前言:我們精心挑選了數(shù)篇優(yōu)質(zhì)檢測(cè)畢業(yè)論文文章,供您閱讀參考。期待這些文章能為您帶來啟發(fā),助您在寫作的道路上更上一層樓。
各院系:
為貫徹落實(shí)教育部《學(xué)位論文作假行為處理辦法》(教育部令第 34 號(hào))、《教育部關(guān)于印發(fā)<本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))抽檢辦法(試行)的通知>》(教督[2020]5號(hào))等文件精神,進(jìn)一步提高我校畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))質(zhì)量,規(guī)范管理,科學(xué)引用文獻(xiàn)資料,杜絕畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))教學(xué)過程中學(xué)術(shù)不端現(xiàn)象的發(fā)生,學(xué)校決定對(duì)部分 2021 屆本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì)),采用“中國知網(wǎng)”大學(xué)生系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)。
現(xiàn)就有關(guān)事項(xiàng)通知如下:
一、檢測(cè)范圍
按照2021屆本科畢業(yè)生人數(shù)的5%抽檢畢業(yè)論文(設(shè)計(jì)),覆蓋全部本科專業(yè)。具體抽測(cè)學(xué)生名單由教務(wù)處按學(xué)生學(xué)號(hào)統(tǒng)一抽取(見附件1)。
二、檢測(cè)方式與要求 1、待檢測(cè)論文(設(shè)計(jì))的格式應(yīng)符合我校本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))
撰寫要求,學(xué)生以 word 文檔形式提交畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))全文電子版。
每篇論文電子版文件名命名格式為“學(xué)生姓名_學(xué)號(hào)_ 論文名稱.doc”,例如“張三_117XXXXXXX_XXX.doc”。
2、各院系將被檢測(cè)的畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))全文電子版報(bào)送教務(wù)處,教務(wù)處在三個(gè)工作日內(nèi)將檢測(cè)報(bào)告反饋給院系本科教學(xué)辦公室,并由本科教學(xué)辦公室反饋給學(xué)生。
三、相關(guān)工作安排
1、4月30日(周五)前,各院系將本單位本科生畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))重復(fù)率具體要求報(bào)教務(wù)處備案。
2、5月6日(周四)前,各院系將抽取的畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))全文電子版、附件1(補(bǔ)充論文題目)提交到教務(wù)處。
3、重復(fù)率檢測(cè)結(jié)果僅作為評(píng)判畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))是否出現(xiàn)學(xué)術(shù)不端行為的參考依據(jù)。畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))文字復(fù)制率超過本院系要求的、需經(jīng)修改再次進(jìn)行重復(fù)率檢測(cè)。
4、如對(duì)檢測(cè)結(jié)果有異議,由院系畢業(yè)論文工作領(lǐng)導(dǎo)小組報(bào)學(xué)校教學(xué)指導(dǎo)委員會(huì)最終審議。
5、教務(wù)處將重復(fù)率檢測(cè)結(jié)果通報(bào)各院系,對(duì)于重復(fù)率較高的專業(yè)予以重點(diǎn)關(guān)注并加大下一年的抽檢比例。
希望各院系廣大師生遵循學(xué)術(shù)研究的基本規(guī)范,進(jìn)一步加強(qiáng)畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))管理,共同維護(hù)我校本科教學(xué)良好聲譽(yù),促進(jìn)學(xué)生畢業(yè)設(shè)計(jì)(論文)質(zhì)量不斷提高。
摘要:目的:探討NFκBp65在血管瘤發(fā)生、發(fā)展及退化過程中的表達(dá)狀況及其意義。方法:采用免疫組織化學(xué)方法(SP法)和原位雜交的方法,檢測(cè)人皮膚血管瘤增生期、退化期及正常皮膚組織及內(nèi)皮中NFκBp65的表達(dá)水平,并利用計(jì)算機(jī)圖像分析技術(shù)測(cè)量不同時(shí)期血管瘤組織和正常皮膚組織NFκBp65表達(dá)的平均光密度和平均陽性面積。結(jié)果:增生期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞NFκBp65表達(dá)水平高于退化期,差異有顯著性(P<0.01);退化期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞NFκBp65表達(dá)水平與正常皮膚組織相比,差異無顯著性(P>0.05)。結(jié)論:NFκBp65可能通過調(diào)控血管生成因子的表達(dá)而促進(jìn)血管瘤的形成。
關(guān)鍵詞:血管瘤;核轉(zhuǎn)錄因子;
血管生成因子皮膚血管瘤是嬰幼兒常見的良性腫瘤,是以毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增生為主要特征。在血管瘤發(fā)生和發(fā)展的過程中,血管生成被公認(rèn)為是其關(guān)鍵環(huán)節(jié)。在眾多血管生成因子中,已證明TGFβ、TNFα、IL1α、IL8、ICAM1等含有NFκB的特異性結(jié)合位點(diǎn),其表達(dá)受NFκB的調(diào)控,而這其中的一些因子,例如TGFβ、ICAM1等,已被證實(shí)與血管瘤的病理演變過程有關(guān)。為此我們應(yīng)用免疫組織化學(xué)和原位雜交的方法檢測(cè)了同時(shí)期人皮膚血管瘤組織中以及正常皮膚組織中NFκBp65蛋白的表達(dá),以探討NFκBp65在血管瘤發(fā)生、發(fā)展過程中的作用機(jī)制。
1材料與方法
11材料
111材料來源收集武漢大學(xué)人民醫(yī)院病理科1996~2001年皮膚血管瘤存檔蠟塊49例。其中男性26例,女性23例;最小年齡2月,最大年齡68歲,平均年齡30.3歲。這些血管瘤所在的部位有頭皮、前額、眼瞼、耳背、頸部、背部、上臂、大腿、手和足的皮膚等。患者術(shù)前均未做任何輔治療。
112材料分組蠟塊切片厚5μm,常規(guī)HE染色和免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)增殖細(xì)胞核抗原(PCNA,proliferatingcellnuclearantigen),按Mulliken分類標(biāo)準(zhǔn)并結(jié)合PCNA的表達(dá)進(jìn)行分組。增生期血管瘤27例,退化期血管瘤22例,另取瘤組織周圍正常皮膚組織5例作對(duì)照。
12試劑與儀器
121主要試劑NFκBp65mRNA原位雜交檢測(cè)試劑盒;濃縮型鼠抗人NFκBp65單克隆抗體;即用型鼠抗人PCNA單克隆抗體;即用型兔抗人第Ⅷ因子相關(guān)抗原單克隆抗體;即用型SP通用型免疫組織化學(xué)試劑盒;DAB顯色試劑盒及多聚賴氨酸。
122主要儀器YWY781型醫(yī)用微波儀(250W,50Hz);家用高壓鍋。
13方法
131常規(guī)HE染色。
132免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)PCNA和第Ⅷ因子相關(guān)抗原及NFκBp65主要步驟:5μm組織切片常規(guī)脫蠟至水,3%過氧化氫處理10min以抑制內(nèi)源性過氧化物酶活性,PCNA、NFκBp65采用高壓抗原修復(fù),第Ⅷ因子相關(guān)抗原采用胃酶消化修復(fù)抗原,正常羊血清處理10min以減少非特異性背景,一抗(NFκB,1:200)37℃孵育1h,生物素標(biāo)記的二抗處理10min,鏈霉菌抗生物素蛋白過氧化物酶復(fù)合物處理10min,DAB顯色液顯色,自來水沖洗終止反應(yīng),蘇木精復(fù)染,脫水,透明,封片。用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照組,作為NFκBp65的陽性對(duì)照組,人正常皮膚組織中的血管內(nèi)皮細(xì)胞作為PCNA的陽性對(duì)照組。
133原位雜交檢測(cè)NFκBp65mRNA的表達(dá)主要步驟:組織切片常規(guī)脫蠟至水,3%H2O2室溫處理10min以滅活內(nèi)源性過氧化物酶。切片上滴加胃蛋白酶,37℃消化25min。按每張切片加20μl含寡核苷酸探針的原位雜交液,37℃恒溫過夜進(jìn)行雜交。洗脫后滴加封閉液37℃,20min。滴加SAHRP37℃處理20min。DAB顯色,蘇木精復(fù)染,脫水,透明,封片。用PBS代替含寡核苷酸探針的原位雜交液作為陰性對(duì)照組,人扁桃體作為陽性對(duì)照組。
14結(jié)果判斷
141PCNA和第Ⅷ因子相關(guān)抗原免疫組織化學(xué)結(jié)果判斷PCNA以細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應(yīng),第Ⅷ因子相關(guān)抗原以胞膜或胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應(yīng),陰性對(duì)照組除細(xì)胞核染成藍(lán)外,應(yīng)無棕黃色反應(yīng)物。
142NFκBp65免疫組織化學(xué)結(jié)果判斷NFκBp65以胞核和胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應(yīng),陰性對(duì)照組除細(xì)胞核染成藍(lán)外,應(yīng)無棕黃色反應(yīng)物。采用HPIAS1000高清晰度彩色病理圖文報(bào)告管理系統(tǒng)對(duì)NFκBp65mRNA的表達(dá)進(jìn)行定量分析,每張切片隨機(jī)選取5個(gè)高倍鏡視野(×400),測(cè)定每個(gè)視野下陽性反應(yīng)的平均光密度、陽性反應(yīng)面積和所有細(xì)胞總面積,計(jì)算陽性面積率。以每例5個(gè)視野的平均光密度、陽性面積率的平均值作為該例的測(cè)量值。
143NFκBp65mRNA原位雜交檢測(cè)結(jié)果判斷細(xì)胞膜或胞漿呈藍(lán)色為NFκBp65mRNA陽性,陰性對(duì)照組除細(xì)胞核染成藍(lán)色外,應(yīng)無藍(lán)色反應(yīng)物。定量分析方法同上。
15統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
對(duì)各組NFκBp65免疫組織化學(xué)及原位雜交化學(xué)反應(yīng)陽性顆粒的平均光密度、陽性面積率作單因素方差分析和q檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α為0.05。
2結(jié)果
21HE染色
增生期血管瘤組織中可見條索狀或片狀內(nèi)皮細(xì)胞增生,其間有不規(guī)則的內(nèi)皮間隙和完整的血管腔,內(nèi)皮細(xì)胞核肥大而淡染。退化期血管瘤組織中可見內(nèi)皮細(xì)胞減少,血管腔增大,血管間結(jié)締組織增多,內(nèi)皮細(xì)胞核扁平。
22PCNA的表達(dá)
增生期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞核肥大,核內(nèi)彌漫分布棕黃色顆粒,PCNA表達(dá)強(qiáng);退化期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞核扁平,大多數(shù)細(xì)胞核被蘇木精染成藍(lán)色,少數(shù)胞核內(nèi)有少量棕黃色顆粒,PCNA弱表達(dá)。
23第Ⅷ因子相關(guān)抗原的表達(dá)
增生期和退化期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞胞漿內(nèi)彌漫分布棕黃色顆粒。
24NFκBp65的表達(dá)
增生期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞胞漿和部分內(nèi)皮細(xì)胞胞核內(nèi)有較多棕黃色顆粒,NFκBp65表達(dá)強(qiáng);退化期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞胞漿內(nèi)有少許或無棕黃色顆粒沉積,胞核內(nèi)無棕黃色顆粒沉積,NFκBp65表達(dá)極弱或無表達(dá);正常皮膚組織血管內(nèi)皮細(xì)胞胞漿內(nèi)有少許或無棕黃色顆粒沉積,胞核內(nèi)無棕黃色顆粒沉積,NFκBp65表達(dá)極弱或無表達(dá)。經(jīng)單因素方差分析,各組間的差異有顯著性意義(P<0.05)。經(jīng)q檢驗(yàn),增生期組與退化期組、增生期組與正常皮膚組之間平均光密度及陽性面積率的差異有顯著性意義(P<0.01);退化期組與正常皮膚組之間平均光密度及陽性面積率的差異無顯著性意義(P>0.05)。見表1。表1血管瘤不同時(shí)期NFκBp65表達(dá)的平均光密度和陽性面積率
25原位雜交檢測(cè)NFκBp65mRNA的表達(dá)
增生期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞胞膜和胞漿有較密集藍(lán)色顆粒;退化期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞胞膜和胞漿內(nèi)無藍(lán)色顆粒沉積;正常皮膚組織血管內(nèi)皮細(xì)胞胞膜和胞漿無藍(lán)色顆粒沉積。圖像分析結(jié)果顯示:增生期血管瘤NFκBp65mRNA表達(dá)的平均光密度為0.1563化期血管瘤表達(dá)NFκBp65mRNA的平均光密度為0.0617,正常皮膚組織NFκBp65mRNA表達(dá)的平均光密度為0.0516;增生期血管瘤表達(dá)的NFκBp65mRNA陽性面積率為0.2881,退化期血管瘤NFκBp65mRNA表達(dá)的陽性面積率為0.1250,正常皮膚組織NFκBp65mRNA表達(dá)的陽性面積率為0.1289。經(jīng)單因素方差分析,增生期組與退化期組,正常皮膚組與增生期組的差異有顯著性意義(P<0.05)。經(jīng)q檢驗(yàn),退化期組與增生期組、增生期組與正常皮膚組之間平均光密度及陽性面積率的差異有顯著性意義(P<0.05)。退化期組與正常皮膚組差異無顯著性意義。見表2。表2血管瘤不同時(shí)期NFκBp65mRNA表達(dá)的平均光密度和陽性面積
3討論
血管瘤是一種良性腫瘤,內(nèi)皮細(xì)胞過度增殖和凋亡、血管迅速生長是血管瘤病理組織學(xué)的最大特點(diǎn)。近年來研究表明[1~2],血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和血管形成(angiogenesis)在血管瘤病理演變過程中起重要作用。體外組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)血管瘤的血管內(nèi)皮細(xì)胞比正常組織內(nèi)的血管內(nèi)皮細(xì)胞更易生長,還能攝取3H胸苷,并可見到血管形成現(xiàn)象,提示血管瘤是一種血管形成性疾病[3]。目前,有關(guān)血管瘤形成過程中血管內(nèi)皮細(xì)胞過度增殖的研究報(bào)道較少。核轉(zhuǎn)錄因子NFκB是1986年由美國麻省理工學(xué)院癌癥研究中心的Baltimore和麻省Whitehead生物醫(yī)學(xué)研究所的Sen[4]在成熟B細(xì)胞和漿細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的這種能與免疫球蛋白κ輕鏈輕鏈基因的增強(qiáng)子κB序列(5''''GGGACTTTCC3'''')特異結(jié)合蛋白,并能促進(jìn)κ輕鏈基因的表達(dá),并將其命名為NFκB(NuclearfactorofkappaB)。后來的研究發(fā)現(xiàn),NFκB是由各種同源和異源NFκB/Rel蛋白質(zhì)亞基組成的二聚體,正常情況下,NFκB/Rel二聚體與抑制性蛋白質(zhì)IκB的亞基結(jié)合形成三聚體,以無活性形式存在于胞漿內(nèi)[5~7]。許多因素例如IL1、TNFα、LPS、病毒感染、雙鏈RNA和PKC的激活等均可活化NFκB,NFκB被活化后,IκB從NFκB復(fù)合體上脫落,IκB迅速被分解,活化的NFκB進(jìn)入細(xì)胞核,與細(xì)胞核內(nèi)特定的靶基因的結(jié)構(gòu)域結(jié)合,引起相應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄。
本實(shí)驗(yàn)采用免疫組織化學(xué)方法對(duì)NFκBp65在49例人血管瘤組織中的表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè),并結(jié)合PCNA的表達(dá)對(duì)血管瘤進(jìn)行比較準(zhǔn)確的分期。另外由于血管瘤組織中細(xì)胞成分較多,本實(shí)驗(yàn)通過檢測(cè)第Ⅷ因子相關(guān)抗原的表達(dá)證實(shí)了血管瘤組織中表達(dá)NFκBp65的細(xì)胞是內(nèi)皮細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,增生期血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞胞漿和胞核均有不同程度NFκBp65表達(dá),退化期血管瘤組織和正常皮膚組織中NFκBp65主要表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞胞漿中。而且增生期血管瘤NFκBp65表達(dá)水平高于退化期,差異有顯著性(P<0.01);退化期血管瘤NFκBp65表達(dá)水平與正常皮膚組織相比,差異無顯著性(P>0.05)。NFκBp65在血管瘤增生期的表達(dá)處于較高水平,而在血管瘤的退化期,NFκBp65的表達(dá)降低。國外有研究發(fā)現(xiàn),用NFκB反義核苷酸能夠抑制TNFα誘導(dǎo)的血管生成,同時(shí)能抑制TNFα介導(dǎo)的堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá),提示NFκB對(duì)bFGF和VEGF的表達(dá)也存在潛在的調(diào)節(jié)作用。故推測(cè),處于增生期的血管瘤組織中NFκBp65處于活化的狀態(tài),從而促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖以及血管瘤的形成。
參考文獻(xiàn)
1PollmanMJ,NaumovskiL,GibbonsGH,etal.Vascularcellapoptosis:celltypespecificmodulationbytransforminggrowthfactorbetalinendothelialcellversussmoothmusclecell.circulation,2001,91(15):2019
2JangYC,IsikFF,GibranNS.Nervedistributioninhemangiomasdependsontheproliferativestateofthemicrovasculature.JSurgRes,2000,93(1):144
3宋天寶,邱東.實(shí)用免疫組織化學(xué)技術(shù).第一版.陜西科學(xué)技術(shù)出版社,1994,241.
4SenR,BaltimoreD.Multiplenuclearinteractwiththeimmunoglobulinenhancersequences.Cell,1986,46:705716
5石纓.細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳遞與轉(zhuǎn)錄調(diào)控的研究進(jìn)展.國外醫(yī)學(xué).分子生物學(xué)分冊(cè),1997,19(5):201
【關(guān)鍵詞】血液粘度;檢測(cè);質(zhì)量控制
近年來,血液粘度的檢測(cè)在臨床上的應(yīng)用越來越廣泛,但由于血液流變影響因素的多樣性和復(fù)雜性,國內(nèi)至今沒有統(tǒng)一的質(zhì)量控制。根據(jù)筆者長期的工作經(jīng)驗(yàn),參考不同的儀器狀況和國內(nèi)外的相關(guān)文獻(xiàn),制定了血液粘度檢測(cè)的質(zhì)量控制。
1血液粘度計(jì)的選擇
血液粘度計(jì)應(yīng)選用切變率確定、流場(chǎng)均勻的儀器。在使用前,應(yīng)仔細(xì)了解說明書上所注明的儀器的準(zhǔn)確率、分辨率、重復(fù)性、溫度控制、測(cè)定時(shí)間等主要指標(biāo)。
準(zhǔn)確度:指所測(cè)數(shù)值與真值(給定)符合的程度。測(cè)定時(shí)建議以國家計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)油為標(biāo)準(zhǔn),在剪切率200s-1時(shí)測(cè)定低粘度油(2~3mPa·s),在剪切率1s-1時(shí),測(cè)定高粘度油(15~25mPa·s),一般應(yīng)測(cè)定5次以上,在低粘度值時(shí)測(cè)定值與真值的相對(duì)偏差應(yīng)小于5%,高粘度值時(shí)測(cè)定值與真值的相對(duì)偏差應(yīng)小于3%。
分辨率:在給定條件下,測(cè)定出同一物質(zhì)兩種狀態(tài)下的差異。取壓積在40%~50%范圍內(nèi)的正常人全血,以自身血漿調(diào)節(jié)壓積的變化。在高剪切率200s-1時(shí),儀器應(yīng)能分辨出壓積變化2%時(shí)的血液表觀粘度的差異,在低剪切率1s-1時(shí),儀器應(yīng)能分辨出壓積變化1%時(shí)的血液表觀粘度的差異。以上測(cè)量應(yīng)各測(cè)5次以上,取平均值。
重復(fù)性:指所測(cè)數(shù)值重復(fù)性程度。取同一血樣,壓積在40%~45%范圍內(nèi),按照儀器操作規(guī)程測(cè)量10次,在高剪切率200s-1時(shí),血液表觀粘度的變異系數(shù)應(yīng)小于2%;低剪切率1s-1時(shí),變異系數(shù)應(yīng)小于5%。
血樣用量應(yīng)根據(jù)儀器的樣品用量而定,并應(yīng)嚴(yán)格控制樣品計(jì)量的精度。樣品量的過多或過少都將對(duì)測(cè)量結(jié)果產(chǎn)生影響,同時(shí),標(biāo)本在吸入時(shí)不要產(chǎn)生氣泡。
為保證儀器的正常工作和精確性,要做好日常維護(hù)和定期保養(yǎng),并做好保養(yǎng)維護(hù)記錄。同時(shí)對(duì)儀器的準(zhǔn)確度、分辨率和重復(fù)性應(yīng)定期標(biāo)定。
2樣品采集
血液樣品的采集應(yīng)保持一致。采血時(shí)病人取坐位,清晨空腹安靜狀態(tài)下,采集肘前靜脈血。采血時(shí)應(yīng)盡量縮短壓脈帶的壓迫時(shí)間,針頭刺入血管后立即松開壓脈帶,安靜約5s后開始采血。最好用7號(hào)以上的針頭,采血過程中不宜過快。以避免過細(xì)的針頭對(duì)紅細(xì)胞產(chǎn)生一定的剪切力而破壞紅細(xì)胞。
3血樣防凝
血液需經(jīng)抗凝處理后才能用于測(cè)量,抗凝劑對(duì)血液流變特性的影響不可忽視。最好用肝素或EDTA抗凝。肝素抗凝濃度一般為每毫升全血用20~30國際單位,EDTA為每毫升全血3.4~4.8mmol/L。抗凝劑一般采用固相或液相抗凝劑。如用液相抗凝劑一般放在干燥玻璃管或玻璃瓶中,烘干后使用,烘干溫度一般不超過56℃。采血完畢后,先取下針頭,將血液沿管壁緩緩注入,輕輕搖勻,避免劇烈震動(dòng)造成溶血。同一批實(shí)驗(yàn)應(yīng)采用同一批號(hào)同種抗凝劑。
4血樣保存
血樣應(yīng)隨采隨測(cè)。一般采血后20min即可用于測(cè)量,并應(yīng)于采集后2h以內(nèi)完成流變學(xué)參數(shù)的測(cè)定。如需放置應(yīng)在室溫下(18~25℃)密封保存,不宜放入冰箱,存放時(shí)間以不超過4h為宜,否則將影響血液的生理狀態(tài)和流變特性。存放血在測(cè)量前要充分搖勻。
5血漿制備
以3000~3500轉(zhuǎn)/min(離心力為1500~2000g)離心30min,提取上層血漿測(cè)量血漿粘度。血漿為牛頓流體。
6紅細(xì)胞比積測(cè)量
常用文氏管。此法不但結(jié)果準(zhǔn)確,且可同時(shí)觀察紅細(xì)胞沉降率。將血樣加入,讀取完紅細(xì)胞沉降率后,以相對(duì)離心力2260g,離心30min,讀取紅細(xì)胞柱的高度(以紅細(xì)胞上層的黑線薄層為準(zhǔn))。
紅細(xì)胞壓積%=紅細(xì)胞柱的高度/全血高度×100
紅細(xì)胞壓積管必須清潔干燥,電源、電壓及離心機(jī)載重均可影響離心機(jī)的轉(zhuǎn)速,因此應(yīng)安裝穩(wěn)壓裝置和固定離心機(jī)的載重。
7測(cè)量溫度
血液粘度的測(cè)量應(yīng)在37±0.5℃下測(cè)量。不同溫度的測(cè)量結(jié)果之間不能比較。外界溫度高時(shí)還應(yīng)考慮液體蒸發(fā)等因素對(duì)其流變特性的影響。
8測(cè)量順序
對(duì)于剪切率可調(diào)的儀器在測(cè)量時(shí)應(yīng)考慮測(cè)量順序的影響。測(cè)量時(shí)應(yīng)采用一致的測(cè)量順序,從低剪切率開始逐漸增加或從高剪切力開始逐漸降低均可。但應(yīng)注意的是在低剪切率測(cè)量時(shí)隨著測(cè)量時(shí)間的增加,血樣中有形成分的沉降對(duì)測(cè)量結(jié)果的影響。兩種測(cè)量順序的結(jié)果不可互相比較。
每次測(cè)定時(shí),樣品池都應(yīng)清洗干燥,血樣及測(cè)量系統(tǒng)應(yīng)保持恒溫。加樣時(shí)不能有氣泡產(chǎn)生。
9測(cè)量報(bào)告
檢測(cè)報(bào)告中應(yīng)給出高剪切力200s-1、中剪切力50s-1、低剪切力1s-1下的血液表觀粘度值及血漿粘度(單位為mPa·s)、壓積、血沉、紅細(xì)胞的聚集性、變形性等指標(biāo)。直接測(cè)量數(shù)據(jù)和經(jīng)公式計(jì)算得到的數(shù)據(jù)應(yīng)區(qū)別列出,同時(shí)要注明測(cè)定的溫度、檢測(cè)日期及操作人員簽名。
10正常值
血液粘度是血液流變特性的主要參數(shù)。正常值具有相對(duì)性,沒有普遍適用的正常值。即使采用通用的儀器和標(biāo)準(zhǔn)操作也是如此[1]。各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)生物體的個(gè)體差異、地區(qū)差異、儀器差異等原因,建立自己的正常值。正常值應(yīng)按男女、年齡等合理分組。當(dāng)測(cè)定值與正常值之差(絕對(duì)值)大于2倍正常值標(biāo)準(zhǔn)差時(shí),可以認(rèn)為是血液粘度異常。