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【摘要】目的確定復(fù)方芪麝片中青風(fēng)藤、防己藥味提取工藝。方法采用正交實驗法以粉防己堿和青藤堿含量為指標(biāo)，考察乙醇濃度、乙醇量、提取時間、提取次數(shù)4個因素對青風(fēng)藤等藥味提取工藝的影響。結(jié)果藥材以70%的乙醇為提取液，加醇量為藥材的14倍，提取3次，2h/次。結(jié)論該優(yōu)化工藝可行。

【關(guān)鍵詞】復(fù)方芪麝片；正交實驗；提取工藝；粉防己堿和青藤堿

復(fù)方芪麝片為主治氣虛血瘀兼痰濕阻絡(luò)型頸椎病的中藥復(fù)方制劑,由黃芪、麝香、青風(fēng)藤、川芎等中藥組成,具有益氣活血、化痰通絡(luò)、消腫止痛的作用，臨床效果較好。方中青風(fēng)藤為臣藥，防己為佐藥，其主要有效成分均為生物堿，即粉防己堿和青藤堿。現(xiàn)代藥理研究證實青藤堿具有抗炎、免疫抑制、鎮(zhèn)痛、降壓、抗心律失常等藥理作用［1,2］。易丹丹等［3］研究發(fā)現(xiàn)青藤堿凝膠對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎具有治療作用,且效果良好。粉防己堿具有廣譜抗炎作用,對局部和全身的多種急、慢性炎癥、免疫性炎癥、煙霧吸入性肺損傷、四氯化碳性肝損傷均有顯著的抑制作用，其抗炎作用是多方面的,對炎癥的各個環(huán)節(jié)均有不同程度的抑制作用［4,5］。此外粉防己堿還具有抗心肌缺血、抗腫瘤等作用［6,7］。根據(jù)方中兩藥味有效成分理化性質(zhì)的特征，本研究選擇乙醇作為提取溶劑，擬通過正交實驗對醇提工藝中乙醇濃度、乙醇用量、提取時間、提取次數(shù)這4個因素進(jìn)行考察，以粉防己堿和青藤堿含量為指標(biāo)成分篩選工藝條件。

1材料與儀器

防己購自上海養(yǎng)和堂藥材有限公司，經(jīng)上海中醫(yī)藥大學(xué)生藥教研室鑒定為防己科植物粉防己StephaniatetrandraS.Moore的干燥根。

青風(fēng)藤購自上海養(yǎng)和堂藥材有限公司，經(jīng)上海中醫(yī)藥大學(xué)生藥教研室鑒定為防己科植物青藤Sinomeniumacutum(Thunb.)Rehd.etWils.及毛青藤S.acutum(Thunb.)Rehd.etWils.var.CinerumRehd.etWils.的干燥藤莖。

粉防己堿、青藤堿對照品：含量測定用，由中國藥品生物制品檢定所提供。Agilent1100色譜工作站。

2方法與結(jié)果

2.1因素水平表根據(jù)文獻(xiàn)資料和預(yù)實驗結(jié)果，采用正交實驗法以乙醇濃度（A）、乙醇用量（B）、提取時間（C）、提取次數(shù)（D）為考察因素，各取3水平，具體因素水平見表1。表1提取工藝優(yōu)選水平（略）

2.2醇提實驗根據(jù)表1，選用L9正交表，按各實驗號進(jìn)行實驗。每次實驗按處方量稱取青風(fēng)藤120g，防己90g，加熱回流，提取液進(jìn)行濃縮，稱重，計算得膏率，分別稱取各組浸膏適量，甲醇溶解并定容至10ml容量瓶中，得9組供試品，分別測定青藤堿和粉防己堿的含量，測定青藤堿的HPLC條件：十八烷基硅烷為填充劑；甲醇乙腈水二乙胺（18∶14∶58∶0.1）為流動相；檢測波長為265nm。測定粉防己堿含量的HPLC條件：十八烷基硅烷為填充劑；甲醇乙腈水二乙胺（70∶10∶20∶0.1）為流動相；檢測波長為283nm。

2.3正交實驗及方差分析見表2～3。表2正交實驗設(shè)計（略）表3方差分析（略）

X：青風(fēng)藤為方中臣藥，防己為佐藥，所以經(jīng)過加權(quán)后，X=青風(fēng)藤×60%+防己×40%。X1，X2分別表示兩次重復(fù)實驗所得數(shù)據(jù)經(jīng)加權(quán)后的數(shù)值。

F0.05(2,17)=3.59,F0.01(2,17)=6.11,由方差分析表可知，4因素均有顯著性差異，根據(jù)實驗結(jié)果,因素D應(yīng)取D3，即提取3次。因素B應(yīng)取B3，即加10倍量醇。因素A應(yīng)取A2,即70%醇提。因素C應(yīng)取C2，即提取時間為2h。

2.4乙醇用量的單因素考察在其他因素確定的前提下，以粉防己堿和青藤堿含量為指標(biāo)成分考察乙醇用量為14倍，18倍時工藝提取情況。結(jié)果見表4。表4乙醇用量的單因素考察（略）

乙醇用量為14倍時，提取的指標(biāo)成分含量高，因此確定乙醇用量為14倍。

2.5工藝驗證取同樣藥材，按上述優(yōu)選工藝進(jìn)行操作，粉防己堿含量為0.34%。青藤堿含量為0.58%（與藥材比）。

3討論

根據(jù)正交實驗，確定防己和青風(fēng)藤最佳提取工藝為以70%醇濃度的乙醇為提取液，加醇量為藥材的16倍，提取3次，2h/次。

防己、青風(fēng)藤提取工藝中所依據(jù)的指標(biāo)，采用的是將粉防己堿和青藤堿含量進(jìn)行加權(quán)后的數(shù)值。加權(quán)系數(shù)應(yīng)根據(jù)兩味藥物在方中所起的作用進(jìn)行慎重選擇，本實驗確定臣藥青風(fēng)藤的加權(quán)系數(shù)為0.6，佐藥防己的加權(quán)系數(shù)為0.4。

正交實驗中，因素B和D均具有顯著性差異，根據(jù)極差分析，所取水平均為設(shè)定的最高水平，因此應(yīng)考察加醇量在10倍以上，提取次數(shù)在3次以上時的情況。結(jié)合大生產(chǎn)的實際情況和兩因素的交互作用，確定提取次數(shù)為3次，在此基礎(chǔ)上，對乙醇用量進(jìn)行單因素考察，實驗結(jié)果表明，當(dāng)乙醇用量為藥材量的14倍時，成分含量較高，提取較完全。新晨：

【參考文獻(xiàn)】

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