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摘要:目的分析精子核成熟度與妊娠結局之間的相關性。方法分析2014年1月至2016年12月間108例配偶受孕的男性不育患者的臨床資料，根據其配偶妊娠的臨床結局分為正常生育組和異常妊娠組，比較兩組間精子濃度、前向運動精子百分率、正常形態精子百分率、精子核成熟度等指標的差異，分析精子核成熟度與妊娠結局的相關性。結果108例配偶受孕的不育癥患者中，正常生育74人，異常妊娠（包括生化妊娠、早期流產、晚期引產等）34例，兩組間精子濃度、前向運動精子百分率、正常形態精子百分率無明顯差異（P＞0.05），正常生育組精子核成熟度顯著高于異常妊娠組（P＜0.01），精子核成熟度與妊娠結局呈正相關（r=0.413，P=0.000）。結論精子核成熟度可能與妊娠結局密切相關，在評估和預測女方妊娠結局時，有必要了解和分析男方精子核成熟度的高低。

關鍵詞:不育,男性;精子核成熟度;妊娠結局;相關性

環境污染的惡化和社會壓力的增加，很大程度上對人類的繁衍產生了不可低估的影響，尤其是對妊娠結局的影響和干擾，更是值得生殖醫學工作者關注的焦點。有學者[1,2]認為男性精子的核成熟度與精子的體外受精能力密切相關，可以影響輔助生殖包括夫精人工授精（AIH）、體外受精（IVF）、卵胞漿內單精子顯微注射（ICSI）的妊娠結局；也有學者[3]認為女性ICSI的受精率和妊娠率與精子核成熟度沒有任何關系，輔助生殖結局不受影響。精子的細胞核是保持精子遺傳物質的重要構成部分，它是否會影響妊娠結局尚有待于更多的論證和觀察。筆者分析了108例配偶妊娠的男性不育患者的臨床資料，觀察了正常生育者和異常妊娠者之間的精子參數以及精子核成熟度的差異，分析了精子核成熟度與妊娠結局之間的相關性，現將結果匯報如下。

資料與方法

一、一般資料

所有研究對象均來源于我院生殖?？崎T診，因不孕不育而進行輔助生殖助孕，其中行宮腔內人工授精（IUI）助孕81例，體外受精-胚胎移植（IVF-ET）助孕27例，其配偶在我院確診為早孕，均簽署知情同意書，能配合全身體格檢查，生殖器發育正常；能按照WHO第五版《人類精液檢查與處理實驗室手冊》[4]的規范和標準收集精液標本；愿意配合并接受相關檢查和隨訪。并排除染色體核型異常及Y染色體微缺失等遺傳性疾??；排除先天性疾病及全身系統性疾病史；排除生殖道感染、傳染性疾病史；排除睪丸外傷、隱睪等手術史；排除長期藥物、毒性物質接觸史。

二、分組方法

根據12個月的隨訪結果分為正常生育組和異常妊娠組，其中正常生育組74人，以正常生育小孩為標準。異常妊娠組34人，以未正常生育小孩為標準，其中包含配偶生化妊娠、早期流產、晚期終止妊娠等。

三、檢測方法

（一）精子常規分析參照WHO第五版《人類精液檢查與處理實驗室手冊》[4]標準，采用手淫法收集研究對象禁欲2~7d后的新鮮精液樣本，置于37℃恒溫水浴箱，待精液完全液化后應用計算機輔助精液分析儀（CASA）在雙人核對下進行精子濃度、前向運動精子百分率等指標的檢測。

（二）精子形態學分析參照WHO第五版《人類精液檢查與處理實驗室手冊》[4]標準，采用改良巴氏染色法進行精子染色，在雙人核對制度下由2位實驗室專業人員進行閱片，每片計數200個精子，計算正常形態精子百分率。

（三）精子成熟度檢測由專人負責采用苯胺藍染色分析法進行精子核成熟度的分析，具體操作步驟參照精子成熟度檢測試劑盒（深圳博銳德生物醫學工程有限公司）。

四、隨訪方法

有專人進行跟蹤隨訪，從婦科確診其配偶妊娠后開始定期隨訪，于其配偶妊娠1個月內、3個月、6個月、9個月、12個月進行定期隨訪，記錄其配偶身體健康指標及胚胎發育情況。五、統計方法采用SPSS18.0軟件進行統計分析，所得計量數據用均值加減標準差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

結果

一、一般人口學特征比較

108例配偶受孕的不育癥患者中，正常生育74人，異常妊娠（包括生化妊娠、早期流產、晚期引產等）34例，兩組對象在年齡、體質量指數（BMI）、配偶年齡、配偶BMI等一般人口學指標無差異，具有可比性，結果見表1。

二、兩組精子參數比較

兩組間精子濃度、前向運動精子百分率、正常形態精子百分率無明顯差異（P＞0.05），正常生育組精子核成熟度顯著高于異常妊娠組（P＜0.01），精子核成熟度與妊娠結局呈正相關（r=0.413,P=0.000），結果見表2、表3。核的成熟是評估其穩定程度的標志，尤其是保障精子所攜帶的生物遺傳物質能夠得到延續的重要手段。當精子核內的染色物質包裝不完善時候，精子的生物學特性比如精子數量、活動能力、精子頂體功能、精子形態以及DNA碎片等都會受到一定的影響[5,6]。Mantas等[7]利用TUNEL法檢測精子DNA碎片率時候發現，精子DNA碎片指數高的患者，其精子核的成熟度顯著低于對照組。Piomboni等[8]通過透射電子顯微鏡將精子的核放大到數萬倍后發現，發育差的精子，其核內染色質的致密程度顯著低于發育良好的精子。因此，精子的核成熟程度對于精子的生物學特性有著一定的影響。Bareh等[9]發現精子的DNA碎片數量與不明原因復發性流產密切相關，它是導致女性復發性流產的一個重要因素。劉瑜等[10]在孕早期自發性流產與胚胎停育男性因素的病例對照研究中發現，精子的核成熟程度是影響女性早期自發性流產與胚胎停育的一個重要因素，在對女性妊娠結局的預測和評估時，建議檢測男方的精子核成熟度，以了解男方精子的DNA損傷情況。我們通過對比研究也發現，108例研究對象的妊娠配偶，在排除了女方年齡、BMI等干擾因素后，正常生育組與異常妊娠組在精子濃度、前向運動精子百分率、正常形態精子百分率等方面都沒有差異，但異常妊娠組的精子核成熟度卻顯著低于正常生育組，這可能是導致異常妊娠組胚胎發育不良的一個因素，值得我們作進一步大量本、多中心的觀察和研究。Soderlund等[11]研究表明，精子核成熟度低的男性精子在與卵子結合形成受精卵后，仍然會干擾受精卵的著床和早期發育。Henkel等[12]發現，精子核成熟度甚至會影響囊胚期的胚胎發育，而導致囊胚停育。白文俊等[13]在重視妊娠失敗中的男性因素評估中表明，男性精子核成熟度對于妊娠失敗的影響不可忽視。杜江平等[14]應用枸杞子、淫羊藿聯合維生素C、維生素E和精氨酸對少弱畸形精子癥綜合治療后發現，精子染色質結構得到明顯改善，精子核成熟度有顯著提高。王霞等[15]應用尿卵泡刺激素聯合人絨毛膜促性腺激素治療也能夠使精子核成熟度增加。我們通過雙變量相關分析表明，精子核成熟度與妊娠結局呈正相關（r=0.413,P=0.000），因此，在評估和預測女方妊娠結局時，我們也建議有必要了解和分析男方精子核成熟度的高低，當發現男方精子核成熟度偏低的狀態下配偶出現意外或者計劃懷孕時，有必要進行適當的保胎治療，以保障胚胎發育的質量。育齡期男性在備育前最好進行精子核成熟度的檢測，當發現精子核成熟度低下，可以應用抗氧化劑、中醫中藥等有效手段進行改善，以保證配偶受孕后胚胎的優質。

參考文獻

2鄧天勤,鄧敏芝,,等.精子核成熟度與早期不明原因復發性流產的相關性研究.中國性科學2017;26(5):116-118

5熊承良,商學軍,劉繼紅,主編.人類精子學.北京:人民衛生出版社,2013:68

6谷龍杰,陳振文.人類精子核成熟度檢測及其臨床意義.國際生殖健康/計劃生育雜志2008;27(4):224-227

10劉瑜,陳曉蘭,陳小蔓,等.孕早期自發性流產與胚胎停育男性因素病例對照研究.中國男科學雜志2010;24(7):21-25

13白文俊,耿沖.重視妊娠失敗中的男性因素評估.中國男科學雜志2014;28(1):3-8

14杜江平,楊書文,門金娥,等.少弱畸精子綜合征治療前后精子染色質流式細胞術分析.中華男科學雜志2008;14(4):334-337

15王霞,杜江平,李艷,等.尿卵泡刺激素聯合人絨毛膜促性腺素治療少弱畸精子綜合征療效觀察.生殖醫學雜志2008;17(5):376-377

作者：陳亮 林永鍇 張曉艷 王英 劉晃 劉興章 單位：南方醫科大學附屬東莞廣濟醫院