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《黑龍江醫(yī)藥》2017年第1期

［摘要］目的：分析人乳頭瘤病毒（HPV）在云南地區(qū)的感染狀況及其分布規(guī)律。方法：隨機(jī)選取云南省昆明、曲靖、昭通、江河、文山及保山6個(gè)地區(qū)34401例有性生活史及單一宮頸成年婦女，采集宮頸上皮細(xì)胞，運(yùn)用多重PCR擴(kuò)增和LuminexxMAP流式熒光雜交分型檢測(cè)技術(shù)對(duì)27種HPV進(jìn)行分型檢測(cè)，計(jì)算HPV在云南省6個(gè)地區(qū)的感染率并分析HPV的地區(qū)差異。結(jié)果：共檢出HPV陽性標(biāo)本4262例，其中保山地區(qū)感染率最高（174％），曲靖最低（10．8％）；各地區(qū)感染率兩兩比較，昭通、曲靖HPV感染率與保山、紅河、昆明，保山與文山感染率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；單一亞型感染者3421例（9．9％）、兩型混合感染者658例（1．9％）、3型及以上混合感染者184例（0．5％），各地區(qū)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05）。結(jié)論：云南省邊境地區(qū)及經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)HPV感染率較高，HPV單一及混合亞型感染無地區(qū)間差異。

［關(guān)鍵詞］基因，結(jié)構(gòu)，病毒；乳頭狀瘤病毒，人；宮頸腫瘤；流行病學(xué)；基因芯片

在我國(guó)，每年約有10萬例子宮頸癌新發(fā)病例，約3萬名婦女死于子宮頸癌。流行病學(xué)研究證實(shí)，反復(fù)持續(xù)高危人乳頭狀瘤病毒（humanpapillomavirus，HPV）感染是宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervicalintraepithelialneoplasia，CIN）及宮頸癌發(fā)生的必要條件。云南省是我國(guó)重要的邊疆省份和多民族聚居區(qū)，總?cè)丝?596萬，下轄8個(gè)市、8個(gè)少數(shù)民族自治州，與越南、老撾、緬甸接壤，國(guó)境線長(zhǎng)4060km，這些獨(dú)特的地理位置與人群分布特點(diǎn)導(dǎo)致云南省部分地區(qū)HPV感染與國(guó)內(nèi)其他地區(qū)有一定差異，本課題組于2010－2015年對(duì)云南省28457例育齡婦女HPV感染情況進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)查，結(jié)果顯示，在適齡婦女中HPV感染率為129％，其中單一亞型感染率為106％，多重感染率26％，感染率低于李霓等研究國(guó)內(nèi)婦女HPV感染率為161％的水平，且常見感染型別不盡相同。由于云南省特殊的地理位置及人文環(huán)境，各地區(qū)經(jīng)濟(jì)發(fā)展存在一定的差異，本研究在前期研究基礎(chǔ)上，選取云南省6個(gè)代表地區(qū)34401例有性生活史及單一宮頸的成年女性進(jìn)行HPV篩查，以了解云南省各地區(qū)HPV感染情況。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來源選取

2010年5月～2016年12月云南省昆明、曲靖、昭通、紅河、文山及保山等地區(qū)市縣級(jí)醫(yī)院門診、體檢或住院并有性生活史及單一宮頸的成年女性34401例，15～85歲，平均（372±76）歲。排除有異常細(xì)胞學(xué)病史、宮頸癌及宮頸癌前病變史、宮頸病變治療史，排除目前正在妊娠或者妊娠終止3個(gè)月內(nèi)、宮頸發(fā)育異常、雙宮頸或者宮頸局部不明腫瘤者。嚴(yán)格按照HPV核酸分型檢測(cè)試劑說明書要求，采集受試者宮頸上皮，加入有細(xì)胞保存液的樣本管內(nèi)，4℃保存，3d內(nèi)送檢。所有參加者實(shí)驗(yàn)前均簽署知情同意書。

1.2HPV分型方法

HPV篩查采用多重PCR擴(kuò)增和LuminexxMAP流式熒光雜交分型檢測(cè)方法，同時(shí)檢測(cè)27種HPVDNA（包括HPV16、26、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、82、6、11、40、42、43、44、55、61、81、83），共設(shè)置2類探針，28種分類微球。其中，與HPVDNA雜交的探針包被在27個(gè)分類微球上，對(duì)應(yīng)型別特異性探針的信號(hào)為陽性將被判定為該型別HPV陽性。質(zhì)控微球是能與人β球蛋白基因雜交的探針，其結(jié)果提示取樣、抽提、PCR和雜交整個(gè)過程是否符合要求。樣本收集及檢測(cè)過程嚴(yán)格按照試劑盒說明書（上海透景HPV核酸分型檢測(cè)試劑）進(jìn)行。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用

χ2檢驗(yàn)對(duì)各地區(qū)感染率的差異進(jìn)行分析。多重比較采用Bonferroni校正，校正后P＜005為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1感染率

在統(tǒng)計(jì)的34401例樣本中，共檢出HPV陽性4262例，感染率為124％。單一亞型感染者3421例（99％），兩型混合感染者658例（19％），3型及以上混合感染者184例（05％）。各地區(qū)中，保山地區(qū)感染率最高（174％），曲靖最低（108％），各地區(qū)間感染率兩兩比較，昭通、曲靖與保山、紅河、昆明，保山與文山差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005）。

2.2不同類型

HPV感染率4262例HPV陽性樣本中，單一亞型占比最高（803％）；多重感染的842例樣本中，2種HPV型別的雙重感染最為常見、占多重感染的781％，3種HPV型別以上陽性樣本占多重感染的209％。各地區(qū)間單一型別、兩種及兩種以上HPV型別HPV感染率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞005）。

3討論

HPV是一種嗜黏膜和皮膚上皮性病毒，目前已發(fā)現(xiàn)100余種HPV亞型，其中與泌尿生殖道感染相關(guān)的有30多種。依據(jù)其對(duì)生殖系統(tǒng)的致癌性可分為低危型和高危型，前者主要引起尖銳濕疣等良性病變，后者常引起宮頸癌等惡性病變［2］。隨著HPV感染研究的深入，HPV各主要致病型在不同子宮頸病變中的情況逐漸清楚。目前，大量的研究證明，宮頸癌是惟一1種經(jīng)過醫(yī)學(xué)干預(yù)能使發(fā)病率和病死率下降的惡性腫瘤。因此，HPV感染檢測(cè)已成為篩查和預(yù)防宮頸癌的關(guān)鍵問題之一［6］。云南省西部和西南部與緬甸接壤，南部與越南、老撾毗鄰，東部與廣西、貴州相連，北部與四川為鄰，西北部緊倚西藏，其獨(dú)特的地域特點(diǎn)對(duì)區(qū)域間HPV感染差異形成一定影響。在本次對(duì)云南省6個(gè)地區(qū)34401例婦女HPV檢測(cè)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，昭通（111％）、曲靖（108％）2個(gè)地區(qū)感染率較其余地區(qū)偏低，且與其它多個(gè)地區(qū)間感染率差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005），從地域來看，昭通、曲靖區(qū)位緊鄰，均位于云南省滇東北地區(qū)，靠近內(nèi)陸省份。保山、紅河、文山3個(gè)地區(qū)位于滇西、滇南地區(qū)，緊鄰國(guó)境，昆明為云南省省會(huì)城市，流動(dòng)人口較大，經(jīng)濟(jì)較其余地區(qū)發(fā)達(dá)，從感染率差異來看，顯示云南省邊境地區(qū)及經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)HPV感染率較高，HPV感染率與各地區(qū)復(fù)雜的地理環(huán)境相關(guān)。

多重感染提示機(jī)體免疫機(jī)制清除病毒不利，預(yù)示著病情進(jìn)展，會(huì)增加宮頸疾病的嚴(yán)重程度，并導(dǎo)致持續(xù)性的HPV感染，致罹患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)增加，課題組前期調(diào)查結(jié)果顯示云南省HPV陽性婦女中多重感染個(gè)體的比例（664／3681＝1804％；664／28457＝23％），低于國(guó)內(nèi)報(bào)道的上海（366％）、北京（277％）和山西（243％），與河南（198％）、新疆（155％）兩省較接近。本次對(duì)云南省6個(gè)地區(qū)4262例HPV陽性數(shù)據(jù)細(xì)分為單一亞型感染（3421例，99％），雙重亞型感染（658例，19％），三重及以上亞型感染（184例，05％），并分別對(duì)各地區(qū)間數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，結(jié)果顯示各地區(qū)在單一亞型感染、雙重亞型感染、三重及以上亞型感染中均無地區(qū)差異。云南省是一個(gè)民族構(gòu)成極為多樣化的省份，漢族和25個(gè)少數(shù)民族在區(qū)域內(nèi)雜居，生活方式及文化習(xí)性存在相互融合，差異較小，這也可能是造成地區(qū)間HPV單一及混合亞型感染無差異的重要因素。

近年來，隨著HPV檢測(cè)技術(shù)的不斷提高，對(duì)在宮頸病變中作用的研究不斷深入，越來越多的學(xué)者開始關(guān)注HPV在宮頸病變的發(fā)生、發(fā)展中的作用。2016年7月GlaxoSmithKline公司的HPV16、18型二價(jià)疫苗獲得國(guó)家食藥監(jiān)總局批準(zhǔn)上市，隨著疫苗的推廣應(yīng)用，預(yù)計(jì)未來云南省HPV感染率將會(huì)發(fā)生變化，經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)和欠發(fā)達(dá)地區(qū)間差異將更為明顯。本次統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)來自于云南省6個(gè)地區(qū)，具有較好的代表性和均衡性，可反映云南省HPV感染的獨(dú)特地域特點(diǎn)和差異，結(jié)果可為本地區(qū)HPV的感染監(jiān)測(cè)和預(yù)防提供重要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，對(duì)臨床防治宮頸癌、預(yù)測(cè)病變進(jìn)展、評(píng)估預(yù)后有著極其重要的意義。

4參考文獻(xiàn)

［1］劉峰，李錚，程思，等．云南地區(qū)人乳頭瘤病毒感染流行病學(xué)調(diào)查［J］．重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2013（9）：1048－1051．

［2］李霓，代敏．中國(guó)婦女人乳頭狀瘤病毒感染的多中心橫斷面研究［J］．中華疾病控制雜志，2008（5）：411－415．

作者：李錚1；史荔2；嚴(yán)志凌3；李傳印2；劉舒媛2；姚宇峰2；劉峰1，4 單位：1．昆明市延安醫(yī)院，2．中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院，3．昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院，4．武警云南省總隊(duì)醫(yī)院