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1CE在臨床檢驗醫學的應用

1.1血清蛋白質分析

血清蛋白電泳通常是臨床上在無論何種原因引起的血液沉降率增加時都需要進行的常規實驗檢測項目，它將有助于確診臨床報告的炎癥或感染的狀況及提示進一步檢測其他項目。采用CE可分離血清蛋白，并能準確計算各蛋白質的相對濃度，避免了凝膠電泳法染色、脫色過程中多種影響因素造成的誤差，CE法的結果重復性好，可信度高［11］。前清蛋白在血清中的濃度可表明營養狀態，且是確定惡性腫瘤、炎癥、肝硬化、霍奇金病的重要指標，多數電泳法難以分辨，而用CE法很容易分離定量，檢測波長為214或200nm。CE不僅增加了清蛋白部分的分辯率，對雙清蛋白血癥檢測的靈敏度也有了很大的提高。CE提供了足夠的在α1區的分辯率以區分α1酸性糖蛋白與α1抗胰蛋白酶。在α2區的球蛋白區，α2巨球蛋白與觸球蛋白不易區分，但在β-球蛋白區具有高分辯率［12］。CE法對腎病、慢性感染、自身免疫病和肝硬化等多種疾病的免疫球蛋白分析有較好的優勢。

1.2單克隆免疫球蛋白的特征鑒別

單克隆免疫球蛋白是一種過度合成的單一類型或亞型的異常免疫球蛋白。它的產生是由于單一克隆的惡性或高致敏B細胞的無限增殖，從而產生同源性的單克隆免疫球蛋白。單克隆免疫球蛋白組分的檢測運用了各種與免疫學、血液學和生物化學等領域相關的技術和儀器。通過用特異性抗體包被的瓊脂糖凝膠球消除一個特殊的峰來指示是哪種單克隆成分，借此對免疫球蛋白的型、亞型和輕鏈型予以鑒定和分類［13］。這一技術提高了對該蛋白組分的分析與研究水平。

1.3血紅蛋白成分的分析

在地貧高發區檢測出地貧高風險夫婦和預防地貧患兒出生是關系到提高我國出生人口素質和實現優生優育工作的一個重要任務。其中血紅蛋白(Hb)電泳是研究和分離異常血紅蛋白的有效方法，亦是診斷血紅蛋白分子病和地貧不可缺少的手段之一［15］。毛細管電泳法是在充滿電泳液的石英毛細管中進行電泳的技術，在溶血試劑中進行稀釋的紅細胞樣品，會被注射到毛細管的負極端，在高壓電的作用下競相電泳分離，然后Hb會被靠近正極端的415nm光波檢測裝置檢測到［16］。通過毛細管電泳將蛋白質分離，采用波長為200nm氘光源和CCD探測器，對血紅蛋白成分分析靈敏度和分辨率高［17］。CE是一種敏感度和精確度較高的分析方法，具有操作簡便、檢測時間短的優點［18］。通過使用堿性pH緩沖液，正常和異常(或變異體)血紅蛋白按下列順序檢測出來，從陰極到陽極依次為:δA''''2(A2變異體)，C，A2/O-阿拉伯血紅蛋白(O-Arab)，E，S，D，G費城血紅蛋白(G-Philadelphia)，F，A，Hope，Bart，J，N-巴爾的摩血紅蛋白(N-Baltimore)和H。在CE區帶中不出現碳酸酐酶，不但可以鑒別出HbA2變異體，還能夠準確檢測HbA、HbF、HbA2含量以及其他異常血紅蛋白，可用于診斷地中海貧血及其他血紅蛋白病［19］。

1.4尿蛋白質分析

臨床醫生和生物學家關注的尿蛋白檢查的概念正在逐步更新。蛋白尿的分析得益于近年來重要的方法學的進步，特別是根據分子量和所帶電荷來分離蛋白質的電泳技術。當今的生物學技術主要應用電泳方法來檢測游離輕鏈，并用免疫學技術來分析它們的特性。免疫游離輕鏈是腎臟損害的直接原因，最常見的是腎小管性或系統性。這一毒性的出現可以是在尿中顯現沉淀，也可以在間質中沉積。在過去的幾年里，有關免疫球蛋白輕鏈毒性因素方面的認識已有了很大的進展。電泳異常條帶位于β或γ區的病例中有三分之二的情況存在本周氏蛋白。一條或多個條帶是根據尿液中單克隆免疫球蛋白存在與否進行識別，并且與典型的腎損傷或腎功能不全相關［20］。游離輕鏈常常沉積在腎小管中，導致腎小管中毒。由于蛋白尿定量與腎臟損害相關，形成蛋白尿的特定蛋白性質就反映了腎單位病變所在的位置和腎功能異常的發病機理。尿中特定蛋白的分析可以認為是如同一個真正的生化活檢，它可即刻提供腎單位內部的狀況［21］。

1.5肌紅蛋白分析

肌紅蛋白異常增高常在急性心梗后患者的血液和尿液中出現，而免疫比濁法難以測定低濃度的肌紅蛋白。但是，CE可在8min內快速分離尿中低濃度肌紅蛋白并與血紅蛋白相鑒別。

1.6脂蛋白分析

CE可將血漿脂蛋白分離出14個亞組分，如在分離緩沖液中加入表面活性劑，可在短時間內對2個主要組分:高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)進行定量，對LDL進一步分離為3個亞組分:LDL、中密度脂蛋白(IDL)和極低密度脂蛋白(VLDL)，并對各組分的比例進行推算，從而對脂蛋白異常提供不同脂肪代謝的信息。

1.7糖化血紅蛋白(HbA1c)分析

血紅細胞中的血紅蛋白糖基化部分即為糖化血紅蛋白(HbA1c)。HbA1c的水平與測定前數周內的血糖水平呈正線性相關，因此對糖尿病患者測定糖化血紅蛋白可了解過去一段較長時間內的血糖水平。此測定并不能作為糖尿病的診斷，但可用于作為控制血糖的指標，糖化血紅蛋白的量還可作為評價各種治療措施效果的標準。應用CE進行HbA1c電泳能分離幾種糖蛋白的糖基構型，可鑒別糖化血紅蛋白A1、A1c和其他異構體，對糖尿病的監控具有重要意義。

1.8同工酶的分離

應用CE技術對多種同工酶進行了成功的分離。其方法是先使用CE法分離樣品形成同工酶區帶后，切斷電源，并加入含底物的緩沖液，酶催化底物顯色，進一步形成可被檢測區帶，又接通電源，再次電泳，使被檢測的同工酶染色區帶先后通過檢測器，測定最大吸收峰值即測定和分析被分離的同工酶。如檢測淀粉酶P(胰)和S(唾液)型等，均可采用HPCE技術分離其同工酶。

1.9免疫復合物分析

CE可將免疫復合物從結合的抗原抗體中迅速分離出來，應用熒光標記單克隆抗體，經LIF-CE檢測，檢測限可達毫克級，可用于混合液體中低濃度的免疫復合物鑒定。

1.10DN段和染色體分析

CE分離DNA分子需多聚物交聯劑如聚丙烯酰胺、聚乙二醇、甲基纖維素等材料添加到緩沖液中作為分子篩，可對相差一個甚至幾個堿基DNA高效分離。有作者［22］應用CE做X連鎖隱性遺傳病研究，成功地對DNA限制片段進行了基因多態性分析。研究表明CE可用于分析拾攜帶者及胎兒產前診斷。

1.11在治療藥物監測中的應用

CE可簡便快速分析生物樣品中各種有形的藥物成分。在藥理學研究、法醫學檢查及臨床毒理等方面也有廣泛應用［23］。在糖尿病的治療監測中，可檢測血中格列本脲的濃度以防止藥物使用不當導致低血糖。

1.12其他小分子/離子的檢測

CE能在3～4min分離血和尿樣品中的血管造影劑含量、草酸鹽等弱陰離子，檢測尿樣中十幾種卟啉物質和維生素C異構體。在新生兒遺傳性有機酸尿癥篩查用CE可檢測到時多種有機酸標志物。

2展望

隨著CE技術在臨床檢驗醫學方面的廣泛應用，也必將帶來更多的挑戰，未來的CE技術在細胞和組織等復雜生物樣品體系中的臨床檢驗分析將成為主要的的發展趨勢。生物樣品分析必然要求進一步發展復雜樣品前處理富集技術和更靈敏的檢測技術。電泳方法的創新性研究主要體現在新分離模式的建立和電泳技術的聯用上，例如微乳液毛細管電動色譜(MEEKC)、親和毛細管電泳(ACE)和芯片毛細管電泳等;還有將分子信標技術與CE技術相結合進行可變長度寡聚核苷酸識別和基因檢測［24］;探索利用CE對PCR產物作DNA單鏈構象多態性分析篩查點突變等。近年來我國在電泳技術的臨床應用上有了迅猛發展，尤其是陣列毛細管電泳儀已經問世，這將克服目前大多數商品化毛細管電泳儀只能進行單根毛細管電泳的缺陷，這種高通量的新方法將會給后基因組時代的基因分析帶來革命性的變化。CE技術作為一種重要的分析手段，隨著它的快速發展，必將在臨床檢驗醫學方面有著更廣泛的應用前景并在各種分析分離領域發揮巨大的發展潛力。

作者：阮麗明周艷潔朱茂靈單位：廣西南寧市人口和計劃生育服務中心