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摘要：

目的：分析發用化妝品的微生物檢驗方式的適用性。方法：根據微生物限度的檢查法對7件不同品牌發用化妝品實施致病菌的檢測與菌落計數，同時行方法學的驗證。結果：傾注法下7種發用化妝品中通過1：10供試液，應用孟加拉紅的培養基與含5％聚山梨酯80、0．5％卵磷脂孟加拉紅培養基的方法檢驗得出，黑曲霉以及白色念珠菌回收率為0；在1∶100供試液下，應用薄膜過濾方法，所有發用化妝品大腸埃希菌回收率都超過了70％，但是金黃色葡萄球菌以及枯草芽孢桿菌回收率均在70％以下，無法徹底消除抑菌的作用。結論：在發用化妝品進行微生物檢驗時，應盡量降低銅綠假單胞菌的試驗結果中假陰性可能性，而糞大腸菌群與金黃色葡萄球菌檢測方法還需要改進。

關鍵詞：

發用類化妝品；微生物檢驗；適用性

化妝品主要包含蒸發用品、洗發用品與護發用品等，其包含成分多種多樣，極易引起變質。一些產家為了防止化妝品變質，常常會添加一些防腐劑，這就加大了微生物的檢驗過程假陰性可能性。本文主要分析發用化妝品的微生物檢驗方式的適用性，具體如下：

1材料以及方法

1．1實驗的對象：A－去屑洗的發露、B－去屑的洗發露、C－絲質順滑類去屑的洗發露、D－清屑舒潤與調理的洗發露、E－新活炫亮類去屑柔亮的洗發乳、F－去油凈屑的洗發露、G－蘆薈止癢滋潤的洗發露。

1．2儀器、菌株和試劑。菌株：大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉。試劑：孟加拉的紅培養基、聚山梨酯80以及卵磷脂吐溫－80的營養瓊脂培養基；大豆的卵磷脂與硝酸纖維的薄膜。儀器：生物的安全柜、潔凈的工作臺、生化的培養箱、保溫的震蕩儀、微波爐與滅菌鍋。

1．3實驗的方法

1．3．1傾注方法。菌液組：取1毫升已配置菌液，注入到平皿之中，再加入適量培養基，對菌液中菌落數進行測定。樣品的對照組：取不同的稀釋級別下（1∶10，1∶100，1∶1000）1毫升供試液注進平皿中，然后孟加拉紅的培養基、卵磷脂或者是吐溫80－的營養瓊脂培養基，對樣品本底菌落數進行測定。觀察組：取不同的稀釋級別下1毫升供試液以及1毫升已配置菌液，分別放入同一個平皿中，再添加培養基，對菌落數進行測定。

1．3．2薄膜的過濾法。菌液組：取1毫升已配置菌液，注入到平皿中，添加培養基，對菌液中菌落數進行測定。實驗組：取1毫升供試液，加到100毫升0．9％無菌的NaCl溶液中進行過濾，把0．9％無菌的NaCl溶液當做沖洗液，進行三次沖洗，每一次100毫升，最后一次要在沖洗液中添加1毫升試驗的菌菌液，待過濾后將濾膜取出，把濾膜的沖洗面向上貼于卵磷脂吐溫－80的營養瓊脂板上，對樣品本底菌落數進行測定。樣品的對照組：取1毫升供試液，和實驗組方法一致，不添加試驗菌，通過薄膜過濾方法來測定本底的菌落數。

2結果

2．1傾注法下各培養基對于真菌的回收率影響：7中發用化妝品中通過1∶10供試液，考察了應用孟加拉紅的培養基與含5％聚山梨酯80、0．5％卵磷脂孟加拉紅培養基方法的適用性，得出黑曲霉以及白色念珠菌回收率為0；把1∶100供試液作為最低的稀釋級，應用孟加拉紅的培養基，僅有一份檢品黑曲霉的回收率達到77％，其他結果不理想。

2．2考察薄膜過濾方法對于細菌計數方法的適用性：在1∶1000供試液下，應用薄膜過濾方法，七件發用化妝品3株試驗的菌株回收率均超過70％，和傾注法結果比較，沒有明顯差異；在1∶100供試液下，應用薄膜過濾方法，所有發用化妝品大腸埃希菌回收率都超過了70％，但是金黃色葡萄球菌以及枯草芽孢桿菌回收率均在70％以下，無法徹底消除抑菌的作用。

3討論

從結果總可以發現，發用化妝品對于微生物抑菌作用比較明顯，使用薄膜過濾方法，七種發用化妝品試驗細菌菌株回收率到超過了70％，但由于操作復雜性，不建議使用。而在酵母菌與霉菌檢測過程中，把1∶10供試液以及1∶100供試液作為最低的稀釋級時，全部化妝品中黑曲霉與白色念珠菌回收率都是0，但是在1∶100供試液下，通過添加5％聚山梨酯80、0．5％卵磷脂孟加拉紅培養基，發現除C－絲質順滑去屑洗發露中黑曲霉的回收率達到52％外，其他化妝品試驗菌株回收率到超過了相關標準的要求，而且5％聚山梨酯80、0．5％大豆卵磷脂對于試驗菌株生長沒有影響，和朱世真［2］報道一致。

綜上所述，在發用化妝品的微生物檢驗過程中，應盡量降低銅綠假單胞菌的試驗結果中假陰性可能性，而糞大腸菌群與金黃色葡萄球菌檢測方法還需要改進。

參考文獻

［1］劉廣楨，徐曉潔，王德利．分析我國現行化妝品微生物檢驗方法存在的問題和改進建議［J］．食品與藥品，2013，14（03）：24－27．

［2］朱世真，王立芳，王尊文．大腸菌群測試片在化妝品微生物檢測中的應用［J］．中國藥師，2014，15（09）：79－83

作者：孫勝平 王群林 單位：湖北省漢川市疾病預防控制中心