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《貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)雜志》2014年第四期

1材料與方法

1．1供試材料100份貴州地方油菜種質(zhì)資源，由貴州省油料研究所提供。其中，白菜型油菜品種55份，芥菜型油菜品種45份。菌核菌株是經(jīng)致病性鑒定篩選出的強(qiáng)致病純化菌株7－3［9］，由貴州省油料研究所實(shí)驗(yàn)室保存。根據(jù)我國(guó)油菜品種的抗病性鑒定要求，將油菜抗菌核病鑒定的對(duì)照品種定為中油821（CK），由中國(guó)油料研究所育成。

1．2試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)于2012年9月至2013年5月在貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料研究所試驗(yàn)地進(jìn)行。試驗(yàn)采用隨機(jī)區(qū)組排列，3次重復(fù)，每重復(fù)100個(gè)小區(qū)，每小區(qū)種植3行，每行8窩，行距40cm，窩距25cm。在花期進(jìn)行菌核病人工麥粒接種，每處理接種8～10株，每個(gè)品種共接種20～30株。油菜成熟期調(diào)查接種植株的發(fā)病程度，計(jì)算發(fā)病株率和病情指數(shù)。

1．3菌核接種貴州地方油菜種質(zhì)資源菌核病的抗（耐）性鑒定參照冉毅等［10］改進(jìn)的麥粒接種法。先將麥粒洗干凈，放入沸水中煮10～15min，再放入高溫滅菌鍋滅菌30min，后將滅菌麥粒均勻放入已滅菌的PDA平板培養(yǎng)基上，接種強(qiáng)致病性純化菌核菌株7－3，后將整個(gè)培養(yǎng)基置于25℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)4～5d，待整個(gè)培養(yǎng)基內(nèi)的麥粒均長(zhǎng)滿油菜菌核病菌絲后取出進(jìn)行油菜菌核病感染人工接種。接種時(shí)，將消毒大頭針插入長(zhǎng)滿菌絲的麥粒，用消毒小刀在接種油菜的莖稈上劃一條小口，將大頭針插入傷口（注意：將布滿菌絲的麥粒面與傷口接觸），然后用沾滿無(wú)菌水的棉球覆蓋住麥粒，用保鮮膜包裹好接種麥粒覆蓋有棉球的油菜莖稈，保鮮膜兩頭用膠布纏好，以防水分蒸發(fā)和保鮮膜脫落。最后用注射器將無(wú)菌水注入到棉球上，以達(dá)保濕效果。

1．4菌核病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)在油菜成熟期調(diào)查接種菌核病植株的感病情況，并將其劃分為5個(gè)等級(jí)［11］。1）0級(jí)。全株無(wú)病。2）1級(jí)。全株1／3以下分枝（含果軸，下同）發(fā)病或主莖有小型病斑；全株受害角果在1／4以下（含病害引起的非生理性早熟和不結(jié)實(shí)，下同）。3）2級(jí)。全株1／3～2／3分枝數(shù)發(fā)病，或1／3以下分枝發(fā)病而主莖中上部有大型病斑；全株受害角果為1／4～1／2。4）3級(jí)。全株2／3以上分枝發(fā)病，或2／3以下分枝發(fā)病而主莖中下部有大型病斑；全株受害角果為1／2～3／4。5）4級(jí)。全株絕大部分分枝發(fā)病，或多數(shù)主莖有病斑，或主莖下部有大型繞莖病斑；全株受害角果達(dá)3／4以上。

1．5抗性等級(jí)劃分用相對(duì)抗性指數(shù)（RRI）劃分油菜菌核病的感染等級(jí)。油菜菌核病的抗性等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)：RRI≤－1．2為高抗，RRI≤－0．7為中抗，RRI＜0為低抗，RRI≥0為低感，RRI≥0．9為中感，RRI＞0．9為中感，RRI＞2．0為高感，共7個(gè)等級(jí)。相對(duì)抗性指數(shù)RRI＝LN（100－DICK）／［DICK－LN（100－DI）／DI］式中，DICK為對(duì)照病情指數(shù)（對(duì)照為抗病性明確的中抗材料），DI為供試品種病情指數(shù)。1．6數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)用Excel2003進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。

2結(jié)果與分析

2．1抗（耐）菌核病鑒定由表可知，在鑒定的100份貴州地方油菜種質(zhì)材料中，有高抗材料共2份，占100份鑒定材料的2％；中抗材料4份，占4％；低抗材料12份，占12％；低感材料共60份，占60％；中感材料22份，占22％。其中，在鑒定的55份白菜型油菜種質(zhì)材料中，中感材料22份，占鑒定材料的40％；低感材料28份，占51．1％；低抗材料5份，占9．1％。在鑒定的45份芥菜型油菜種質(zhì)材料中，低感材料32份，占鑒定材料的71．1％；低抗材料7份，占15．6％；中抗材料4份，占8．9％，分別是安龍高油菜、畢節(jié)大黑油菜、鎮(zhèn)遠(yuǎn)花花油菜、晴隆苦油菜，其病情指數(shù)分別為33．3、32．7、36．1和33．3，相對(duì)抗性指數(shù)分別為－1．01、－1．04、－0．88和－1．01；高抗材料2份，占4．4％，分別是清鎮(zhèn)牛尾油菜（一）和黔西黃油菜，其病情指數(shù)分別為25．0和26．7，相對(duì)抗性指數(shù)分別為－1．32和－1．41，即鑒定的貴州白菜型油菜資源材料中，中抗以上材料為0；在芥菜型油菜中，中抗以上材料有6份，占45芥菜型油菜資源的13．3％。說(shuō)明，貴州白菜型油菜地方種質(zhì)對(duì)菌核病的整體抗性較差，而芥菜型油菜地方種質(zhì)對(duì)菌核病的整體抗（耐）性優(yōu)于白菜型油菜。

2．2抗性評(píng)價(jià)在鑒定的100份貴州地方油菜種質(zhì)資源中，清鎮(zhèn)牛尾油菜（一）和黔西黃油菜2個(gè)芥菜型油菜地方品種表現(xiàn)為高抗菌核病；安龍高油菜、畢節(jié)大黑油菜、鎮(zhèn)遠(yuǎn)花花油菜、晴隆苦油菜4個(gè)芥菜型油菜地方品種表現(xiàn)為中抗。在此6個(gè)芥菜型地方油菜種質(zhì)中，2個(gè)表現(xiàn)為高抗的地方種質(zhì)可直接作為芥菜型油菜抗病育種材料進(jìn)行利用，其農(nóng)藝性狀和產(chǎn)量表現(xiàn)較好的還可直接用于土壤較貧瘠的山地種植；4個(gè)表現(xiàn)中抗的地方種質(zhì)也可根據(jù)不同目標(biāo)改良某些性狀后直接應(yīng)用于育種或生產(chǎn)；其他抗性較差的材料，可根據(jù)其農(nóng)藝性狀表現(xiàn)或某些優(yōu)良特性等進(jìn)行選擇性改良利用或作為資源材料保存。從鑒定的100份貴州地方油菜資源材料的來(lái)源看，來(lái)源于同一地域的貴州地方油菜品種，其抗性不一定相同，如黔西黃油菜經(jīng)鑒定表現(xiàn)為高抗，而另外2個(gè)來(lái)源于黔西的黔西白花油菜和黔西川油菜（2）－2則表現(xiàn)為低感和低抗；來(lái)自榕江縣的白菜型油菜地方品種榕江油菜表現(xiàn)為中感，而榕江本地油菜則表現(xiàn)為低抗、榕江蘇州油菜表現(xiàn)為低感；來(lái)自赫章縣的赫章小白油菜表現(xiàn)為中感，而赫章油菜則表現(xiàn)為低感、新田野油菜為中感。說(shuō)明，貴州地方油菜種質(zhì)資源具有豐富的遺傳多樣性，為油菜育種尋找高抗資源打下了基礎(chǔ)。

3結(jié)論與討論

1）試驗(yàn)選取來(lái)源于不同地域的100份貴州地方油菜種質(zhì)資源為材料，通過(guò)人工麥粒接種法鑒定其抗（耐）菌核病能力的結(jié)果顯示，100份地方油菜種質(zhì)資源材料中，清鎮(zhèn)牛尾油菜（一）、黔西黃油菜2個(gè)芥菜型油菜種質(zhì)表現(xiàn)為高抗油菜菌核病；安龍高油菜、畢節(jié)大黑油菜、鎮(zhèn)遠(yuǎn)花花油菜、晴隆苦油菜4個(gè)芥菜型油菜表現(xiàn)為中抗油菜菌核病，高抗和中抗種質(zhì)資源均可直接或間接作為選育抗（耐）芥菜型油菜菌核病的資源材料進(jìn)行利用。2）經(jīng)鑒定100份貴州地方油菜種質(zhì)資源中，高抗菌核病的材料有2份（均為芥菜型油菜），占100份鑒定材料的2％，分別是清鎮(zhèn)牛尾油菜（一）和黔西黃油菜，其病情指數(shù)分別為25．0和26．7，相對(duì)抗性指數(shù)分別為－1．32和－1．41；中抗材料4份（均為芥菜型油菜），占8．9％，分別是安龍高油菜、畢節(jié)大黑油菜、鎮(zhèn)遠(yuǎn)花花油菜、晴隆苦油菜，其病情指數(shù)分別為33．3、32．7、36．1和33．3，相對(duì)抗性指數(shù)分別為－1．01、－1．04、－0．88和－1．01。說(shuō)明，貴州白菜型地方油菜種質(zhì)資源對(duì)油菜菌核病的整體抗性較較弱，但芥菜型地方油菜種質(zhì)資源抗（耐）菌核病的能力優(yōu)于白菜型油菜。3）經(jīng)鑒定在55份白菜型油菜種質(zhì)資源中高抗（耐）材料為0，感病（中感、低感）材料50份，占整個(gè)白菜型油菜種質(zhì)的91％，低抗材料5份，僅占9．1％；在45份芥菜型油菜資源中，低感材料占參試芥菜型油菜的71．1％，抗病（低抗、中抗、高抗）材料占28．9％。說(shuō)明，芥菜型油菜整體抗耐菌核病的能力優(yōu)于白菜型油菜，在芥菜型油菜資源材料中獲得高抗（耐）材料的幾率較大。

作者：王璐璐單位：貴州省油料研究所