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《陜西中醫(yī)雜志》2015年第五期

1實(shí)驗(yàn)方法

1．1實(shí)驗(yàn)分組與給藥：實(shí)驗(yàn)動物小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分成6組，每組20只，3個給藥組灌胃給予延齡草溶液（低劑量13．4g／kg、中劑量20g／kg和高劑量30g／kg）、陽性對照組給予地西泮分散液（劑量為70mg／kg）和中藥對照組給予酸棗仁溶液（劑量為20g／kg）、陰性對照組給予相同容量的生理鹽水。

1．2直接睡眠實(shí)驗(yàn)：各組動物分組和給藥處理方法同“1．4．1”項(xiàng)，連續(xù)灌胃7d，觀察各組小鼠的睡眠發(fā)生率、鎮(zhèn)靜率。以小鼠發(fā)生靜臥15s或以上時間的現(xiàn)象來判斷藥物有鎮(zhèn)靜效果，以翻正反射消失（即將小鼠置于背臥位時，1min內(nèi)不能翻正）為判斷指標(biāo)，表示小鼠進(jìn)入睡眠狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)應(yīng)在安靜、通風(fēng)、室溫的環(huán)境下進(jìn)行［7］。鎮(zhèn)靜率＝靜臥小鼠數(shù)／實(shí)驗(yàn)動物數(shù)×100％；入睡率＝入睡小鼠數(shù)／實(shí)驗(yàn)動物數(shù)×100％。

1．3對小鼠自主活動的影響：實(shí)驗(yàn)前首先要篩選出各組小鼠的自主活動次數(shù)無顯著性差異，即選擇5min內(nèi)自主活動數(shù)在120次以上的正常小鼠，并將符合條件的小鼠隨機(jī)分配到各實(shí)驗(yàn)組，各組動物分組與給藥處理同“

1．1”項(xiàng)，末次灌胃給藥50min后，將小鼠依次放入記錄儀中，適應(yīng)環(huán)境5min后，記錄5min內(nèi)的自主活動次數(shù)。實(shí)驗(yàn)在安靜、通風(fēng)的環(huán)境中進(jìn)行［7－8］。

1．4與閾下劑量戊巴比妥鈉協(xié)同鎮(zhèn)靜作用實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)動物分組和給藥處理方法同“1．4．1”項(xiàng)，連續(xù)灌胃7d，最后一次灌胃50min后，各組小鼠腹腔注射劑量為30mg／kg的戊巴比妥鈉（經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)測得的，90％～100％的小鼠發(fā)生翻正反射不消失的最大劑量），記錄小鼠30min內(nèi)鎮(zhèn)靜率、入睡百分率，判斷方法同1．4．2。同時記錄入睡動物的睡眠時間（以翻正反射消失至恢復(fù)這段時間為動物睡眠時間）。實(shí)驗(yàn)在安靜、通風(fēng)、室溫環(huán)境下進(jìn)行［7－8］。

1．5與閾上劑量戊巴比妥鈉協(xié)同催眠作用實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)動物分組和給藥處理方法同“1．4．1”項(xiàng)，連續(xù)灌胃7d，最后一次灌胃50min后，各組小鼠腹腔注射劑量為40mg／kg的戊巴比妥鈉（經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)測得的，100％的小鼠發(fā)生翻正反射消失的最小劑量），判斷方法同1．4．4，記錄動物睡眠潛伏期和睡眠時間。實(shí)驗(yàn)在安靜、通風(fēng)、室溫環(huán)境下進(jìn)行［7－8］。

1．6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：對睡眠時間、睡眠潛伏期等計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（珚x±s）表示，組內(nèi)采用方差分析，組間比較均采用兩樣本均數(shù)的t檢驗(yàn)；對睡眠延長率、入睡率等計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。

2實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2．1直接睡眠實(shí)驗(yàn)結(jié)果直接睡眠實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1，表明延齡草給藥組與陽性對照組均有明顯的鎮(zhèn)靜作用，但無睡眠現(xiàn)象發(fā)生，入睡率均為0，各組間無明顯差異。

2．2對小鼠自主活動的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示，延齡草各給藥組具有顯著的鎮(zhèn)靜作用。與陰性對照組相比，低劑量與中劑量給藥組可顯著減少小鼠的自主活動能力（P＜0．05），高劑量藥物組可極顯著減少小鼠的自主活動能力（P＜0．01），鎮(zhèn)靜催眠效果與酸棗仁組相當(dāng)。

2．3延齡草提取液與閾下劑量戊巴比妥鈉協(xié)同鎮(zhèn)靜作用的實(shí)驗(yàn)結(jié)果由表3可見，與陰性對照生理鹽水組相比，各給藥組、中藥酸棗仁組、陽性對照地西泮組均顯著增加小鼠的入睡百分率，顯著縮短小鼠的睡眠潛伏期，且均能顯著延長睡眠時間，說明各組受試藥物有協(xié)同戊巴比妥鈉鎮(zhèn)靜作用。與陽性對照地西泮相比，低劑量組的藥效弱于對照組，且有顯著性意義（P＜0．05），高劑量給藥組、中藥酸棗仁組與地西泮組藥效相近。

2．4延齡草提取液與閾上劑量戊巴比妥鈉協(xié)同催眠作用的實(shí)驗(yàn)結(jié)果由表4可見，各給藥組、中藥酸棗仁組、陽性對照地西泮組對閾上劑量戊巴比妥鈉的催眠作用表現(xiàn)出協(xié)同作用，可縮短小鼠睡眠潛伏期，延長睡眠時間，且隨著劑量的增加，小鼠睡眠潛伏期縮短、睡眠時間延長。

3討論

睡眠是人正常的生理現(xiàn)象，能使機(jī)體復(fù)原、整合和鞏固記憶環(huán)節(jié)，睡眠質(zhì)量問題直接影響著人的身心健康、正常的生活和工作。臨床上多采用巴比妥類和苯二氮卓類藥物進(jìn)行治療，長期服用會產(chǎn)生許多副作用，如焦慮、幻覺、恐懼、妄想及驚厥等。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為引起失眠主要有情志失常、過勞過逸、飲食不節(jié)及病后體虛等病因。在中醫(yī)辨證論治思想指導(dǎo)下應(yīng)用中藥治療失眠癥，如應(yīng)用天麻、酸棗仁、知母等單味或復(fù)方，具有鎮(zhèn)靜、催眠、抗眩暈、腦保護(hù)等作用［9］，同時中藥可減少鎮(zhèn)靜催眠藥副作用及成癮性。陜西產(chǎn)延齡草是“太白七藥”之一，又名芋兒七、獅兒七。本實(shí)驗(yàn)通過不同劑量延齡草提取液對小鼠自主活動能力測定實(shí)驗(yàn)、對閾下劑量及閾上劑量戊巴比妥鈉鎮(zhèn)靜催眠作用的協(xié)同效果實(shí)驗(yàn)與研究，發(fā)現(xiàn)延齡草提取液有抑制小鼠自主活動的能力，對戊巴比妥鈉的鎮(zhèn)靜催眠作用有協(xié)同功效，表現(xiàn)出明顯的鎮(zhèn)靜睡眠藥理作用。后續(xù)研究中我們將對其鎮(zhèn)靜催眠作用與腦保護(hù)方面的主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)進(jìn)行研究，探討其物效關(guān)系，同時促進(jìn)對該藥材的開發(fā)利用。

作者：孫艷平汪興軍張彥單位：西安醫(yī)學(xué)院