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摘要:目的探討血清標本在不同放置時間及溫度條件下對30項常規生化檢測結果的影響。方法留取2017年5—7月哈爾濱醫科大學附屬第一醫院的200份生化檢測患者的血液標本。分為時間組和溫度組，時間組100份血清標本，每個分裝成4份，一份于1h檢測，三份放置2～8℃冰箱內于24、48、72h檢測;溫度組100份血清標本，每個分成3份，一份在室溫1h檢測，兩份分別放置－15℃、－70℃冰箱內于1周后檢測，檢測30項生化指標。結果與放置1h相比，24h、48h、72h的天冬氨酸轉氨酶、丙氨酸轉氨酶(ALT)、白蛋白、K+、Na+、Cl－、總膽汁酸、α羥丁酸脫氫酶(α-HBDH)、胱抑素C(CysC)升高(P＜0．05)，直接膽紅素(DBil)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)降低(P＜0．05);與室溫相比，24h、48h、72h的ALT、DBil、堿性磷酸酶、乳酸脫氫酶、CK-MB、α-HBDH、CysC均降低，肌酐、β2微球蛋白升高(P＜0．05)。結論針對不同的生化項目選擇血清標本的儲存溫度和時間，確保檢測結果的真實性，可為臨床的診斷和科研工作提供可靠的檢測數據，保證工作順利進行。

關鍵詞:血清標本;溫度;時間;生化結果

血液標本的檢測對臨床診斷和治療是必不可少的輔助手段，結果是否準確直接影響臨床工作。雖然生化檢測由早期的半手工操作發展到現代的全自動分析儀大大提高了工作效率和準確性，但是自動生化分析儀在檢測前需耗費時間對儀器進行日常維護、校準和質控，而患者采血時間偏早，血標本從病房或門診送到實驗室后再對標本進行離心、分類、編號等操作，需檢測的標本數量多等因素使血液采集后不能即刻檢測［1-2］。直接影響血液檢測結果的因素包括患者采血前的飲食和生活方式，采血方法及采血管的選擇，物流運輸條件，檢驗儀器的狀態及血清儲存時間和溫度等［3-6］。文獻研究結果顯示，血液標本放置時間及溫度的不同會對部分生化項目的檢測結果產生影響，所以需要對血液的儲存方式進行探討［7-9］。本實驗通過設置時間和溫度兩個變量分別進行研究，明確臨床血清標本儲存的合適溫度及時間，以期為生化指標檢測前的準確度和檢測后的精密度提供一定的臨床價值，從而更好地為臨床和科研工作服務。

1資料與方法

1．1一般資料

留取2017年5—7月哈爾濱醫科大學附屬第一醫院的200份生化檢測患者的血液標本，其中男96例，女104例，年齡20～75歲，平均(43．6±15．5)歲。

1．2方法

200份血液均為晨起空腹靜脈血3mL，無溶血，無黃疸，無乳糜。離心取血清加蓋放置，分為時間組和溫度組，時間組由100份血清標本組成，每個標本分裝成4份，一份于1h檢測，另外3份放置2～8℃冰箱內于24、48、72h檢測;溫度組由100份血清標本組成，每個標本分成3份放置，一份在室溫即刻檢測，兩份分別放置－15℃、－70℃冰箱內于1周后檢測，檢測30項生化指標。儀器采用日本OLYMPUSAU-5400全自動生化分析儀;試劑與校準品、質控品均為AU-5400適用試劑。對日本OLYM-PUSAU-5400全自動生化分析儀進行日常維護，校準和質控，質控合格后，嚴格執行操作步驟進行檢測。

1．3觀察指標

檢測天冬氨酸轉氨酶(aspartateaminotransferase，AST)、丙氨酸轉氨酶(alanineamin-otransferase，ALT)、總蛋白(totalprotein，TP)、白蛋白(albumin，ALB)、總膽紅素(totalbilirubin，TBil)、直接膽紅素(directbilirubin，DBil)、γ谷氨酰轉氨酶(γ-glutamyltransferase，γ-GGT)、堿性磷酸酶(alkalinephosphatase，AKP)、乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase，LDH)、肌酐(creatinine，Cr)、尿酸(uricacid，UA)、葡萄糖(glucose，GLU)、K+、Na+、Cl－、總膽固醇(totalcholesterol，CHO)、三酰甘油(triglyceride，TG)、高密度脂蛋白膽固醇(high-densitylipoproteincholes-terol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low-densitylipoproteincholesterol，LDL-C)、肌酸激酶(creatinekinase，CK)、肌酸激酶同工酶(creatinekinaseisoenzymes，CK-MB)、總膽汁酸(totalbileacid，TBA)、膽堿酯酶(cholinesterase，CHE)、α羥丁酸脫氫酶(alpha-hydroxybutyricdehydrogenase，α-HBDH)、同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)、胱抑素C(cystatinC，CysC)、視黃醇結合蛋白(retinol-bindingprotein，RBP)、脂蛋白a(lipoprotein(a)，LPa)、β2微球蛋白(β2-microglobulin，β2-MG)、血尿素氮(bloodureanitrogen，BUN)30項生化指標。

1．4統計學方法

采用SPSS20．0統計學軟件對數據進行分析，計量資料用均數±標準差(x珋±s)表示，不同時間和溫度比較采用單因素方差分析，兩兩比較使用LSD-t檢驗。P＜0．05為差異有統計學意義。

2結果

2．1血清不同放置時間生化指標測定值比較

與放置1h相比，24h、48h、72h的AST、ALT、ALB、K+、Na+、Cl－、TBA、α-HBDH、CysC升高(P＜0．05)，DBil、CK-MB降低(P＜0．05)，不同放置時間的TP、TBil、γ-GGT、AKP、LDH、CREA、UA、GLU、CHO、TG、HDL-C、LDL-C、CK、CHE、Hcy、RBP、Lpa、β2-MG、BUN比較差異無統計學意義(P＞0．05)。

2．2血清不同放置溫度生化指標測定值比較

與室溫相比，ALT、DBil、AKP、LDH、CK-MB、α-HBDH、CysC均降低，CREA、β2-MG升高(P＜0．05)，不同放置溫度AST、TP、ALB、TBil、γ-GGT、UA、GLU、K+、Na+、Cl－、CHO、TG、HDL-C、LDL-C、CK、TBA、CHE、Hcy、RBP、Lpa、BUN比較差異無統計學意義(P＞0．05)。

3討論

血液檢測指標能夠直觀地反映人體的生理變化，而生化檢測是醫院常見的血液檢驗項目，檢測結果的準確性受患者身體狀態、生化分析儀、血液標本采集及前處理等因素的影響［10-11］，其中血清分離膠適用于生化血清的分離［12］，可以很好地保持血清成分的性狀和穩定性，其他采血管會對生化結果有不同程度的影響，如乙二胺四乙酸鹽、草酸鹽抗凝血不能用于血鈣測定，用草酸鹽或氟化物作抗凝劑會抑制LDH、α-HBDH的活力等。血液標本放置時間延長后，紅細胞消耗葡萄糖使血糖含量降低［13］，血細胞中的鉀離子及酶類含量比血清高，所以在血液采集后應及時離心，分離血清，排除血細胞對生化指標的影響［14］。等待檢測時，分離后的血清應加蓋密封，否則血清水分蒸發使結果偏大［15］。根據以往文獻結果顯示，血清相對血液的影響因素更少，穩定性更好，檢測結果偏差更小，更適合儲存［16-18］。本研究結果顯示，與放置1h相比，24h、48h、72h的AST、ALT、ALB、K+、Na+、Cl－、TBA、α-HBDH、CysC升高(P＜0．05)，DBil、CK-MB降低(P＜0．05);與室溫相比，ALT、DBil、AKP、LDH、CK-MB、α-HBDH、CysC均降低，CREA、β2-MG升高(P＜0．05)。離子指標可冰凍保存［19］，在冰凍復融后對血清檢測，酶類指標的檢測值前后變化幅度較大，可知凍融對ALT、HBDH等酶類指標檢測結果的影響很大［20］。排除血細胞對血糖的代謝，血糖在冷藏時可穩定保存3d，在冰凍條件時可保存1周。醫院保存血清的溫度通常為2～8℃，檢測后的血清一般放置1周，以便復檢及防止臨床糾紛的發生。本研究結果顯示，放置后的部分生化項目的檢測數值的變化差異有統計學意義，即使數值變化在實驗室允許范圍內，但其酶活性不再穩定，檢測前的準確度和檢測后的精密度受到影響，當臨床或科研工作需要對血清標本進行重測時，應根據所需具體生化項目判斷結果是否可用，必要時應重新采取患者血液標本進行檢測，以保證結果的真實性［21］。保存血清要耗費人力及物力，實現針對不同項目選擇具體的保存方法，不僅能使資源利用達到最優化，也可減輕檢驗人員的負擔。規范化管理血清標本是實驗室工作的重點，從根本上減少誤差，使血液檢驗能更真實地反映患者的情況。本實驗選取的樣本量大，使研究結果具有足夠的可信度;檢測項目多，對樣本儲存時間以及溫度的設置具有科學性和創新性，這對指導生化室標本儲存具有重要意義;實驗條件設置更符合醫院實際儲存血清的情況。在實際工作中，針對不同項目選擇具體的保存方法對臨床或科研工作具有很大的實用價值，至于更詳盡的保存方法仍需更大樣本研究方可確定。

作者：王丹鳳；馮磊光；馬學華；王丹；宋志偉；計春輝；石國欣單位：哈爾濱醫科大學附屬第一醫院檢驗科