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《農(nóng)產(chǎn)品加工雜志》2015年第六期
1材料與方法
1.1材料與儀器
1.1.1試驗(yàn)材料新鮮大蒜、苦瓜,購于湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)濱湖菜市場(chǎng)。大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、毛霉等供試菌,湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院產(chǎn)品。微生物培養(yǎng)基為營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、麩皮、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基。
1.1.2試驗(yàn)儀器新苗DNP-9272BS-Ⅲ型恒溫培養(yǎng)箱,上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司產(chǎn)品;3870C型立式滅菌器,山東新華醫(yī)療器械股份有限公司產(chǎn)品;SW-CJ-2D型雙人單面(垂直)凈化工作臺(tái),江蘇通凈凈化設(shè)備有限公司產(chǎn)品;BS224S型電子天平,北京賽多利斯儀器有限公司產(chǎn)品;JYL-CO20型九陽物料粉碎機(jī),九陽股份有限公司產(chǎn)品;LD5-2A型離心機(jī),北京雷伯爾離心機(jī)有限公司產(chǎn)品;DGG-9070A型干燥箱,上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司產(chǎn)品;MJX-250B-Z型霉菌培養(yǎng)箱,上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠產(chǎn)品。
1.2試驗(yàn)方法
1.2.1大蒜、苦瓜的預(yù)處理取新鮮去皮大蒜瓣,用無菌水震蕩清洗3遍,用粉碎機(jī)將大蒜粉碎成蒜泥后置于50℃烘箱中烘干,裝入無菌袋中于4℃下貯藏備用。將鮮苦瓜洗凈,去瓤,切片,放入50℃干燥箱烘干,干燥的苦瓜用粉碎機(jī)粉碎后裝入無菌袋中4℃貯藏備用。
1.2.2菌懸液的制備分別取試驗(yàn)菌種,接種于斜面培養(yǎng)基試管中,培養(yǎng)活化后加入到無菌水中,充分振蕩得菌懸液。利用稀釋平板法測(cè)定菌懸液的含菌量,使其控制在1×106CFU/L左右。
1.2.3濾紙片擴(kuò)散法[7]進(jìn)行抑菌效果試驗(yàn)取定性濾紙,將其制成直徑5mm的圓片,經(jīng)滅菌后再浸泡于待測(cè)的復(fù)配提取液中,瀝干后將濾紙片貼放在制備好的含菌培養(yǎng)基表面,紙片之間及紙片與平板邊緣距離15mm,每個(gè)平板貼放4~6張濾紙片。放入相應(yīng)的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌37℃培養(yǎng)24h,毛霉28℃培養(yǎng)48h),測(cè)量抑菌圈直徑的大小。
1.2.4不同比例對(duì)提取液抑菌效果的影響分別按照大蒜與苦瓜的質(zhì)量比1∶4,1∶3,1∶2,1∶1,2∶1,3∶1,4∶1進(jìn)行復(fù)配混合,將復(fù)配后的物料加入一定量的無菌水振蕩制成抑菌液。得到的抑菌液再進(jìn)行抑菌效果試驗(yàn),每個(gè)比例做3個(gè)平行試驗(yàn)。培養(yǎng)后觀察抑菌效果,并得出結(jié)論。
1.2.5不同質(zhì)量濃度對(duì)提取液抑菌效果的影響按抑菌效果最佳物料比例稱取一定量經(jīng)預(yù)處理的大蒜、苦瓜原料,用無菌水配制成質(zhì)量濃度為1,0.5,0.25,0.125,0.0625g/mL的溶液后做抑菌效果試驗(yàn),每個(gè)質(zhì)量濃度做3個(gè)平行試驗(yàn)。培養(yǎng)后觀察抑菌效果,并得出結(jié)論。1.2.6溫度對(duì)提取液抑菌效果的影響取抑菌效果最佳的比例經(jīng)預(yù)處理的大蒜、苦瓜原料,并用無菌水將其制成最佳質(zhì)量濃度的抑菌液,將其置于室溫,50,70,90,121℃共5個(gè)條件下,處理15min后做抑菌效果試驗(yàn),每個(gè)溫度做3個(gè)平行試驗(yàn)。培養(yǎng)后觀察抑菌效果,并得出結(jié)論。
2結(jié)果和分析
2.1不同比例對(duì)提取液抑菌效果的影響不同比例對(duì)提取液抑菌效果的影響見表1。從表1可以看出,大蒜苦瓜復(fù)配提取液不同比例抑菌效果試驗(yàn)表明,大蒜與苦瓜復(fù)配比例為1∶1的試驗(yàn)結(jié)果優(yōu)于其他復(fù)配比例。從抑菌效果可以看出,復(fù)配液對(duì)試驗(yàn)菌均有一定的抑菌效果,對(duì)細(xì)菌的抑制效果較強(qiáng),而對(duì)毛霉的抑菌效果較弱。
2.2不同質(zhì)量濃度對(duì)提取液抑菌效果的影響不同質(zhì)量濃度對(duì)提取液抑菌效果的影響見表2。從表2可以看出,大蒜苦瓜復(fù)配液不同質(zhì)量濃度抑菌效果試驗(yàn)表明,質(zhì)量濃度越高抑菌效果越明顯,當(dāng)質(zhì)量濃度低于一定程度時(shí)對(duì)毛霉幾乎沒有抑菌效果。
2.3溫度對(duì)提取液抑菌效果的影響溫度對(duì)提取液抑菌效果的影響見表3。從表3可以看出,大蒜苦瓜復(fù)配液經(jīng)不同溫度處理后抑菌結(jié)果表明,復(fù)配液經(jīng)過70℃以上高溫處理后,抑菌效果明顯降低;90℃處理后的復(fù)配提取液,可能因?yàn)楦邷厥箯?fù)配提取液的抑菌成分被破壞或者揮發(fā),故對(duì)供試菌的抑制作用不是很明顯,也證明了復(fù)配提取液在90℃以上的高溫下不穩(wěn)定。高溫處理后,雖然抑菌圈直徑大幅度降低,但仍然表現(xiàn)出一定的抑菌效果。
3結(jié)論
大蒜苦瓜復(fù)配液對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌均有一定的抑菌效果,對(duì)細(xì)菌的抑制效果較強(qiáng),而對(duì)毛霉的抑菌效果較弱。大蒜苦瓜復(fù)配比例為1∶1時(shí),抑菌效果較優(yōu)于其他復(fù)配比例,并且質(zhì)量濃度越高抑菌作用越強(qiáng),但不適宜高溫保存。
作者:昌超秦丹單位:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院