼，如:頭骨與寰椎間、魚的肋骨等，用適宜的銅線或鋁線從內(nèi)部串裝連接。并將串聯(lián)后的骨骼與保留韌帶的主體部分按自然狀態(tài)連為一整體。裝架:將整形、串聯(lián)的動物整體骨骼固定到臺板上，固定臺板可以用木板或者塑料泡沫板，同時用骨骼支架支撐。動物骨骼支架制作一般有兩種方法:一是支柱法，就是用銅絲做兩根支柱，支撐在前后脊柱上;二是串裝法，就是將銅絲由四肢長骨中間穿過支撐，在四肢的外表基本上見不到金屬絲的痕跡。

2脊椎動物骨骼標本保存

為了長期有效保存，需將整形裝架好的動物骨骼標本放入密封標本盒內(nèi)。標本盒大小可根據(jù)骨骼標本制作，材料可用有機玻璃做盒體。標本保存中應(yīng)特別注意以下幾方面:

(1)防潮防霉

在標本盒內(nèi)放吸濕劑或室內(nèi)裝抽濕機，若標本已經(jīng)發(fā)霉，可用軟毛筆蘸水酒精與石碳酸混合液(7∶3)刷洗或可直接用無水酒精刷洗。

(2)防鼠防蟲

防止老鼠進入標本盒內(nèi)損壞標本。防蟲則注意標本盒蓋要嚴密，少開，盒內(nèi)隨時保持驅(qū)蟲劑或殺蟲劑濃烈的氣味。若標本已生蟲，則用藥棉浸敵敵畏原液，置于標本盒內(nèi)，蓋上盒蓋，熏蒸幾天，可殺死蛀蟲。

(3)防塵防陽光

盒子少開，密閉，灰塵落入自然少;門窗少開，窗上加簾子，防止陽光直接照在標本上，可防止因日光照而導(dǎo)致標本變色。另外，為了保護標本免受損壞，最好隨時檢查，并每年1～2次用藥劑熏蒸。

3討論與總結(jié)

脊椎動物附韌帶骨骼標本制作過程較為復(fù)雜和繁瑣，其關(guān)鍵之處在以下幾點:

(1)制作過程復(fù)雜，耗時長

從選材到整形裝架，完整地制作一個骨骼標本需要10～30天，特別是腐蝕、脫脂、漂白等過程必需要有充分的時間才能確保標本質(zhì)量。同時經(jīng)水浸腐蝕的動物骨骼帶有較強的刺鼻的氣味，要求實驗操作間保持通風(fēng)透氣。

(2)保留韌帶的完整是技術(shù)難點之一

附韌帶骨骼標本的關(guān)鍵就是要保留骨骼關(guān)節(jié)間韌帶的完整性。在熱處理過程中溫度的控制，剔肉過程中解剖刀和剪的力度的調(diào)節(jié)，腐蝕、脫脂、漂白過程中，試劑濃度、時間長短的把握等因素都會影響骨骼韌帶的保留。

(3)腐蝕、脫脂、漂白是標本制作的三個關(guān)鍵環(huán)節(jié)

腐蝕過程應(yīng)注意:①配制腐蝕劑時，不能用金屬容器盛放，也不要與易銹的金屬接觸，防止容器受腐蝕損壞和鐵銹污染骨骼標本。②腐蝕劑濃度高低、腐蝕時間長短應(yīng)根據(jù)動物種類不同和氣溫高低而定。③在骨骼腐蝕程中，要經(jīng)常觀察，如果發(fā)現(xiàn)韌帶呈透明膠狀，說明腐蝕已經(jīng)過度。高溫季節(jié)要適當降低腐蝕劑濃度，并須經(jīng)常觀察，避免骨骼的關(guān)節(jié)分離。④腐蝕過程中，根據(jù)情況可多次調(diào)換新腐蝕液，直到骨骼顯露出淡黃色為止。脫脂過程應(yīng)注意:①因汽油易燃，使用時必須在安全的地方，并采取防范措施，以免發(fā)生火災(zāi)事故。②脫脂時間長短應(yīng)根據(jù)動物種類不同和氣溫高低而定，以最大限度能除去附著在骨骼上的脂肪為目的，但又不能損其韌帶。漂白過程應(yīng)注意:①白試劑濃度應(yīng)根據(jù)骨骼大小、氣溫高低、骨骼硬度具體情況，經(jīng)常注意觀察，合理調(diào)節(jié)。②漂白時間長短應(yīng)根據(jù)動物種類不同和氣溫高低而定，保證不能損其韌帶。另外:腐蝕、脫脂、漂白過程中所用試劑、濃度、時間雖然都是反復(fù)試驗，多因素優(yōu)化組合的結(jié)果，但因采用動物種類不同、實驗環(huán)境存在差異，因此在具體操作過程中應(yīng)根據(jù)實際情況靈活調(diào)控。

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作者:趙家升 艾薇 單位:云南保山學(xué)院資源環(huán)境學(xué)院