本站小編為你精心準備了常規改性對大豆蛋白化學結構的影響參考范文，愿這些范文能點燃您思維的火花，激發您的寫作靈感。歡迎深入閱讀并收藏。

《浙江林業科技雜志》2014年第二期

1試驗方法

分別以溫度、pH（酸和堿）、蛋白酶為單因素設計實驗，采用紅外光譜分析儀對改性前后大豆蛋白的化學結構進行了分析。①將30g豆粕粉加入到裝有100g水的燒瓶中，在常溫下使用攪拌機攪拌30min，得到均勻的豆粕溶液（未處理）；②將30g豆粕粉加入到裝有100g水的燒瓶中，在恒溫槽中加熱并保持溫度為75℃，使用攪拌機攪拌30min，得到大豆蛋白的熱改性溶液（熱改性）；③將30g豆粕粉加入到裝有100g水的燒瓶中，在恒溫槽中加熱并保持溫度為39℃，用硫酸調溶液的pH為2.0，加入5000U/g的胃蛋白酶，使用攪拌機攪拌30min，然后用氫氧化鈉調溶液的pH為5.6，得到大豆蛋白的酶改性溶液（酶改性）；④將30g豆粕粉加入到裝有100g水的燒瓶中，用硫酸調溶液的pH為2.0，并使用攪拌機攪拌30min，得到大豆蛋白的酸改性溶液（酸改性）；⑤將30g豆粕粉加入到裝有100g水的燒瓶中，用氫氧化鈉調溶液的pH為12.0，并使用攪拌機攪拌30min，得到大豆的堿改性溶液（堿改性）。將上述制備的各豆粕溶液先用粘度計測試各溶液（25℃）的粘度，然后取少部分放入冰箱中，在－18℃下冷凍24h，隨后用真空冷凍干燥箱對樣品進行冷凍干燥，并使用紅外光譜儀對冷凍干燥后的樣品粉末進行分析。

2結果與分析

表1和圖1分別為改性前后豆粕溶液的粘度和紅外光譜圖。

2.1熱改性對大豆蛋白的影響由圖1可知，豆粕中主要含有-OH、-NH2、-COOH等活性基團，其中波數為3411.16cm－1處的寬的吸收峰是分子間氫鍵O-H伸縮振動和N-H伸縮振動吸收的特征峰；波數為2929.50cm－1處的峰是CH2的伸縮振動特征峰；波數為1654.22cm－1處的峰是C=O伸縮振動（酰胺Ⅰ譜帶）；波數為1541.43cm－1處的峰是N-H面內彎曲振動和C-N伸縮振動的偶合峰（酰胺Ⅱ譜帶）；波數為1241.75cm－1處的峰是C-N伸縮（酰胺Ⅲ譜帶）；在波數為1399.92cm－1處的峰是COO-的特征峰，波數為1053.50cm－1處的峰是伯醇吸收帶。從圖1可以看到，與未改性豆粕的譜圖相比，熱改性豆粕的紅外光譜圖中各峰形和峰位都沒有變化。這說明熱改性沒有改變大豆蛋白的一級結構(多肽鏈上氨基酸的排列順序），而由表1又可知，熱改性豆粕溶液的粘度要比未改性的明顯增大，這可能是大豆蛋白發生了熱變性。在加熱條件下，大豆蛋白質分子由原來的卷曲緊密結構舒展開來，使分子內部的疏水基團暴露在外部，從而使分子外部的親水基團相對減少，致使溶解度降低，并且蛋白質分子在受熱后可能發生了締合作用[9]，從而使得粘度增加。

2.2酶改性對大豆蛋白的影響由圖1可知，與未改性豆粕的譜圖相比，酶改性豆粕的紅外光譜圖中峰的變化主要是在波數為1241.75cm－1處的C-N伸縮（酰胺Ⅲ譜帶）和波數為1053.50cm－1處的伯醇吸收帶。C-N伸縮（酰胺Ⅲ譜帶）吸收強度的減弱說明在蛋白酶的作用下，部分肽鍵或酰胺鍵發生了水解；波數為1053.50cm－1處的伯醇吸收帶的消失以及出現波數為1111.38cm－1的特征峰，說明大豆蛋白肽鏈水解后的小分子中的伯醇基團在濃硫酸的催化作用下生成了醚鏈。與酸改性豆粕的譜圖相比，在波數為1541.43cm－1處的N-H面內彎曲振動（酰胺Ⅱ譜帶）吸收強度減弱，說明一部分的-NH2參與了交聯反應。此外，由表1可知，經蛋白酶改性后的豆粕溶液的粘度有所增大，這可能是部分斷裂開的多肽鏈的分子內或分子間交聯，致使分子量增大，從而使粘度升高。蛋白酶改性大豆蛋白的作用機理主要在于能夠改變大豆蛋白的一級結構，有限度地水解酰胺鍵使大豆蛋白部分降解，增加其分子內或分子間交聯或連接其他特殊功能基團[1]。圖1改性前后豆粕溶液的紅外光譜圖波數/cm－14000350030002500200015001000500酸改性堿改性酶改性未改性熱改性

2.3酸改性對大豆蛋白的影響由圖1可知，與未改性豆粕的譜圖相比，酸改性豆粕的紅外光譜圖中峰的變化主要是在波數為1241.75cm－1處的C-N伸縮（酰胺Ⅲ譜帶）和波數為1541.43cm－1處的N-H面內彎曲振動（酰胺Ⅱ譜帶）。C-N伸縮（酰胺Ⅲ譜帶）吸收強度的減弱說明在強酸的作用下，部分肽鍵發生了水解；波數為1541.43cm－1處的N-H面內彎曲振動（酰胺Ⅱ譜帶）吸收強度的增強說明在濃硫酸的作用下，大豆蛋白的空間球狀結構發生了明顯的變化，球蛋白中的多肽鏈被解離開來，暴露出更多的-NH2，并且-NH2也沒有被反應掉。由圖1還可知，酶和酸改性豆粕的譜圖與未改性豆粕的譜圖相比，各酰胺譜帶發生了不同程度的藍移，這可能是酸的誘導效應。此外，由表1可知，濃硫酸改性過的豆粕溶液的粘度下降明顯，這可能是在酸的作用下被解離的大豆蛋白的多肽鏈舒展開來，另外，對比圖1中酶改性豆粕的譜圖可知，雖然蛋白分子在酸的作用下發生了部分肽鍵或酰胺鍵的水解，但對整條肽鏈的影響不大，斷開的肽鍵部位也沒有出現分子內或分子間交聯的跡象。

2.4堿改性對大豆蛋白的影響由圖1可知，與未改性豆粕的譜圖相比，堿改性豆粕的紅外光譜圖中峰的變化主要是在波數為1241.75cm－1處的C-N伸縮（酰胺Ⅲ譜帶）和波數為1541.43cm－1處的N-H面內彎曲振動（酰胺Ⅱ譜帶）。但與酸改性和酶改性的譜圖相比可以發現，堿水解肽鍵或酰胺鍵的能力要高于酸和酶，在波數為1241.75cm－1處的C-N伸縮（酰胺Ⅲ譜帶）幾乎完全消失了，堿水解肽鍵或酰胺鍵的能力比胃蛋白酶強，這可能是胃蛋白酶對肽鏈中的肽鍵或酰胺鍵的水解具有專一性，并不能水解所有肽鏈中的肽鍵或酰胺鍵，而強堿對肽鍵或酰胺鍵的水解并沒有這方面的限制。此外，由波數為1541.43cm－1處的N-H面內彎曲振動（酰胺Ⅱ譜帶）吸收強度的減弱可知，大部分的-NH2被反應掉了。由圖1還可知，堿改性豆粕的譜圖與未改性豆粕的譜圖相比，各酰胺譜帶也發生了不同程度的藍移，這可能是具有兩性的蛋白質在堿的作用下也發生了的誘導效應。在實驗過程中隨著溶液pH值的上升，攪拌越來越困難，并且由表1可知，堿改性的豆粕溶液的粘度達到83417mPa/s，遠遠高于未改性和其他常規改性的豆粕溶液。堿改性豆粕的機理主要在于大程度的水解肽鍵和酰胺鍵，并催化一些活性基團參與各分子內或分子間的交聯反應[10]。綜合以上的分析可知，熱改性，酶改性，酸、堿改性等常規改性方法均能導致大豆蛋白的化學結構發生變化，這些變化也反應出不同改性方法改性大豆蛋白的機理和程度也各有所異。單一的改性往往有著局限性，聯合使用兩種或多種方法對大豆蛋白進行改性才是今后研究的重點。

3結論

（1）熱改性不會對大豆蛋白的一級結構造成影響，會使大豆蛋白的溶解度降低；大豆蛋白會在受熱時發生熱變性，并且可能發生了締合作用，使溶液的粘度升高。（2）酶改性會在一定程度上水解肽鏈中的肽鍵或酰胺鍵，增加肽鏈分子內或分子間交聯或連接其他特殊功能基團，并且水解后生成的部分小分子已經發生了交聯。（3）酸改性會部分水解肽鍵，但這種改性對肽鏈的影響不大，并且水解出來的小分子沒有發現交聯的跡象，另外酸還會對大豆球蛋白進行解離，致使改性后的豆粕溶液的粘度大幅降低。（4）堿改性會大程度地水解肽鍵或酰胺鍵，使得多肽鏈上大量的極性基團暴露出來；水解出來的小分子會發生交聯反應，生成分子量更大的分子，使溶液的粘度急劇升高。

作者：朱勁單人為李琴李延軍袁少飛王洪艷單位：浙江農林大學浙江省林業科學研究院浙江省竹類研究重點實驗室江西廣播電視大學