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《江西中醫(yī)藥雜志》2014年第八期
1統(tǒng)計學處理
實驗數(shù)據均以x珋±s表示,兩組數(shù)據間比較采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行t檢驗,以P<0.05表示顯著性差異、以P<0.01表示非常顯著性差異、以P<0.001表示極顯著性差異。
2方法與結果
2.1提取方法
2.1.1水溶性有效部位提取方法稱取干燥梔子粗30g加7倍量水浸泡30min后超聲提取15min過濾,濾渣再加4倍量水超聲提取15min過濾,最后再加4倍量水超聲提取15min過濾,合并3次提取液加入1‰苯甲酸鈉于55℃烘箱中濃縮至100mL。
2.1.270%醇溶性有效部位提取方法稱取干燥梔子水提藥渣30g加入5倍量70%乙醇浸泡30min后超聲提取20min過濾,再加4倍量70%乙醇超聲提取20min過濾,最后再加入3倍量70%乙醇超聲提取20min過濾,合并3次提取液于55℃烘箱中濃縮至100mL,加入1‰苯甲酸鈉。
2.2試驗方法實驗動物分為9組:正常對照組(Normal)、巴中產梔子水溶性有效部位組(BZZZW)、江西產梔子水溶性有效部位組(JXZZW)、江津產梔子水溶性有效部位組(JJZZW)、湖北產梔子水溶性有效部位組(HBZZW);巴中產梔子70%醇溶性有效部位組(BZZZA)、江西產梔子70%醇溶性有效部位組(JXZZA)、江津產梔子70%醇溶性有效部位組(JJZZA)、湖北產梔子70%醇溶性有效部位組(HBZZA)。每組動物數(shù)均為5只。于試驗第一日開始,給藥8個組分別插管灌胃給予相應藥物,劑量均為2.1g/kg;Normal組插管灌胃給予等量生理鹽水。每日灌胃1次,連續(xù)3天。實驗第四天灌胃給藥一次后30min,于家兔耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉30mg/kg(即3%戊巴比妥鈉溶液1mL/kg),麻醉后將動物背位固定于手術上,去毛后開腹,于家兔膽囊中抽取膽汁,測定膽汁中TBIL和CHOL含量。
2.3檢測原理肝膽疾病和溶血性疾病膽汁中CHOL和TBIL含量都有一定程度變化,本試劑盒能定量測定人體膽汁中二者的含量,所采用的反應原理:TBIL反應原理(化學氧化法)。
2.4試驗結果見表1。結果可知,四個產地梔子無論是水溶性有效部位,還是70%醇溶性有效部位均具有非常顯著降低正常家兔膽汁中總膽紅素TBIL和總膽固醇CHOL含量的作用,尤其是醇溶性有效部位。巴中產梔子水溶性有效部位BZZZW對正常家兔膽汁中TBIL和CHOL的含量降低作用比江西、湖北、江津產梔子水溶性有效部位更有優(yōu)勢,但無顯著性差異(P>0.05)。巴中產梔子70%醇溶性有效部位BZZZA對正常家兔膽汁中TBIL和CHOL的含量降低作用比江西、湖北、江津產梔子70%醇溶性有效部位更有優(yōu)勢,但無顯著性差異(P>0.05)。梔子70%醇溶性有效部位對正常家兔膽汁中TBIL和CHOL的含量降低作用優(yōu)于梔子水溶性有效部位,但是無顯著性差異(P>0.05)。總之從梔子對正常家兔膽汁中總膽紅素TBIL和總膽固醇CHOL含量降低作用的研究結果證明:巴中產梔子品質更優(yōu),治療黃疸產生的效果更佳。巴中產梔子在川產藥材中的臨床開發(fā)和利用方面占具優(yōu)勢。
3討論
3.1研究結果表明,巴中產梔子提取物降低正常家兔膽汁中TBIL、CHOL的效應與江西、江津、湖北產梔子的比較有進一步降低趨勢,提示巴中梔子提取物具有明顯利膽退黃作用,在臨床上黃疸發(fā)生時,可優(yōu)選巴中產梔子,以達到更好的治療效果。另根據傳統(tǒng)的炮制經驗,臨床配方用梔子多采用烘干、麩炒、清炒等方法進行炮制后才能入藥。故其炮制品對藥效的研究有待深入。
3.2本研究只采用梔子提取物對正常家兔膽汁中TBIL、CHOL含量的作用進行研究,而對梔子如何利膽退黃的機制還不夠深入。下一步有待制備溶血性黃疸、肝細胞細胞性黃疸、阻塞性黃疸、膽汁淤積型黃疸等模型,再給家兔膽總管插管形成瘺管引流膽汁,觀察梔子提取物對家兔膽汁分泌量的影響,測定家兔膽汁以及血清成分,觀察梔子提取物對黃疸模型組家兔利膽退黃的效果。
3.3梔子本身味苦、性寒,臨床上不能大劑量長時間給藥,但劑量太少給藥時間太短都會影響治療效果。本研究連續(xù)同劑量給藥四天,最后各給藥組之間結果無顯著性差異,可能與給藥時間相對過短有關。有待進一步研究給藥劑量和給藥時間對療效的影響。
作者:王利國唐燦劉艷李梅雷燕黃麗萍單位:瀘州醫(yī)學院附屬中醫(yī)醫(yī)院瀘州醫(yī)學院藥學院